詳細(xì)介紹
牛孕酮(PROG)elisa試劑盒免費(fèi)代測(cè)
l 本試劑盒用于體外定量檢測(cè)血清,、血漿、組織,、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中牛孕酮(PROG)的含量,。
l 有效期:6個(gè)月
l 保存條件:2-8℃
l 本試劑盒僅供體外研究使用,不用于臨床診斷
實(shí)驗(yàn)原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA),。往預(yù)先包被牛孕酮(PROG)捕獲抗體的包被微孔中,,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品,、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,,經(jīng)過(guò)溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的牛孕酮(PROG)呈正相關(guān),。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),,計(jì)算樣品濃度。
牛孕酮(PROG)elisa試劑盒免費(fèi)代測(cè)特點(diǎn):
1,、靈敏度:有二層含義,,1)為試劑檢出被檢物質(zhì)的zui低量的能力;2)為試劑對(duì)大量樣品中陽(yáng)性檢出的能力;
2,、特異性:常用交叉反應(yīng)率表示,。含有與待測(cè)物相近結(jié)構(gòu)部份的物質(zhì)可能存在交叉反應(yīng),使測(cè)定結(jié)果升高,,可能導(dǎo)致假陽(yáng)性,,所以交叉反應(yīng)是評(píng)價(jià)其質(zhì)量的關(guān)鍵指標(biāo);
3,、精密度:ELISA試劑一般指其批內(nèi)CV%,其值應(yīng)小于15%,;定量試劑應(yīng)同時(shí)考察線(xiàn)性范圍;
4,、準(zhǔn)確度:通過(guò)添加回收實(shí)驗(yàn)進(jìn)行評(píng)價(jià);
5、簡(jiǎn)便性:指在不影響試劑的前三項(xiàng)指標(biāo)的前題下,,實(shí)驗(yàn)和測(cè)定步驟越少越好,,在定性實(shí)驗(yàn)中結(jié)果判斷簡(jiǎn)單明了,定量試驗(yàn)結(jié)果計(jì)算也應(yīng)簡(jiǎn)單;
6,、安全性:指試劑對(duì)操作者和環(huán)境安全無(wú)害無(wú)傳染性;
7,、經(jīng)濟(jì)性:試劑在同等質(zhì)量條件下通過(guò)大規(guī)模生產(chǎn)或技術(shù)進(jìn)步降低成本,而市場(chǎng)價(jià)格比較合理;
8,、試劑評(píng)價(jià):需要有的確證方法和確證的樣品進(jìn)行檢測(cè),。
操作問(wèn)題:
試劑準(zhǔn)備不當(dāng)可能影響酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定ELISA結(jié)果
在實(shí)驗(yàn)室,對(duì)試劑準(zhǔn)備一般不太注意,,通常的做法是,,在實(shí)驗(yàn)時(shí)將試劑從冰箱中拿出來(lái)即用,而忽略了這種做法有可能影響后面溫育時(shí)間不夠的問(wèn)題,,其直接的后果是對(duì)一些弱陽(yáng)性標(biāo)本的檢測(cè)出現(xiàn)假陰性,。
因此,在ELISA測(cè)定中試劑的準(zhǔn)備zui為關(guān)鍵的是,,在實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,將試劑盒先從冰箱中拿出來(lái),,在室溫下放置20min以上后,,再進(jìn)行測(cè)定,以使試劑盒在使用前與室溫平衡,。這樣做的目的,,主要是為了在后面的溫育反應(yīng)步驟中,能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所要求的高度,,以滿(mǎn)足測(cè)定要求,。其次,目前的商品ELISA試劑盒中的洗板液均需在實(shí)驗(yàn)室使用時(shí)對(duì)所提供的濃縮液稀釋配制,,因此稀釋時(shí)所用的蒸餾水或去離子水應(yīng)保證質(zhì)量,。
此外,當(dāng)試劑盒以O(shè)PD為底物時(shí),,則底物溶液應(yīng)在反應(yīng)顯色前臨時(shí)配制,。
樣品要求
·客戶(hù)需提供待檢測(cè)抗體和包被用抗原。
·檢測(cè)的樣本為細(xì)胞培養(yǎng)上清,、人和動(dòng)物的血清,、血漿,。
·樣本收集后應(yīng)立即-20℃保存,若長(zhǎng)期保存應(yīng)-70℃,。
·樣本量的要求:若一個(gè)指標(biāo)做復(fù)孔檢測(cè)應(yīng)不少于250ul,,做單孔檢測(cè)應(yīng)不少于120ul。建議若客戶(hù)樣本量充足提供500ul以上,。
·客戶(hù)的樣本收集后,,立即按要求保存,切忌反復(fù)凍融,。外地客戶(hù)郵寄需要用干冰運(yùn)輸,。郵寄前請(qǐng)與溝通確認(rèn)。
Elisa定量測(cè)定/定性測(cè)定比較
Elisa定量測(cè)定
ELSIA操作步驟復(fù)雜,,影響反應(yīng)因素較多,,特別是固相載體的包被難達(dá)到各個(gè)體之間的*,因此在定量測(cè)定中,,每批測(cè)試均須用一系列不同濃度的參考標(biāo)準(zhǔn)品在相同的條件下制作標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),。測(cè)定大分子量物質(zhì)的夾心法ELISA,標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的范圍一般較寬,,曲線(xiàn)zui高點(diǎn)的吸光度可接近2.0,,繪制時(shí)常用半對(duì)數(shù)紙,以檢測(cè)物的濃度為橫坐標(biāo),,以吸光度為縱坐標(biāo),,將各濃度的值逐點(diǎn)連接,所得曲線(xiàn)一般呈S形,,其頭,、尾部曲線(xiàn)趨于平坦,中央較呈直線(xiàn)的部分是的檢測(cè)區(qū)域,。
Elisa定性測(cè)定
定性測(cè)定的結(jié)果判斷是對(duì)受檢標(biāo)本中是否含有待測(cè)抗原或抗體作出"有"或"無(wú)"的簡(jiǎn)單回答,,分別用"陽(yáng)性"、"陰性"表示,。"陽(yáng)性"表示該標(biāo)本在該測(cè)定系統(tǒng)中有反應(yīng),。"陰性"則為無(wú)反應(yīng)。用定性判斷法也可得到半定量結(jié)果,,即用滴度來(lái)表示反應(yīng)的強(qiáng)度,,其實(shí)質(zhì)仍是一個(gè)定性試驗(yàn)。在這種半定量測(cè)定中,,將標(biāo)本作一系列稀釋后進(jìn)行試驗(yàn),,呈陽(yáng)性反應(yīng)的zui高稀釋度即為滴度。根據(jù)滴度的高低,,可以判斷標(biāo)本反應(yīng)性的強(qiáng)弱,,這比觀(guān)察不稀釋標(biāo)本呈色的深淺判斷為強(qiáng)陽(yáng)性,、弱陽(yáng)性更具定量意義。
回收率
elisa試劑盒回收率是反應(yīng)待測(cè)物在樣品分析過(guò)程中的損失的程度,,損失越少,,回收率越高,如果作標(biāo)液1PPM,,就是1毫克/升,,而作出標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)為0.99毫克/升,就是說(shuō)你的回收率是99%,,這個(gè)與真實(shí)成分有密切的關(guān)系,,說(shuō)明方法的準(zhǔn)確度。比如水中總無(wú)機(jī)氯含量測(cè)定,樣品水中含有無(wú)機(jī)氯20mg/L,取100mL被測(cè)水樣品,加入0.1mL濃度為10mg/mL的含無(wú)機(jī)氯標(biāo)準(zhǔn)樣品,測(cè)定時(shí)忽略體積變化,如果測(cè)定出樣品中無(wú)機(jī)氯為2.98mg/L,則認(rèn)為回收率為98%,。
對(duì)于定量檢測(cè)來(lái)說(shuō),,主要還是一個(gè)準(zhǔn)確度的驗(yàn)證。不過(guò)我看到別人寫(xiě)的內(nèi)容比我自己想說(shuō)的要好,,所以就貼上去了,。相對(duì)回收率可能會(huì)高于100%的,如果只是說(shuō)“損失程度”,,其實(shí)是不準(zhǔn)確的,。應(yīng)該說(shuō),回收率越接近100%,,說(shuō)明這個(gè)試劑盒的準(zhǔn)確度越高,。
訂購(gòu)說(shuō)明:
1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨,,一般情況下都能訂貨當(dāng)日發(fā)貨,。
2、部分非常用產(chǎn)品,,需提前1-2日預(yù)訂,海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂,。
3,、部分產(chǎn)品價(jià)格會(huì)因貨期、批次等因素發(fā)生變化,,若有變動(dòng)以訂貨當(dāng)日價(jià)格為準(zhǔn),。
4、每日訂單截止時(shí)間為16點(diǎn)整,,部分城市可到17點(diǎn)整,,因超過(guò)截止時(shí)間造成當(dāng)日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。
5,、請(qǐng)辦理完貨款后,,將底單等連同收貨人的地址,、姓名、等以傳真,、,、短信、等形式通知我們,。
咨詢(xún)訂購(gòu)產(chǎn)品,,您也可以我公司業(yè)務(wù)員的,或者本中留言(會(huì)在半個(gè)工作日內(nèi)給您回復(fù)去)