小鼠elisa試劑盒注意事項

1.嚴格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以保證準確結果,。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑,。

2.洗板不正確可以導致不準確的結果,。在加入底物前確保盡量吸干孔內液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉,。

3.消除板底殘留的液體和手指印,，否則影響OD值。

4.底物顯色液應呈無色或很淺的顏色,，已經變藍的底物液不能使用,。

5.避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結果。

6.在儲存和溫育時避免強光直接照射,。

7.平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上,。

8.任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物活性,。

9.不能使用過期產品,。

10.如果可能傳播疾病，所有的樣品都應管理好,，按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置,。

試劑準備

試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡后方可使用。

20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋,，即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水,。

小鼠elisa試劑盒操作步驟

1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.  設置標準品孔和樣本孔,，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；

3.  樣本孔中加入待測樣本50μL,；空白孔不加,。

4.  除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL,，用封板膜封住反應孔,，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.  棄去液體,，吸水紙上拍干,，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min,，甩去洗滌液,，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）,。

6.  每孔加入底物A,、B各50μL，37℃避光孵育15min,。

7.  每孔加入終止液50μL,，15min內，在450nm波長處測定各孔的OD值,。

實驗結果計算

以所測標準品的OD值為橫坐標,，標準品的濃度值為縱坐標，在坐標紙上或用相關軟件繪制標準曲線,，并得到直線回歸方程,，將樣品的OD值代入方程，計算出樣品的濃度,。