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技術(shù)文章

怎樣辨別真假胎牛血清

閱讀:1825          發(fā)布時(shí)間:2015-7-20

市場(chǎng)上的胎牛血清品種繁復(fù),,魚(yú)龍混雜,許多科研工作者,,特別是剛觸摸細(xì)胞培育的人,,難以分辯血清質(zhì)量的好壞。咱們從以下幾點(diǎn)剖析
一,、外觀
拿到血清,,早觸摸的是血清外觀,對(duì)于短少細(xì)胞培育經(jīng)驗(yàn)的人來(lái)說(shuō),,外觀的判別尤為重要

1,、色彩
依據(jù)血紅蛋白含量的不同,胎牛血清可表現(xiàn)出黃色或赤色,我國(guó)的細(xì)胞培育用血清規(guī)范是不高于20mg/dl,,實(shí)際上,,血紅蛋白含量的凹凸對(duì)血清并無(wú)直接影響,這個(gè)指標(biāo)的含義在于能體現(xiàn)出采血進(jìn)程的謹(jǐn)慎規(guī)范程度,,杰出的操作能下降血清的溶血,。

國(guó)產(chǎn)血清的采血點(diǎn)很渙散,大多是由屠戶(hù)采血后馬上離心收集,,所以很少會(huì)有溶血,,表現(xiàn)出亮堂的蠟黃色,當(dāng)然,,國(guó)產(chǎn)血清也很少有規(guī)范含義上的胎牛血清,。

進(jìn)口胎牛血清或多或少總有點(diǎn)溶血,因?yàn)檎鎸?shí)的胎牛血清凝血功用差,,紅細(xì)胞簡(jiǎn)單決裂,。

總的來(lái)說(shuō),國(guó)產(chǎn)的血清呈現(xiàn)出蠟黃,。進(jìn)口的血清,,質(zhì)量佳的呈現(xiàn)出談黃、微赤色,,如Gibco 16000,,差點(diǎn)的呈現(xiàn)出橘赤色或鮮赤色。當(dāng)然,,熱滅活血清或保留不妥的血清,,因?yàn)檠t蛋白的損壞氧化,會(huì)呈現(xiàn)出暗紅,,甚至咖啡色,。

2、沉積
許多血清客戶(hù),,會(huì)發(fā)現(xiàn)進(jìn)口血清有沉積,,從而置疑血清的質(zhì)量問(wèn)題,這是沒(méi)有依據(jù)的,。

血清中的沉積是由纖維蛋白的凝集發(fā)生,,對(duì)血清質(zhì)量沒(méi)有任何影響,沉積的發(fā)生緣由許多,,和廠家的加工出產(chǎn)方式密切相關(guān),。

國(guó)產(chǎn)的血清,大多來(lái)自北方,,因?yàn)閮r(jià)格低廉,,保留環(huán)境都不好,從采血、冷凍,、運(yùn)送到出產(chǎn)會(huì)經(jīng)過(guò)屢次凍融,,每次凍融進(jìn)程,就會(huì)分出有些纖維蛋白沉積,,這么,,血清制品過(guò)濾后看起來(lái)反而愈加的“潔凈",很少有沉積發(fā)生,。

進(jìn)口的胎牛血清,,過(guò)濾分裝前很少會(huì)重復(fù)凍融,出產(chǎn)后的制品也是明澈的,,但跟著時(shí)刻的推移,,血清中的許多纖維蛋白會(huì)分出構(gòu)成沉積。當(dāng)然,,進(jìn)口的重生牛血清,,通常牛齡都在2周擺布,,血清中的各種蛋白含量顯著偏高,,出產(chǎn)后血清也許會(huì)渾濁,甚至有許多沉積,。

當(dāng)然,,購(gòu)買(mǎi)回來(lái)的血清都是冰凍狀態(tài),運(yùn)用時(shí)需求消融,,消融進(jìn)程佳在溫度較低的狀態(tài)下漸漸進(jìn)行,,不然沉積相對(duì)較多,雖然沉積并不直接影響血清的質(zhì)量,,但對(duì)細(xì)胞的顯微觀察有一定的阻礙,。

3、弄清度
進(jìn)口胎牛血清因?yàn)榈鞍缀椭?lèi)等物質(zhì)含量低,,表現(xiàn)為淡薄,、清淡,而國(guó)產(chǎn)血清,,因?yàn)榻^大多數(shù)是重生牛血清,,相對(duì)而言愈加粘稠,色彩略深,,這對(duì)于開(kāi)始觸摸血清的人很難判別,,但把兩者進(jìn)行比照,可簡(jiǎn)單分辯,。

二,、首要技術(shù)指標(biāo)
現(xiàn)在國(guó)內(nèi)血清的質(zhì)量規(guī)范是2005版的《中華人民共和國(guó)藥典》,首要指標(biāo)有以下幾點(diǎn):

1、內(nèi)毒素
規(guī)范為不高于5EU/ml,。內(nèi)毒素是細(xì)菌破碎后細(xì)胞壁的成分,,因而內(nèi)毒素含量的凹凸可表現(xiàn)出采血到出產(chǎn)一系列進(jìn)程中的無(wú)菌操作狀況。現(xiàn)在,,國(guó)產(chǎn)血清根本都能到達(dá)這一請(qǐng)求,,許多進(jìn)口胎牛血清內(nèi)毒素含量反而更高,如Gibco 26140,,只請(qǐng)求不高于50EU/ml,,高出我國(guó)規(guī)范10倍,即使是16000,,也要10EU/ml,,血清質(zhì)量也未見(jiàn)影響??梢?jiàn),,內(nèi)毒素含量偏高不影響質(zhì)量,除非含量*,,預(yù)示著現(xiàn)已污染,。

2、總蛋白含量
胎牛血清通常規(guī)模是30-40mg/ml,,數(shù)值偏高,,闡明采血的牛齡偏大,不是胎牛,,數(shù)值偏低,,標(biāo)明血清也許摻水了。

3,、血紅蛋白
規(guī)范為不高于20mg/dl,,色彩越紅,數(shù)值越高,,反之,,數(shù)值越低。

4,、pH
國(guó)產(chǎn)血清,,大多高于7.5,進(jìn)口胎牛血清,,大多低于7.5,,詳細(xì)緣由不知道,也許和牛齡有關(guān),,這也能用來(lái)開(kāi)始辨別血清的來(lái)歷,。

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5,、微生物
包含細(xì)菌、霉菌,、支原體,、噬菌體、各類(lèi)病原性病毒等,。跟著國(guó)內(nèi)血清廠家出產(chǎn)條件的改進(jìn)進(jìn)步,,細(xì)菌、霉菌等“大型"微生物簡(jiǎn)直能100%操控,,支原體經(jīng)過(guò)0.1um過(guò)濾,,大多也能鏟除。大腸桿菌噬菌體的污染仍是對(duì)比嚴(yán)峻的,,首要是出產(chǎn)環(huán)境進(jìn)程中帶入,,又無(wú)法過(guò)濾,很難*鏟除,,但對(duì)血清質(zhì)量影響不大,。病原性病毒,特別是BVDV,,在國(guó)產(chǎn)血清中簡(jiǎn)直90%以上都存在,,這類(lèi)微生物是影響國(guó)產(chǎn)血清質(zhì)量的重要因素之一,而進(jìn)口胎牛血清中根本都操控的*,。

6,、免疫球蛋白
國(guó)產(chǎn)血清的僅僅定性檢查,,成果也很不,,進(jìn)口胎牛血清大多定量檢查。免疫球蛋白的數(shù)值能*體現(xiàn)出采血的時(shí)的牛齡狀況,,國(guó)產(chǎn)血清,,根本都是重生牛的,血清中簡(jiǎn)單發(fā)生IgM,,IgG的含量也偏高,,進(jìn)口胎牛血清,不含IgM,,IgG的含量也較低,。

7、其它
不管是國(guó)產(chǎn)仍是進(jìn)口血清,,都是意外抗生素的(無(wú)四環(huán)素胎牛血鏟在外),。國(guó)外,抗生素的運(yùn)用很?chē)?yán)厲,,用量也很少,,每頭奶牛的產(chǎn)品包含血清都可以溯源的,,因而可以做到胎牛血清中不含抗生素或含量極低;國(guó)內(nèi),,抗生素的亂用已成了普遍現(xiàn)象,,血清中殘留很高,對(duì)細(xì)胞培育極為晦氣,,這是國(guó)產(chǎn)血清質(zhì)量差的根本緣由,。

三、血源
市場(chǎng)上的血清血源首要分為我國(guó),、北美,、南美和澳洲。

1,、國(guó)產(chǎn)血清質(zhì)量差,,這是*的,首要緣由并不是出產(chǎn)廠家的職責(zé),,而是天然環(huán)境差和抗生素的許多運(yùn)用,。國(guó)內(nèi)環(huán)境污染嚴(yán)峻,一起養(yǎng)殖進(jìn)程中抗生素亂用,,有毒有害物質(zhì)會(huì)許多殘留在血清中,,終究晦氣于細(xì)胞的成長(zhǎng)。

2,、南美血清,,來(lái)歷許多,如Bioind的巴拿馬,、Gibco的烏拉圭,、巴西等,這些血清因?yàn)椴裳牟豢煽匦?,質(zhì)量良莠不齊,,當(dāng)然,相對(duì)于國(guó)內(nèi)血清來(lái)說(shuō)好的多,。別的,,國(guó)內(nèi)出售的南美血清大多色彩鮮紅,如Bioind,、Gibco,、Hylone等品牌,但阿根廷的血清破例,,這也許和各國(guó)的采血,、出產(chǎn)工藝有關(guān)。

3,、北美血清,,首要來(lái)自美國(guó)和加拿大,,如Hclone的SH30396、SH30070,、SH30071,、Gibco的16000-044、26140-079等,。這類(lèi)血清,,等級(jí)越高的色彩越淡,表現(xiàn)為淡黃中帶一點(diǎn)微紅,,SH30070和SH30396比照就很顯著,,特級(jí)胎牛血清根本就能進(jìn)行干細(xì)胞培育。北美血清還有一個(gè)顯著特點(diǎn)即是每瓶血清都能溯源,,這對(duì)一些大型的疫苗廠,、藥廠尤為重要。

4,、澳洲血清,,來(lái)歷首要是新西蘭和澳大利亞,這是在北美血清禁運(yùn)以后進(jìn)入我國(guó)市場(chǎng)的,,通常不具有溯源功用,,因?yàn)槌霎a(chǎn)、運(yùn)送等緣由,,價(jià)格相對(duì)來(lái)說(shuō)對(duì)比貴

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