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細胞凍存好了，接下來要注意什么問題呢?沒錯，就是記得到時間了,，拿出來復蘇,。那么，細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?今天就為大家一一解答,。

一,、活力檢查：千萬不要使用不健康的細胞，可能有污染(真菌,、支原體等),，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!

二、形態(tài)檢查：檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為,。

三,、凍存細胞：

1. 補充新的培養(yǎng)液：在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,，計數(shù)活細胞數(shù),，用凍存液調整細胞密度 ~5 x106 cells/ml (根據(jù)不同的細胞類型調整)

2. 凍存液：用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞，有不同類型的凍存液,，根據(jù)細胞類型選擇合適的凍存液,。

在凍存管上標記好細胞類型，日期,，凍存人等信息,，并保證每凍存管不超過1.5ml.。程序降溫是保證凍存細胞活性的關鍵,，使用 Mr. Frosty(找生物注一種裝置)保證降溫速度為1°-3°C,，置于-80°C冰箱內*夜，如果沒有Mr. Frosty裝置,，可以使用實驗室常見的泡沫盒,、棉花等。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置,。以快的速度轉移凍存管知液氮罐內,，因此，此步驟使用干冰,，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內,。此外還要注意，在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,，做好記錄是非常非常重要的!

四,、細胞復蘇：正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，當從液氮罐內取出細胞時,，有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,，使用保護面罩和防護服十分必要,。從液氮內轉移凍存管至熱的(溫度高的)容器內，應在液氮內完成,。應該與37℃水浴中快速溶解凍存的細胞,，并保證凍存管蓋子在水面之上以避免污染。當小的冰塊溶解后,，用70%酒精擦拭凍存管,，并迅速轉移至新的已經(jīng)預熱的培養(yǎng)基內。觀察細胞生長形態(tài)和生長比率,。

其實,，細胞復蘇只是一個簡單的實驗，不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),，不然，也不一定會盡如人意,。例如說,，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等,。

如有其他不了解的相關方面,，還可以直接我公司，我們有專業(yè)技術人員為您解答,，期待您的來電,！