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哈靈實(shí)驗(yàn)室教大家有關(guān)牛血清的使用問題
閱讀:1222 發(fā)布時(shí)間:2015-5-25哈靈實(shí)驗(yàn)室教大家有關(guān)牛血清的使用問題
1、保存血清的方法?
我們建議血清應(yīng)保存在-5℃~-20℃。若您一次無法用完一瓶,,建議您無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。
2,、如何解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損,?
我們建議您將血清從冷凍箱取出后,先置于2---8℃冰箱使之溶解,然后在室溫下使之全溶,。但須注意的是,,溶解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。
3,、血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),如何處理,?
血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因,但普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后,,也會(huì)存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一,。但這些絮狀沉淀物,,并不影響血清本身的質(zhì)量。欲去除這些絮狀沉淀物,,可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi),,以1000轉(zhuǎn)/分~2000轉(zhuǎn)/分稍微離心,上清液即可直接加入培養(yǎng)基內(nèi)使用,。我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀物,,因?yàn)樗赡軙?huì)阻塞您的過濾膜。
4,、何謂熱滅活,?有無必要?
一般以56℃,、30分鐘來處理已解凍的血清,,因?yàn)榇思訜岵襟E,可以使補(bǔ)體去活化,,而補(bǔ)體所參與的反應(yīng)有:溶細(xì)胞活性,,平滑肌的收縮,肥大細(xì)胞和血小板組胺的釋放,,增強(qiáng)吞噬作用,,淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞的趨化和激活,。
實(shí)驗(yàn)顯示,,即使對(duì)血清進(jìn)行正確的熱滅活處理,對(duì)大多數(shù)的細(xì)胞而言也是不需要的,。經(jīng)此處理過的血清對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)只有微小的促進(jìn),或*沒有任何作用,,甚至通常因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量,,而造成細(xì)胞生長(zhǎng)速率的降低。
而經(jīng)過熱處理的血清,沉淀物的形成會(huì)顯著的增多,,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,,像是"小黑點(diǎn)",常常會(huì)讓研究者誤以為是血清遭受污染,,而把血清放在37℃環(huán)境中,,又會(huì)使此沉淀物更增多,使研究者認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增,。
因此我們建議您,若非必須,,您可以不需要做熱處理這一步。如此一來,,不但節(jié)省您寶貴的時(shí)間,,更確保您的血清的質(zhì)量。
質(zhì)量控制,、容器管道清潔度監(jiān)控,、設(shè)備及工藝衛(wèi)生監(jiān)控、膜可靠性監(jiān)控,、加工過程中間樣品檢測(cè),、加工時(shí)間控制。
5,、如何避免沉淀物的產(chǎn)生,?
我們建議您在使用血清的時(shí)候,注意正確的血清解凍步驟,,并盡量避免滅活血清及長(zhǎng)時(shí)間的將血清置于高溫環(huán)境中,。