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哈靈實(shí)驗(yàn)室教大家透析袋知識(shí)
閱讀：2235 發(fā)布時(shí)間：2015-6-3哈靈實(shí)驗(yàn)室教大家透析袋知識(shí)
1. 透析袋原理
技術(shù)指標(biāo)：MWCO（截留分子量）,，單位：Diatoms ,。
透析時(shí)，小于MWCO的分子在透析膜二邊溶液濃度差產(chǎn)生的擴(kuò)散壓作用下滲過透析膜,，其速度與濃度梯度,、膜面積及溫度成正比。欲快速透析可采用直徑較小的透析袋以增加膜面積,。常用溫度：4℃，升溫,、更換袋外透析液或用磁力攪拌器,，均能提高透析速度。
2. 透析袋用途
透析即用半透膜（透析袋）將大分子蛋白質(zhì)分離出來,。在生物大分子制備過程中除去鹽,、少量有機(jī)溶劑、生物小分子雜質(zhì)和濃縮樣品,，透析法簡便,。
3. 透析袋使用方法:
① 把透析袋剪成適當(dāng)長度（10cm左右）的小段。
② 取適量透析袋處理液（Fast-Tre Solution）稀釋100倍,，將透析袋放于其中煮沸10分鐘,。
③ 取出用蒸餾水*清洗透析袋。
④ 暫不使用的話需要將透析袋*浸泡到稀釋100倍后的透析袋儲(chǔ)存液（Long-Sav Solution）中,，存放于4度,。從此時(shí)起取用透析袋是必須戴手套。
⑤ 浸泡在透析袋儲(chǔ)存液中的透析袋取出使用前,，須將透析袋內(nèi)裝滿水然后排出,，將之清洗干凈，沖洗三次即可,。
實(shí)驗(yàn)要求不高的可以用簡易處理方法：在沸水中煮10min即可使用
⑥使用時(shí),，一端用下沉透析袋夾子夾緊，灌滿水后,，用手指適當(dāng)加壓,，檢查不漏,，方可裝入樣品。通常要留三分之一至一半的空間,，以防透析過程中,，袋外的水和緩沖液過量進(jìn)入袋內(nèi)將袋漲破。裝完樣品后,，用上浮夾子夾緊袋口,，可在袋內(nèi)放一玻璃珠，以使透析袋處于懸浮狀態(tài),，即可進(jìn)行透析,。為了加快透析速度，除多次更換透析液外,，還可使用磁力攪拌器,。透析的容器要大一些，可以使用大燒杯,、大量筒和塑料桶,。
4. 透析袋相關(guān)配件
5.透析袋使用中注意事項(xiàng)及技巧
透析袋用之前一定要處理；
1）除鹽透析時(shí)將高鹽的樣本加入透析袋中,，夾緊,，用你選擇的保存液進(jìn)行透析，一般在2-8度透析，中間要更換一到兩次透析液，另外透析液體積盡量大些,。
先把透析液放進(jìn)容器中（容器的直徑小于透析袋長度），再將夾好的透析袋豎直放進(jìn)去,，這樣透析袋與透析液的接觸面積是大的，幾乎整個(gè)透析袋都與透析液接觸,，溶液的置換面積大,，置換速度快。
如果夾子很穩(wěn),，那就夾好,，先把透析液放進(jìn)容器中（容器的直徑小于透析袋長度），再將夾好的透析袋豎直放進(jìn)去,，這樣透析袋與透析液的接觸面積是大的,，幾乎整個(gè)透析袋都與透析液接觸，溶液的置換面積大,，置換速度快,。
假如夾子夾不穩(wěn)，那就盡量避免有夾子的一端接觸透析液,，以免漏出去,。把透析液放進(jìn)容器中（容器的直徑小于透析袋長度）,，再將夾好的透析袋平放進(jìn)去，這樣透析袋與透析液的接觸面積不大,，大約只有一半的透析袋與透析液接觸,，置換速度慢。
假如夾子不是特別不穩(wěn),，那就將透析袋兩端回折,，夾子夾在回折的中間，這樣可以減小漏液的危險(xiǎn),，再讓透析袋放在容器液面上,，夾子向上（容器的直徑小于透析袋長度）。要注意定時(shí)打濕整個(gè)透析袋,，不然接觸不到透析液的透析袋可能會(huì)干裂漏液,。
透析袋一定不能裝滿，因?yàn)橥肝鲆旱臐B透壓低于透析袋內(nèi)樣品,，樣品中的鹽出去的時(shí)候透析液也會(huì)進(jìn)來,，造成樣品的體積增大，嚴(yán)重的時(shí)候可能會(huì)脹破透析袋,，在夾子不穩(wěn)時(shí)會(huì)很容易漏液,。
除了*次使用，透析袋還是干的,，要預(yù)處理之外，第二次就不用預(yù)處理了,。透析袋用完之后要沖洗干凈,，然后4度保存，要保濕不能干掉,。要是干了或者生長微生物,，就丟棄，免得影響實(shí)驗(yàn)效果,。
透析的時(shí)間不確定,，但是勤攪拌（例如磁力攪拌）和勤換洗脫液會(huì)加快達(dá)到目的的速度。
2）蛋白質(zhì)吸附量,，小于1ug/克,，（以透析袋干重計(jì)）。
正常使用PH值5-9（可重復(fù)使用）,。
極限使用PH值2-12（一次性使用）,。
3）前處理：煮沸5分鐘后用蒸餾水60℃洗沖2分鐘，置4℃蒸餾水中待用,。
長期保存液：0,。05%-0,。1%疊氮鈉，1mMEDTA或50%甘油,，溫度（4℃）,，使用前以蒸餾水洗凈。
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