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　　應(yīng)先應(yīng)用EXCEL繪制ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線及計算樣品濃度,，在ELISA實驗結(jié)束后，我們得到的是經(jīng)酶標(biāo)儀得出的標(biāo)準(zhǔn)品以及樣本的OD值。其中,，標(biāo)準(zhǔn)品的濃度已知，我們可以利用標(biāo)準(zhǔn)品的OD值及其相對應(yīng)的濃度,，以O(shè)D值為橫坐標(biāo),，濃度為縱坐標(biāo)，做一條標(biāo)準(zhǔn)曲線,，并用公式表示出來,。這樣，我們把樣本的OD值以X值代入,，便可求出Y值,，即樣本濃度。 

1,、首先,，將數(shù)據(jù)整理好輸入Excel，分別為經(jīng)酶標(biāo)儀讀出標(biāo)準(zhǔn)品的OD值及其對應(yīng)的濃度值,。      

2,、拖動鼠標(biāo)選取完成的數(shù)據(jù)區(qū)，并點(diǎn)擊圖表向?qū)?，在圖表類型中選“XY散點(diǎn)圖”,，并選擇子圖表類型的“散點(diǎn)圖”（*個沒有連線的）,。

3、點(diǎn)擊“下一步”,。如是輸入是如本例橫向列表的就不用更改,，如果是縱向列表就改選“列”。

　　在做ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線,，并通過此曲線求樣本濃度時,，因樣本OD值是已知的，因此我們需要將OD值設(shè)為X,。根據(jù)上圖我們可以看到,，橫坐標(biāo)X值為OD值，縱坐標(biāo)Y為標(biāo)準(zhǔn)品濃度,，這正是我們想要的,。

4、有時需要我們手動選擇X值,，這時可以點(diǎn)擊“系列”來更改,。

注：如果要對橫坐標(biāo)和縱坐標(biāo)進(jìn)行調(diào)換，我們可以就點(diǎn)擊X值和Y值文本框右邊的小圖標(biāo),，

5,、調(diào)好之后，然后點(diǎn)擊“下一步”出現(xiàn)圖標(biāo)選項界面,。

6,、點(diǎn)擊“下一步”，在彈出的窗口再點(diǎn)擊“完成”,，現(xiàn)在一張帶標(biāo)準(zhǔn)值的完整散點(diǎn)圖就已經(jīng)完成,。

7、到了這一步,，散點(diǎn)圖便完成了,。我們可能會問，曲線在哪里??？

　　其實很簡單，先點(diǎn)擊圖上的標(biāo)準(zhǔn)值點(diǎn)（記住一定要點(diǎn)選上）,，然后單擊右鍵,，點(diǎn)擊“添加趨勢線”。彈出趨勢線類型選擇對話框,，有線性,，對數(shù)，多項等選項，如下圖：

8,、在選擇之前,，我們先對上圖做一下肉眼觀察，如果那些點(diǎn)能連成一條直線,，或接近直線，我們就選擇“線性”,，意思就是出來的趨勢線是一條直線,，相應(yīng)的該直線的方程就是y=ax+b的形式。不過一般的ELISA都不會是所有的標(biāo)準(zhǔn)點(diǎn)呈*的線性關(guān)系的,，也就是說不是一條*的直線,，這時我們可以選擇“多項式”，多項式后面還有“階數(shù)”的選擇,，也就是說求出來的方程是幾次方,，我們一般選“2階”，即出來的方程為y=ax2+bx+c. 選擇完畢后,，彈出以下窗口,。

9、趨勢線也就是標(biāo)準(zhǔn)曲線在此便顯示出來了,。接下來我們需要將公式顯示出來,，以根據(jù)樣本的OD值計算其濃度值。在鼠標(biāo)點(diǎn)選該線（一定要選中,，選中后出現(xiàn)下圖的樣子即線由很多店標(biāo)識出來）,，單擊鼠標(biāo)右鍵，選擇趨勢線格式,。我們在彈出的窗口中選擇“選項”選項卡,，出現(xiàn)下圖，我們選擇顯示公式,，顯示R方,，即相關(guān)系數(shù)，這時公式與R方值便都顯示出來了,。我們將樣本的OD值作為X代入上述方程,，求出來的便為濃度值了。

一般ELISA的標(biāo)準(zhǔn)曲線的相關(guān)系數(shù)要達(dá)到0.95以上,，本例中為0.9999,，非常不錯的曲線，這樣就保證了由該曲線及其方程求出的樣本濃度具有很強(qiáng)的可信性,。