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祝賀使用本公司產(chǎn)品雙抗體酶聯(lián)免疫試劑盒實驗成功發(fā)布文獻
閱讀：1280 發(fā)布時間：2016-11-15
名稱：雙抗體酶免免疫試劑盒
規(guī)格：96T/48T
介紹：
酶聯(lián)免疫試劑盒ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗，酶聯(lián)免疫試劑盒） (以下簡稱ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗,，酶聯(lián)免疫試劑盒）) ：是酶免疫測定技術(shù)中應(yīng)用廣的技術(shù),。其基本方法是將已知的抗原或抗體吸附在固相載體 ( 聚苯乙烯微量反應(yīng)板 ) 表面，使酶標記的抗原抗體反應(yīng)在固相表面進行,，用洗滌法將液相中的游離成分洗除,。常用的 ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗）法有雙抗體夾心法和間接法，前者用于檢測大分子抗原,，后者用于測定特異抗體,。酶聯(lián)免疫試劑盒工作原理促卵泡素（FSH）是動物腦垂體分泌作用于卵巢卵泡生長、發(fā)育,、分化,、成熟和排卵的重要繁殖激素.由于是生物大分子,不能透過細胞膜,FSH必須與靶細胞膜上的促卵泡素受體（FSHR）結(jié)合,經(jīng)過受體介導(dǎo)將信息傳遞到靶細胞內(nèi),才能發(fā)揮其生物學(xué)功能.所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒（ELISA）。預(yù)先包被的抗體為多克隆抗體,。檢測相抗體也為多克隆抗體,，經(jīng)生物素（biotin）標記,。樣品和生物素標記抗體先后加入酶標板孔反應(yīng)后，PBS或TBS洗滌,。隨后加入過氧化物酶標記的親和素反應(yīng),；經(jīng)過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關(guān)。酶聯(lián)免疫試劑盒工作環(huán)境1． 37℃恒溫箱,。2． 標準規(guī)格酶標儀,。3． 自動洗板機。4． 單通道或多通道可調(diào)節(jié)移液器以及其吸頭,。5． 蒸餾水,，容量瓶等6． 干凈的試管和Eppendof管酶聯(lián)免疫試劑盒操作步驟1． 確定本次檢測所需的已包被抗體的酶標板孔數(shù)目。2． 將倍比稀釋的標準品各0.1ml依次加入一排7孔中,，1孔只加樣品稀釋液的作為對照,。處理后的標本按100ul每孔加入。3． 酶標板加上蓋,，37℃反應(yīng)90分鐘,。4． 反應(yīng)后用自動洗板機吸去酶標板內(nèi)的液體；或甩去酶標板內(nèi)液體,，再對著吸水紙拍幾下,。洗滌2次。5． 將準備好的生物素抗體工作液按每孔0.1ml依次加入,。37℃反應(yīng)60分鐘,。6． 0.01M TBS或0.01M PBS洗滌3次，每次浸泡1分鐘左右,。7． 將準備好的ABC工作液按每孔0.1ml依次加入,。37℃反應(yīng)30分鐘。8． 0.01M TBS或0.01M PBS洗滌5次,，每次浸泡1-2分鐘左右,。9． 按每孔0.1ml依次加入TMB顯色工作液，37℃避光反應(yīng),，反應(yīng)過程中,，要經(jīng)常的觀察，當肉眼可見標準品的前3-4孔有 明顯的梯度藍色,，后3-4孔差別不明顯時,，即可加入TMB終止液0.1ml/孔。（顯色反應(yīng)長不要超過30分鐘）。10． 用酶標儀在450nm測定O.D.值,。11． 根據(jù)樣品的吸光值在坐標上找出對應(yīng)的濃度,。用戶也可以使用各種應(yīng)用軟件來計算。應(yīng)記住由于樣品稀釋了N倍,，其實際濃度應(yīng)該×N,。