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細胞分離試劑盒的挑選
閱讀：1409 發(fā)布時間：2013-7-23怎么挑選適宜的細胞分離試劑盒
細胞分離試劑盒的作業(yè)原理主要有兩種——正向挑選和負向挑選,。正向挑選的試劑盒，運用與目標細胞直接的抗體這種方法來進行捕獲,。通常情況下,，這種抗體與磁珠相連，就可以使用磁鐵將懸液中的抗體-磁珠-細胞復合物提取出來,，再經(jīng)過二抗將磁珠與目標細胞分隔,。這種方法就是正向挑選,。負向挑選的試劑盒也選用相似的抗體包被磁珠，不過這種試劑盒是通過去掉樣品中的非目的細胞來直接捕獲目的細胞,。
從樣品中分離提純同種細胞,，是許多低端運用的重要一步，分離得到的細胞能夠用于蛋白分離,、生化剖析,、?細胞計數(shù)、?基因判定,、細胞計數(shù),、生化剖析、等研討,。一款適宜的細胞分離試劑盒能夠說是試驗成功的保證,，由于只要取得正確的細胞，作用于結果的的剖析成果才能夠,。當前,，市場上有多種多樣的分離試劑盒可供挑選,，它們的首要差異在于分離辦法和挑選象征,。
這兩種細胞分離試劑盒怎么取舍，首要取決于目標細胞的外表是不是具有特異性強的挑選象征,。這樣的挑選象征能夠完成特異性的捕獲,，防止所取得的細胞被非目標細胞污染。若是你的目標細胞剛好具有這樣的挑選象征,，那么正向挑選的細胞分離試劑盒即是佳挑選,。但若是目標細胞并不具有特異性強的挑選象征，那咱們佳仍是選用負向挑選的細胞分離試劑盒,。
挑選象征的斷定
PubMed and other databases through literature, we are usually able to determine the expression of the target cells selected symbol. If no suitable literature since the appearance of a symbol, we can also use the target cell's DNA sequence BLAST search.BLAST查找成果會顯現(xiàn),，目標細胞上能夠表達的外表象征，在此基礎上能夠選擇用于捕獲的細胞外表蛋白,。舉例來說,，對一個T細胞進行BLAST查找，成果會顯現(xiàn)該細胞是不是表達CD4或CD8,。在得知目標細胞表達CD4之后,，咱們能夠先對樣品進行一個免疫試驗（如ELISA），以查驗BLAST查找的成果,。一旦證明目標細胞確實表達CD4,，咱們就能夠用相應試劑盒來挑選CD4陽性的T細胞。
通常流程
一個用于分離CD4陽性T細胞的試劑盒,，它的操作流程有以下幾步,。首先,，將樣品與anti-CD4抗體包被的磁珠一同孵育，使抗體與CD4+ T細胞,。然后洗去不需要的非目標細胞（即不表達CD4的細胞）,，留下磁珠-抗體-細胞復合物。將以上復合物與能anti-CD4抗體的二抗一同孵育,，二抗就會代替CD4+T細胞,，構成磁珠-抗體-二抗復合物。咱們能夠用磁鐵去掉這種磁珠-抗體-二抗復合物,，而一切的CD4+細胞留在上清中,。終，就能完成實驗了,。