牛魏氏梭菌抗體(Cl.welchii Ab)elisa試劑盒

試劑盒使用說明書

本試劑盒僅供研究使用,。

規(guī)格：96T

使用目的：

本試劑盒用于測定牛血清,、血漿及相關液體樣本中牛魏氏梭菌抗體(Cl.welchii Ab)表達。

試劑盒組成

標本要求 

1．標本采集后盡早進行提取,，提取按相關文獻進行,，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,，可將標本放于-20℃保存,，但應避免反復凍融

2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

操作步驟

• 編號：將樣品對應微孔按序編號,，每板應設陰性對照2孔,、陽性對照2孔、空白對照1孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑,，其余各步操作相同）

• 加樣：分別在陰,、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照50μl,。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液40μl,，然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動混勻，
• 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。   
• 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
• 洗滌：小心揭掉封板膜,，棄去液體，甩干,，每孔加滿洗滌液,，靜置30秒后棄去，如此重復5次,，拍干,。
• 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外,。
• 溫育：操作同3,。
• 洗滌：操作同5。
• 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl,，再加入顯色劑B50μl,，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
• 終止：每孔加終止液50μl,，終止反應（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）,。
• 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）,。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行,。

計算和結果判定：

  試驗有效性：陽性對照孔平均值≥1.00; 陰性對照平均值≤0.10

  臨界值（CUT OFF）計算：臨界值=陰性對照孔平均值+0.15

  陰性判定：樣品OD值< 臨界值（CUT OFF）者為牛病毒性腹瀉抗體（BVDV Ab）陰性

  陽性判定：樣品OD值≥ 臨界值（CUT OFF）者為牛病毒性腹瀉抗體（BVDV Ab）陽性

牛魏氏梭菌抗體(Cl.welchii Ab)elisa試劑盒程序總結：

注意事項

1．操作嚴格按照說明書進行，本試劑不同批號組分不得混用,。

2．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存,。

3．濃洗滌液可能會有結晶析出,，稀釋時可在水浴中加溫助溶,，洗滌時不影響結果。

• 封板膜只限一次性使用,，以避免交叉污染,。

5．底物請避光保存。

6．試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準,，使用雙波長檢測時,，參考波長為630nm

7．所有樣品,，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理,。終止液為2M的硫酸，使用時必須注意安全,。

保存條件及有效期

1．試劑盒保存：,；2-8℃。

2．有效期：6個月