ROS,豬活性氧簇ELISA試劑盒技術指導

l 本試劑盒用于體外定量檢測血清,、血漿、組織,、細胞上清及相關液體樣本中豬活性氧簇（ROS）的含量,。

l 有效期：6個月

l 保存條件：2-8℃

l 本試劑盒僅供體外研究使用，不用于臨床診斷

實驗原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）,。往預先包被豬活性氧簇（ROS）捕獲抗體的包被微孔中,，依次加入標本、標準品,、HRP標記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌,。用底物TMB顯色,，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的豬活性氧簇（ROS）呈正相關,。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度,。

ROS,豬活性氧簇ELISA試劑盒技術指導特點：

1,、靈敏度：有二層含義，1)為試劑檢出被檢物質(zhì)的zui低量的能力,；2)為試劑對大量樣品中陽性檢出的能力;

2,、特異性：常用交叉反應率表示,。含有與待測物相近結構部份的物質(zhì)可能存在交叉反應，使測定結果升高,，可能導致假陽性,，所以交叉反應是評價其質(zhì)量的關鍵指標;

3、精密度：ELISA試劑一般指其批內(nèi)CV%,，其值應小于15%,；定量試劑應同時考察線性范圍;

4、準確度：通過添加回收實驗進行評價;

5,、簡便性：指在不影響試劑的前三項指標的前題下,，實驗和測定步驟越少越好，在定性實驗中結果判斷簡單明了,，定量試驗結果計算也應簡單;

6,、安全性：指試劑對操作者和環(huán)境安全無害無傳染性;

7、經(jīng)濟性：試劑在同等質(zhì)量條件下通過大規(guī)模生產(chǎn)或技術進步降低成本,，而市場價格比較合理;

8,、試劑評價：需要有的確證方法和確證的樣品進行檢測。

Elisa試劑盒自備物品

1.   酶標儀(建議參考儀器使用說明提前預熱)

2.   微量加液器及吸頭,，EP管

3.   蒸餾水或去離子水,，全新濾紙。

定量測定/定性測定比較

Elisa定量測定

ELSIA操作步驟復雜,，影響反應因素較多,，特別是固相載體的包被難達到各個體之間的*，因此在定量測定中,，每批測試均須用一系列不同濃度的參考標準品在相同的條件下制作標準曲線,。測定大分子量物質(zhì)的夾心法ELISA，標準曲線的范圍一般較寬,，曲線zui高點的吸光度可接近2.0,，繪制時常用半對數(shù)紙，以檢測物的濃度為橫坐標,，以吸光度為縱坐標,，將各濃度的值逐點連接，所得曲線一般呈S形,，其頭,、尾部曲線趨于平坦，中央較呈直線的部分是的檢測區(qū)域,。

Elisa定性測定

定性測定的結果判斷是對受檢標本中是否含有待測抗原或抗體作出"有"或"無"的簡單回答,，分別用"陽性"、"陰性"表示,。"陽性"表示該標本在該測定系統(tǒng)中有反應,。"陰性"則為無反應,。用定性判斷法也可得到半定量結果，即用滴度來表示反應的強度,，其實質(zhì)仍是一個定性試驗,。在這種半定量測定中，將標本作一系列稀釋后進行試驗,，呈陽性反應的zui高稀釋度即為滴度,。根據(jù)滴度的高低，可以判斷標本反應性的強弱,，這比觀察不稀釋標本呈色的深淺判斷為強陽性,、弱陽性更具定量意義。

回收率

    elisa試劑盒回收率是反應待測物在樣品分析過程中的損失的程度,，損失越少,，回收率越高，如果作標液1PPM,，就是1毫克/升,，而作出標準數(shù)據(jù)為0.99毫克/升，就是說你的回收率是99%,，這個與真實成分有密切的關系,，說明方法的準確度。比如水中總無機氯含量測定,樣品水中含有無機氯20mg/L,取100mL被測水樣品,加入0.1mL濃度為10mg/mL的含無機氯標準樣品,測定時忽略體積變化,如果測定出樣品中無機氯為2.98mg/L,則認為回收率為98%,。

對于定量檢測來說,，主要還是一個準確度的驗證。不過我看到別人寫的內(nèi)容比我自己想說的要好,，所以就貼上去了,。相對回收率可能會高于100%的，如果只是說“損失程度”,，其實是不準確的,。應該說，回收率越接近100%,，說明這個試劑盒的準確度越高,。

訂購說明：

1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨,，一般情況下都能訂貨當日發(fā)貨,。

2,、部分非常用產(chǎn)品,，需提前1－2日預訂，海外期貨則需要提前3-6周預訂,。

3,、部分產(chǎn)品價格會因貨期,、批次等因素發(fā)生變化，若有變動以訂貨當日價格為準,。

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