技術(shù)文章
大鼠浦肯野細(xì)胞說明書
閱讀:1404 發(fā)布時間:2022-12-8大鼠浦肯野細(xì)胞分離自小腦皮質(zhì)組織;小腦的表面被覆著一層灰質(zhì),叫小腦皮質(zhì),,小腦皮質(zhì)分為3層,,從表及里分別為分子層、浦肯野細(xì)胞層和顆粒細(xì)胞層,。皮質(zhì)里含有星狀細(xì)胞,、籃狀細(xì)胞、浦肯野細(xì)胞,、高爾基細(xì)胞和顆粒細(xì)胞等5種神經(jīng)元,。浦肯野細(xì)胞發(fā)出的軸突組成小腦皮質(zhì)的傳出纖維,終止于小腦白質(zhì)內(nèi)的神經(jīng)核,。浦肯野細(xì)胞(Purkinje cell)是從小腦皮質(zhì)發(fā)出的能夠傳出沖動的神經(jīng)元,。人的小腦皮質(zhì)約有1500萬個浦肯野細(xì)胞。浦肯野細(xì)胞還廣泛分布于心室,。顯著的電生理特點是傳導(dǎo)性強,,傳導(dǎo)速度快,可達(dá)4000mm/s,。屬快反應(yīng)自律型細(xì)胞,,具有舒張期自動除極化的性能,因而有自律性,,但自律性強度明顯低于竇房結(jié)P細(xì)胞,。這類細(xì)胞常常平行排列,細(xì)胞內(nèi)電阻低,,只有心室細(xì)胞的1/3,。小腦:浦肯野細(xì)胞是小腦皮質(zhì)中最大的神經(jīng)元,細(xì)胞體呈梨形,,頂端發(fā)出2~3條粗大的主樹突,,向外伸入分子層。主樹突沿途分支繁茂,,形如展開的,、扁薄的扇形,鋪展在與小腦葉片長軸垂直的平面上,。樹突分支上有大量的樹突棘,,與傳入纖維構(gòu)成廣泛的突觸聯(lián)系,接受傳入小腦的全部信息,。軸突由細(xì)胞底部(與主樹突相對方向)發(fā)出,,細(xì)長,離開胞體不遠(yuǎn)便形成有髓神經(jīng)纖維,,向內(nèi)經(jīng)顆粒層離開皮質(zhì)進(jìn)入白質(zhì),,組成小腦皮質(zhì)的傳出纖維,終止于小腦內(nèi)部的神經(jīng)核團(tuán)。一個浦肯野細(xì)胞的軸突約形成500個終末膨大,,約與小腦深部核團(tuán)的35個神經(jīng)元形成突觸,。心臟浦肯野細(xì)胞常常平行排列,幾個細(xì)胞互相以漿膜連接排成一個小束,,小束外包繞著基底膜,。細(xì)胞內(nèi)含肌原纖維很少,胞漿區(qū)內(nèi)充滿糖原顆粒,、線粒體和肌漿網(wǎng),細(xì)胞內(nèi)電阻低,,只有心室細(xì)胞的1/3,。浦肯野細(xì)胞內(nèi)無橫管系統(tǒng),但膜電容比收縮細(xì)胞大,,可能是由于其閏盤結(jié)構(gòu)廣泛而復(fù)雜,,提供了較大的表面積的緣故。浦肯野細(xì)胞閏盤的主要成分是縫隙連接,,粒著膜占的比例很少,,這些可能是構(gòu)成浦肯野細(xì)胞傳導(dǎo)快的形態(tài)學(xué)基礎(chǔ)。
5.方法簡介:
實驗室分離的大鼠浦肯野細(xì)胞采用胰蛋白酶消化法結(jié)合神經(jīng)元專用培養(yǎng)基,、化學(xué)試劑抑制法篩選制備而來,,細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶
6.質(zhì)量檢測:
實驗室分離的大鼠浦肯野細(xì)胞經(jīng)Neph3免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
7.培養(yǎng)信息:
包被條件 | PLL(0.1mg/ml) |
培養(yǎng)基 | 含脂質(zhì)濃縮液,、BSA、Monothioglycerol,、Transferrin,、Penicillin、Streptomycin等 |
換液頻率 | 每2-3天換液一次 |
生長特性 | 貼壁 |
細(xì)胞形態(tài) | 神經(jīng)元細(xì)胞樣 |