詳細介紹
豬化因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒哪家好
l 本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿,、組織,、細胞上清及相關液體樣本中豬轉化生長因子β1(TGF-β1)的含量。
l 有效期:6個月
l 保存條件:2-8℃
l 本試劑盒僅供體外研究使用,,不用于臨床診斷
實驗原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA),。往預先包被豬轉化生長因子β1(TGF-β1)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本,、標準品,、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并*洗滌,。用底物TMB顯色,,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的豬轉化生長因子β1(TGF-β1)呈正相關,。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度,。
豬化因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒哪家好結果判斷與分析
1,、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值
2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),,相應的待測物質標準品濃度為橫坐標(X),,做得相應的曲線,,樣品的待測物質含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。
ELISA試劑盒樣品收集,、處理及保存方法
1)血清-----操作過程中避免任何細胞刺激,。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離,。
2)血漿-----EDTA、檸檬酸鹽,、肝素血漿可用于檢測,。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3)細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物,。
4)組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎,。1000×g離心10分鐘,取上清液
5)保存------如果樣品不立即使用,,應將其分成小部分-70 ℃保存,,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血,。如果血清中大量顆粒,,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍,。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
豬化因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒哪家好操作步驟
1)使用前,將所有試劑充分混勻,。不要使液體產生大量的泡沫,,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差,。
2)根據待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數(shù)量來定,,能使用復孔的盡量做復孔,。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應孔內。
3)加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔,、加入待測樣品50ul于反應孔內,。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,,輕輕振蕩混勻,,37℃溫育1小時。
4)甩去孔內液體,,每孔加滿洗滌液,,振蕩30秒,,甩去洗滌液,用吸水紙拍干,。重復此操作3次,。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次,。
5)每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘,。
6)甩去孔內液體,,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,,甩去洗滌液,,用吸水紙拍干。重復此操作3次,。如果用洗板機洗滌,,洗滌次數(shù)增加一次。
7)每孔加入底物A,、B各50ul,,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘,。避免光照,。
8)取出酶標板,迅速加入50ul終止液,,加入終止液后應立即測定結果。
9)在450nm波長處測定各孔的OD值,。
試劑的準備
1)標準品:標準品的系列稀釋應在實驗時準備,,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻,。
2)洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋,。
客戶須知
1、液體類標本(細胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿,、血清、血漿,、尿液,、胸水、腹水,、腦脊液等),;
2,、樣本保存:請盡早檢測,2-8℃保存一天,;需更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,。如需周期收集樣本,請將樣本及時分裝標號后,,置-20℃或-70℃保存,;
3、請?zhí)崆案嬖V我們:您樣本的種屬,、樣本數(shù)量,、待測指標及其它特殊要求。
4,、我們可以根據您的應用需要,,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,,而量身定制檢測試劑盒,,有效控制檢測試劑成本。并可提供免費代測,。
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