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500毫摩爾超氧陰離子清除劑TEMPOL溶液
閱讀:2785 發(fā)布時間:2017-1-18500毫摩爾超氧陰離子清除劑TEMPOL溶液產(chǎn)品說明書(中文版)
主要用途
500毫摩爾超氧陰離子清除劑TEMPOL溶液是一種旨在模擬超氧化物歧化酶的功能,,清除超氧自由基陰離子的輔助試劑。其適用于氧化應(yīng)急活性氧等研究,。其適用于各種細(xì)胞培養(yǎng),、動物實驗中超氧自由基陰離子的清除。產(chǎn)品即到即用,,嚴(yán)格無菌,,性能穩(wěn)定,高純活性,。
技術(shù)背景
4-羥基-2,2,6,6,-四甲基哌啶氧(4-hydroxy-2,2,6,6-tetramethylpiperidinyloxy,;TEMPO)是一種自旋標(biāo)記(spin label)的水溶性穩(wěn)定哌啶氮氧化合物(piperidine nitroxide),分子式是C9H18NO2,,分子量為172.24,。其主要作用在于自由通過質(zhì)膜,具有超氧化物歧化酶的功能,,清除超氧自由基陰離子,,起到活性氧的解毒作用,同時具有神經(jīng)保護,、抗炎和鎮(zhèn)痛作用,。
產(chǎn)品內(nèi)容
清除劑(Reagent A) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
保存方式
保存在-20℃冰箱里,避免光照,;有效保證6月
用戶自備
*細(xì)胞培養(yǎng)液:用于支持細(xì)胞生長的營養(yǎng)液
細(xì)胞培養(yǎng)板(瓶):用于細(xì)胞培養(yǎng)的容器
蓋玻片:用于細(xì)胞生長的載體
臺式離心機:用于懸浮細(xì)胞的收集
細(xì)胞培養(yǎng)箱:用于細(xì)胞孵育
15毫升錐形離心管:用于樣品操作的容器
實驗提示
實驗開始前,,將-20℃冰箱里的清除劑(Reagent A)置于冰槽里融化,。然后進行下列操作:
方法一:貼壁細(xì)胞處理
- 在6孔細(xì)胞培養(yǎng)板里的1孔放置蓋玻片
- 加入2毫升用戶自備的*細(xì)胞培養(yǎng)液
- 加入1毫升待測細(xì)胞(1至5 X 105細(xì)胞)
- 輕輕搖動,使細(xì)胞均勻分布
- 放進37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱孵育,,直至細(xì)胞生長到50%鋪滿率
- 小心抽掉細(xì)胞培養(yǎng)液
- 加入3毫升新鮮的用戶自備的*細(xì)胞培養(yǎng)液
- 加入xx微升清除劑(Reagent A)
- 輕輕搖動培養(yǎng)板,,混勻
- 放進37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱孵育24小時
- 小心抽掉含有清除劑(Reagent A)的細(xì)胞培養(yǎng)液
- 繼續(xù)后續(xù)操作
方法二:懸浮細(xì)胞處理
- 準(zhǔn)備1個25cm2細(xì)胞培養(yǎng)瓶
- 加入2毫升用戶自備的*細(xì)胞培養(yǎng)液
- 加入1毫升待測細(xì)胞(5 X 105細(xì)胞)
- 輕輕搖動,使細(xì)胞均勻分布
- 放進37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱孵育24小時
- 小心移出細(xì)胞培養(yǎng)液到15毫升錐形離心管
- 放進臺式離心機離心10分鐘,,速度為300g
- 小心抽掉上清液
- 加入3毫升新鮮的*細(xì)胞培養(yǎng)液,,混勻細(xì)胞顆粒群
- 加入xx微升清除劑(Reagent A)
- 輕輕搖動離心管,混勻
- 放進37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱孵育24小時
- 放進臺式離心機離心10分鐘,,速度為300g
- 小心抽掉含有清除劑(Reagent A)的細(xì)胞培養(yǎng)液
- 繼續(xù)后續(xù)操作
方法三:動物實驗
- 準(zhǔn)備1個待測的實驗動物
- 靜脈注射xx微升清除劑(Reagent A)/100克動物體重
- 或腹腔注射xx微升清除劑(Reagent A)/100克動物體重
- 或輸液/灌注xx至xx微升清除劑(Reagent A)/100克動物體重
- 注射后30分鐘至4小時繼續(xù)后續(xù)麻醉,、斷頸椎、解剖,、組織制片等操作
注意事項
- 本產(chǎn)品為1毫升規(guī)格(100倍濃度)
- 本產(chǎn)品即到即用,,無需進行任何處理
- 使用時,戴好手套
- 避免反復(fù)凍融
- 使用時,,避免污染母液
- 細(xì)胞孵育時間可以根據(jù)用戶的具體情況調(diào)整,,通常為6小時至24小時
- 動物實驗可以每天注射,持續(xù)1周,,然后觀察分析