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哈靈實(shí)驗(yàn)室教大家——ELISA的檢測結(jié)果

 ELISA試劑盒測定的標(biāo)本十分廣泛,，體液（如血清）,、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液、糞便）等均可作標(biāo)本以測定其中某種抗體或抗原成份,。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測定（如血清,、尿液），有些則需經(jīng)預(yù)處理（如糞便和某些分泌物）,。大部分ELISA檢測均以血清為標(biāo)本,。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外，其他成份均同等于血清,。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑,，而血清標(biāo)本只要待血清自然凝固、血塊收縮后即可取得,。除特殊情況外,，在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中均以血清作為檢測標(biāo)本。在ELISA中血漿和血清可同等應(yīng)用,。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集,，應(yīng)注意避免溶血，紅細(xì)胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì),，以HRP為標(biāo)記的ELISA試劑盒測定中,，溶血標(biāo)本可能會增加非特異性顯色。
    血清標(biāo)本宜在新鮮時檢測,。如有細(xì)菌污染,，菌體中可能含有內(nèi)源性HRP，也會產(chǎn)生假陽性反應(yīng)。如在冰箱中保存過久,，其中的可發(fā)生聚合,，在間接法ELISA中可使本底加深。一般說來,，在5天內(nèi)測定的血清標(biāo)本可放置于4℃,，超過一周測定的需低溫冰存。凍結(jié)血清融解后,，蛋白質(zhì)局部濃縮,，分布不均，應(yīng)充分混勻宜輕緩,，避免氣泡,，可上下顛倒混和，不要在混勻器上強(qiáng)烈振蕩,?；鞚峄蛴谐恋淼难鍢?biāo)本應(yīng)先離心或過濾，澄清后再檢測,。反復(fù)凍融會使抗體效價跌落,，所以測抗體的血清標(biāo)本如需保存作多次檢測，宜少量分裝冰存,。ELISA試劑盒保存血清自采集時就應(yīng)注意無菌操作,，也可加入適當(dāng)防腐劑。