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哈靈教你操作培養(yǎng)基實(shí)驗(yàn)的技巧
閱讀：1093 發(fā)布時間：2015-2-12*,、添加劑的添加
1.溫度的掌握：卵黃和抗生素類添加的溫度都不應(yīng)太高,。
2.定量：過多會抑制一些目標(biāo)菌,，太少又導(dǎo)致雜菌的過度生長,。
第二,、培養(yǎng)溫度的掌握：
1.真菌類：25-28℃培養(yǎng)
2.細(xì)菌類：李氏菌在增菌和生化中要求培養(yǎng)溫度在30℃左右,。
3.其他一般在36℃左右
第三、接種方法：常用的方法主要有劃線,、三點(diǎn)接種,、穿刺接種、傾注接種,、涂布接種,、液體接種。
第四,、革蘭氏染色方法：染色時間的掌握,、沖洗的方法。
第五,、劃線獲得單個菌落的方法,。劃不出單個菌落的原因：
1.平板上有過多的水分;
2.劃線時接種環(huán)未經(jīng)反復(fù)灼燒。
3.多區(qū)劃線,，三區(qū)或四區(qū)劃線,。
第六、涂布和傾注的區(qū)別：
1.涂布利于觀察,，但由于涂布棒上會帶有少量的菌液,，影響計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性。
2.涂布更為準(zhǔn)確,，但不利于觀察菌落的狀態(tài),。
第七、培養(yǎng)基配制時應(yīng)注意的問題：
1.滅菌溫度要嚴(yán)格控制,，按照要求滅菌,，尤其含糖量較高的培養(yǎng)基溫度不應(yīng)太高，過高會導(dǎo)致糖分焦化,，影響質(zhì)量,。
2.瓊脂培養(yǎng)基不能反復(fù)溶化。反復(fù)溶化會破壞培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分,。
3.培養(yǎng)基不能反復(fù)滅菌,，反復(fù)滅菌也會導(dǎo)致營養(yǎng)成分的破壞。
4.含瓊脂的培養(yǎng)基滅菌后,，要搖勻,。
第八、板的保存：大多數(shù)平板如VRBA,、DC,、尿素酶生化管、顯色系列等要避光低溫保存,。
第九,、觀察時間的掌握
按SN、GB等標(biāo)準(zhǔn)或培養(yǎng)基的使用說明所述時間進(jìn)行觀察,，時間過短或時間過長,，單菌落的特征都不會很明顯。如單增李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基,，時間短單菌落看不到卵磷脂環(huán),，時間長綿羊李氏菌也會產(chǎn)生沉淀環(huán)。OXA,、PALCAM的觀察也如此,，時間過長，李氏菌使整個平板成黑色,，不利于觀察單個菌落,。
第十、生化實(shí)驗(yàn)
1.接種的方法;
2.氧化型和發(fā)酵型實(shí)驗(yàn)操作;
3.陽性菌種的對照;
4.接種前的純化,。挑取單個菌落進(jìn)行一系列的生化,。
第十一、關(guān)于殺菌的幾個概念
1.抑制：是在亞抑制劑量因子作用下導(dǎo)致微生物生長停止,，但在移去這些因子后生長仍可以恢復(fù)的生物學(xué)現(xiàn)象,。
2.死亡：在致死劑量因子的作用下或在亞致死劑量因子長時間的作用下，導(dǎo)致微生物生長能力不可逆喪失,，即使移去這種因子后生長仍不能恢復(fù)的生物學(xué)現(xiàn)象,。
3.防腐：在某些化學(xué)物質(zhì)或物理因子作用下，能防止或抑制微生物生長的一種措施,，它能防止食物腐敗或防止食物霉變,。
4.消毒：利用某種方法殺死或滅活物質(zhì)或物體中所有病原微生物的一種措施，它可以起到防止感染和傳播的作用,。
5.滅菌：利用某種方法殺死物體中包括芽孢在內(nèi)的所有病原微生物的一種措施,。
6.化療：利用具有選擇毒性的化學(xué)物質(zhì)，例磺胺,、抗生素等對生物體內(nèi)部被微生物感染的組織或病變細(xì)胞進(jìn)行治療,，以殺死組織內(nèi)的病原微生物或病變細(xì)胞，但對有機(jī)體無毒害作用的治療措施,。
第十二,、產(chǎn)品的保存：
1.干粉培養(yǎng)基：避光干燥，結(jié)塊后不能使用,。
2.亞碲酸鉀卵黃增菌液,、50%卵黃乳液等：冷凍保存，使用時,，要常溫解凍,，避免水浴加熱,。
3.抗生素類：冷藏保存，溫度過高會導(dǎo)致靈敏度的下降,。
4.兔血漿：冷藏保存少量的紅色不會影響結(jié)果,。