【產(chǎn)品文獻支持】
 影響因子(IF)=7.0：Alogliptin, a Dipeptidyl Peptidase-4 Inhibitor, Alleviates Atrial Remodeling and Improves Mitochondrial Function and Biogenesis in Diabetic Rabbits；天津醫(yī)科大學(xué)《American Heart Association》

兔胰高血糖素樣肽1(GLP-1)ELISA試劑盒標本處理

1.  本公司只對試劑盒本身負責(zé),，不對因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負責(zé),，請使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量，預(yù)留充足的樣本,。

2.  實驗前應(yīng)預(yù)測標本含量,，如果標本濃度過高，應(yīng)對標本進行稀釋,，使稀釋后的標本符合試劑盒的檢測范圍,，計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。標本使用0.01mol/L的PBS稀釋(PH=7.0-7.2),。

3.  若所檢樣本不包含在說明書所列樣本之中,，建議進行預(yù)實驗驗證其有效性，并注意留存樣本,。

4.  使用化學(xué)裂解液制備的組織勻漿或細胞提取液可能會由于某些化學(xué)物質(zhì)的引入導(dǎo)致ELISA實驗結(jié)果偏差,。

5.  若樣本為細胞培養(yǎng)上清，因該類樣本干擾因素較多,，如：細胞狀態(tài),、細胞數(shù)量、采樣時間等,，所以可能存在檢測不出的情況,。

6.  某些天然蛋白或重組蛋白，包括原核及真核重組蛋白,，可能因為與本產(chǎn)品所使用的檢測抗體及捕獲抗體不匹配,，而不被檢測出。

7.  建議使用新鮮樣本,，保存時間過長可能會存在蛋白降解或變性導(dǎo)致實驗結(jié)果偏差,。

需要而未提供的試劑和器材

酶標儀（450nm）
高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL,、20-200uL,、200-1000uL
37℃恒溫箱
蒸餾水或去離子水

兔胰高血糖素樣肽1(GLP-1)ELISA試劑盒備注：

1.  標準品濃度依次為：320,、160、80,、40,、20、0 pg/mL

2.  經(jīng)過大量正常標本檢驗,，標本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測范圍內(nèi)，實驗過程中直接取50μL樣本上樣即可,。當(dāng)有部分樣本值超過大標準品濃度時,，可用樣本稀釋液將標本進行適當(dāng)稀釋后再進行實驗。

注意事項

嚴格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以保證準確結(jié)果,。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃,。使用后立即冷藏保存試劑。
洗板不正確可以導(dǎo)致不準確的結(jié)果,。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體,。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。
消除板底殘留的液體和手指印,，否則影響OD值,。
底物顯色液應(yīng)呈無色或很淺的顏色，已經(jīng)變藍的底物液不能使用,。
避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結(jié)果,。
在儲存和溫育時避免強光直接照射。
平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上,。
任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體,。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。
不能使用過期產(chǎn)品,。
如果可能傳播疾病,，所有的樣品都應(yīng)管理好，按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置,。

試劑準備

試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用,。

20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水,。

操作步驟

1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.  設(shè)置標準品孔和樣本孔,，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL,；

3.  樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加,。

4.  除空白孔外,，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL,，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。

5.  棄去液體,，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL）,，靜置1min,，甩去洗滌液，吸水紙上拍干,，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機洗板）,。

6.  每孔加入底物A、B各50μL,，37℃避光孵育15min,。

7.  每孔加入終止液50μL，15min內(nèi),，在450nm波長處測定各孔的OD值,。

實驗結(jié)果計算

以所測標準品的OD值為橫坐標，標準品的濃度值為縱坐標,，在坐標紙上或用相關(guān)軟件繪制標準曲線,，并得到直線回歸方程,，將樣品的OD值代入方程,，計算出樣品的濃度,。

試劑盒性能

1.  檢測范圍：10 pg/mL – 320 pg/mL。

2.  靈敏度：低檢測濃度小于1.0 pg/mL,。

3.  特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng),。

4.  重復(fù)性：板內(nèi)變異系數(shù)小于10% ，板間變異系數(shù)小于15% ,。