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人脂肪型脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP4)ELISA試劑盒說明書
閱讀:1099 發(fā)布時間:2015-11-11人脂肪型脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP4)ELISA試劑盒說明書
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一、操作因素對ELISA結(jié)果的影響ELISA操作步驟復(fù)雜,,操作不當(dāng)將引起較大的誤差。以下敘述各個步驟中的影響因素,。
1.加樣
2.溫育
3.洗滌
4.顯色
5.比色
二,、灰區(qū)的設(shè)置通常情況下,ELISA定性實(shí)驗(yàn)以“陽性"和“陰性"來報告結(jié)果,,兩者間有一條分界線被稱為“陽性判斷值"(cut-off value,,CO值),這是定性免疫測定結(jié)果報告的依據(jù),。
三,、標(biāo)本復(fù)查ELISA手工檢測過程復(fù)雜,影響因素較多,,即使室內(nèi)質(zhì)控在控,,也可能因孔間差異而造成結(jié)果的差異,因此加大復(fù)查力度是保證結(jié)果準(zhǔn)確性的可靠方法,,比如對HBsAg,、HBeAg,、HCV-Ab、HIV-Ab,、TP-Ab等項(xiàng)目的可疑,、弱陽性標(biāo)本及少見模式的檢測結(jié)果進(jìn)行復(fù)查。
四,、結(jié)果判斷和報告常用下列幾種方法表示結(jié)果:
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1.定性測定
2.半定量測定 結(jié)果一般以滴度表示,。
3.定量測定 即用已知量的標(biāo)準(zhǔn)品作一系列稀釋后進(jìn)行ELISA測定,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,,結(jié)果以量或單位表示,。在ELISA定量檢測中每一塊反應(yīng)板都必須繪制相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
4.結(jié)果報告
五,、操作步驟:用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法
1. 包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml,。在每個聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃ ,。次日,,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,,每次3分鐘,。(簡稱洗滌,下同),。
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2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,,置37℃ 孵育1小時。然后洗滌,。(同時做空白孔,,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3. 加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml,。37℃ 孵育0.5~1小時,洗滌,。完整版說明書可以向我們銷售索?。?/span>