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哈靈生物實驗室教大家怎樣避免血清沉淀物的產(chǎn)生

ELISA試劑盒實驗中，對于采集血清經(jīng)常碰到很多問題：

   1、標(biāo)本采集后什么時候開始離心，有說采集半小時后離心的，還有說采集全血后在4℃guoye,，再離 心，如果采集后7-8小時再離心可以嗎,？

   2,、離心時多少轉(zhuǎn),、離心幾分鐘比較合適

   血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集，應(yīng)注意避免溶血,，紅細(xì)胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì),，以HRP 為標(biāo)記的ELISA 測定中，溶血標(biāo)本可能會增加非特異性顯色,。血清標(biāo)本宜在新鮮時檢測,。如有細(xì)菌污染，菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,，也會產(chǎn)生假陽性反應(yīng),。一般說來，在5 天內(nèi)測定的血清標(biāo)本可放置于4℃,，標(biāo)本在冰箱中保存時間過長導(dǎo)致血清IgG 聚合,，使間接法的試劑本底加深。超過一周測定的需-20℃保存,。凍結(jié)血清融解后,，蛋白質(zhì)局部濃縮，分布不均,，應(yīng)充分混勻并避免產(chǎn)生氣泡,。混濁或有沉淀的血清標(biāo)本應(yīng)先離心或過濾,，澄清后再檢測,。反復(fù)凍融會使抗體效價跌落，所以測抗體的血清標(biāo)本如需保存作多次檢測,，宜少量分裝冰存,。保存血清自采集時就應(yīng)注意無菌操作，也可加入適當(dāng)防腐劑,。

   實驗中,，標(biāo)本離心越早越好，但多數(shù)標(biāo)本要30分鐘后才凝集完畢,，離心時間在2小時內(nèi)完成,，（尤其生化）時間太長血液中的細(xì)胞成分會分解血漿中有機成分，離子也會發(fā)生轉(zhuǎn)移造成誤差,；4度冷藏雖能降低紅細(xì)胞活性但細(xì)胞還會進(jìn)行緩慢無氧酵解,，血糖會明顯減低，冷藏時需分離血清儲存,；對于酶免試驗影響較小,，但時間太長也會引起偏差如蛋白質(zhì)變性，水分蒸發(fā)造成誤差離心速度一般要求1500~3000轉(zhuǎn)之間（25000轉(zhuǎn)）,，離心速度低會離心不*,，速度過快容易溶血,，一般離心5~15分鐘即可（約10分鐘）。