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1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘,，恢復至室溫。

2.取所需用量酶標板條,，設空白對照1孔,、陰性/陽性對照各2孔，未用的板條盡快密封,，2～8℃保存,。

3.空白對照孔加樣品稀釋液100μl；陰,、陽性對照孔分別加入陰、陽性對照100μl,；樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl,。

4.混勻，置37℃反應30分鐘,。

5.扣去孔內(nèi)液體,，每孔加滿洗滌液,，靜置30秒后棄去，重復洗滌5次,，拍干,。

6.每孔加酶標記物100μl（空白孔除外）。置37℃反應30分鐘,。

7.洗滌,，同步驟5。

8.每孔依次加底物液A,、底物液B各50μl,，混勻，37℃避光反應10分鐘,。

9.每孔加終止液50μl,，混勻，用空白孔調(diào)零,，于450nm(可用630nm作參比波長）測定各孔吸光值（A值）,。