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ELISA檢測試劑盒常見問題解決方法
閱讀：2926 發(fā)布時間：2018-1-16以下是ELISA檢測試劑盒常見問題問答整理分析出來以方便各位了解：
（1）問：小鼠乙酰膽堿Elisa檢測試劑盒后期數(shù)據(jù)處理中空白的OD值有什么作用,？
答：可以將標(biāo)準(zhǔn)品和樣本的OD值同時減去空白的值進行計算,，或者都不減，保持同一水平就行,。
（2）問：那我們算出來的ACH含量為什么出現(xiàn)負值,？
答：說明個別樣本的濃度很低,當(dāng)濃度接近第6個點的時候,直線方程就有可能計算出負值。
（3）問：我兩個空白孔一個啥都不加,，一個加了后面的A液,，B液還有終止液, 請問用哪一個？
答:用加了A液,，B液還有終止液的那個更加準(zhǔn)確,因為樣本都加過這些,，可以排除相應(yīng)的干擾。
（4）問：我想問一下,，標(biāo)準(zhǔn)品濃度與標(biāo)準(zhǔn)品吸光度值之間是不是線性回歸,？檢測出來的吸光度值很低一般都存在哪些原因,？大部分在0.08左右 ？（大鼠5羥色胺（5-HT）Elisa檢測試劑盒）
答：是線性回歸,。檢測出來的值比較低 ,，樣本、稀釋,、操作等,，原因很多，但只要在可操作范圍就行 ,。
（5）問：做出來的結(jié)果：標(biāo)準(zhǔn)品的吸光度呈線性回歸,，但是樣品的吸光度都和本體吸光度值接近，正常未予干預(yù)的大鼠血漿都基本沒有5-HT 表達,，這是什么原因,？（大鼠5羥色胺（5-HT）Elisa檢測試劑盒）
答：樣本、稀釋,、室控和機器操作等,，原因都可能造成吸光度都和本體吸光度值接近，好像熒光法里面有種試劑盒可以檢測滴度,。
（6）問：Elisa檢測試劑盒的使用的方法是什么?。?/p>
答：采用雙抗夾心法 （目前暫行）
（7）問：一個孔需要多少量的血清,？
答：一個孔上樣量10-50微升,。
（8）問:未處理的樣本我需要郵寄多少的量？
答：每個孔需要100ul
（9）問：樣本怎么保存,？
答：當(dāng)天要用的樣本保存4℃,，隔天樣本-20℃（近期一個月左右要用的樣本），長期保存樣本-70℃（一年或者更長時間多久都可以用）,，避免反復(fù)凍融,。
（10）問：EP管是什么管？
答：離心管,。
（11）問：收集血清的時候用什么管,？
答：普通離心管即可。
（12）問：96t可以檢測多少個樣本,？48t可以檢測多少個樣本,？
答：96t標(biāo)準(zhǔn)的可以檢測85個樣本，其他有10個標(biāo)準(zhǔn)品孔,，1個空白對照,。96t單孔可以檢測90個樣，7個標(biāo)準(zhǔn)品控 1個空白對照,。48t標(biāo)準(zhǔn)的可以檢測37個樣本,，其他有10個標(biāo)準(zhǔn)品孔,，1個空白對照。48t單孔可以檢測40個樣本,，其他有7個標(biāo)準(zhǔn)品孔,，1個空白對照。
（13）問：標(biāo)準(zhǔn)的檢測85個樣本的和單孔相比,， 有什么好的地方嗎？
答：標(biāo)準(zhǔn)的檢測又叫復(fù)孔檢測,，標(biāo)準(zhǔn)的檢驗重復(fù)性測的結(jié)果好,，所以大家都叫復(fù)孔是標(biāo)準(zhǔn)的檢測,。
（14）問： 酶標(biāo)板分次使用 剩下的建議怎么保持 ,？
答：要是真的用不完或標(biāo)本不多的情況下。做點處理后：板條和板架都是可拆卸的,，可以再用之,，前拆下4條放置錫箔袋或其他無污染的袋子，放到冰箱 2-8度保存,。
（15）問：酶標(biāo)包被版是酶標(biāo)板嗎,？
答：是的。
（16）問：請問植物茉莉酸和水楊酸檢測的試劑盒,，我們提取擬南芥的,，一般取樣量是多少？
答：1-3g,。
（17）問：大鼠骨特異性堿性磷酸酶B（ALP-B）ELISA,，大鼠血清抗酒石酸酸性磷酸酶5b（TRACP-5B），我發(fā)現(xiàn)試劑盒里缺少標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液,，沒有它我的實驗無法進行,，盒子里面有特殊稀釋液是用來稀釋樣品的，但都沒有標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液,，我的樣品已超出低檢測限,，所以需要稀釋標(biāo)準(zhǔn)品才行嗎？
答：特殊稀釋液是用來稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的,，特殊稀釋液一般情況不用當(dāng)樣本濃度特別高是先用特殊稀釋液稀釋,，標(biāo)準(zhǔn)品需要再稀釋就也要用特殊稀釋液。
（18）問：測出來的標(biāo)準(zhǔn)曲線值前面幾盒都是0.98 才正常,，后面怎么變成0.93了？
答：某個點偏離大可以去掉,，保留5個點
（19）問：是不是空白對照就是什么都不加,？
答：不加樣本,，不加樣本稀釋液，不加酶標(biāo)試劑 其他都可以加,。
（20）問：樣本稀釋液是配好的嗎？
答：樣本稀釋液是配好的
（21）問：樣本稀釋液可以用來直接稀釋血清嗎,？
答：可以,，直接加40ul就可以,。
（22）問：檢測的時候需要在操凈臺中操作嗎,，還是在外面操作就可以了,？
答：要求不是很嚴格,，根據(jù)自己實驗室的設(shè)備而定，都可以,。
（23）問：人和肽素（copeptin）Elisa，洗滌液是濃縮的,，是一次配好,，還是現(xiàn)配現(xiàn)用？
答：濃縮的,，現(xiàn)配現(xiàn)用,。
（24）問：Elisa方法的不測人血小板第四因子里IgG抗體的滴度嗎？
答：Elisa不測滴度的,，熒光法可以測,。
（25）問：酶標(biāo)板不平，影響結(jié)果嗎,？
答：不影響結(jié)果的,。
（26）問：小鼠TNF-α ELISA 我的標(biāo)本是細胞,，我想要測的結(jié)果：抑制TNF的產(chǎn)生 空白組,、模型組、藥物組,，藥物組要成梯度抑制TNF的產(chǎn)生,、請問Elisa方法的可以測嗎？
答：細胞可以測 但要分組,，得到相應(yīng)的梯度值,，計算結(jié)果。自己需要多查閱文獻 ,。
（27）問：人睪酮（T）Elisa,人雌三醇（E3）Elisa,，是用什么酶標(biāo)記的,？
答：辣根酶標(biāo)記的 標(biāo)本里不能加*
（28）問：我測植物水楊酸，標(biāo)本是煙草葉片怎么處理的,？那上清液檢測SA時,，還需要用甲醇抽提嗎？
答：稱取煙葉500mg,，研磨成粉末狀,，加入5ml濃度為0.01mol，PH值為7.4的PBS溶液,，充分勻漿,，離心取上清液（3000-4000轉(zhuǎn)，15分鐘左右）,，分裝保存，一般需要長期保存需放在-80度,，或者液氮中,，備用，不用加甲醇,。
（29）問：沒有做出標(biāo)準(zhǔn)曲線來,，你知道什么原因嗎？
答：操作肯定有問題,，做之前把標(biāo)準(zhǔn)品搖勻下,。
（30）問：買同一個指標(biāo)的幾個盒子，用不用都做標(biāo)準(zhǔn)曲線,？
答：如果同一個指標(biāo)買了3盒,，建議每盒都做個標(biāo)曲。同一個盒子 ,，即使分幾次用,，做一個標(biāo)曲也行了，因為數(shù)值不會偏差太大,，差不多,。