詳細介紹
CRP,豬C-反應(yīng)蛋白ELISA試劑盒哪家好
l 本試劑盒用于體外定量檢測血清,、血漿、組織,、細胞上清及相關(guān)液體樣本中豬C-反應(yīng)蛋白(CRP)的含量,。
l 有效期:6個月
l 保存條件:2-8℃
l 本試劑盒僅供體外研究使用,不用于臨床診斷
實驗原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA),。往預先包被豬C-反應(yīng)蛋白(CRP)捕獲抗體的包被微孔中,,依次加入標本、標準品,、HRP標記的檢測抗體,,經(jīng)過溫育并*洗滌,。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的豬C-反應(yīng)蛋白(CRP)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),,計算樣品濃度,。
CRP,豬C-反應(yīng)蛋白ELISA試劑盒哪家好洗板方法
1. 手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內(nèi)的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,,酶標板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內(nèi),,浸泡1-2分鐘,,根據(jù)需要,重復此過程數(shù)次,。
2. 自動洗板:如果有自動洗板機,,應(yīng)在熟練使用后再用到正式實驗過程中。
Elisa試劑盒計算
以標準物的濃度為縱坐標(對數(shù)坐標),,OD值為橫坐標(對數(shù)坐標),,在對數(shù)坐標紙上繪出標準曲線。推薦使用專業(yè)制作曲線軟件進行分析,,如curve expert 1.3,,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度,再乘以稀釋倍數(shù),;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的回歸方程式,,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,,再乘以稀釋倍數(shù),,即為樣品的實際濃度。
類型
ELISA可用于測定抗原,,也可用于測定抗體,。在這種測定方法中有三個必要的試劑:(1)固相的抗菌素原或抗體,即"免疫吸附劑"(immunosorbent),;(2)酶標記的抗原或抗體,,稱為"結(jié)合物"(conjugate);(3)酶反應(yīng)的底物,。根據(jù)試劑的來源和標本的情況以及檢測的具體條件,,可設(shè)計出各種不同類型的檢測方法。用于臨床檢驗的ELISA主要有以下幾種類型:
雙抗原夾心法測抗體
反應(yīng)模式與雙抗體夾心法類似,。用特異性抗原進行包被和制備酶結(jié)合物,,以檢測相應(yīng)的抗體,。與間接法測抗體的不同之處為以酶標抗原代替酶標抗抗體。此法中受檢標本不需稀釋,,可直接用于測定,,因此其敏感度相對高于間接法。乙肝標志物中抗HBs的檢測常采用本法,。本法關(guān)鍵在于酶標抗原的制備,,應(yīng)根據(jù)抗原結(jié)構(gòu)的不同,尋找合適的標記方法,。
間接法測抗體
間接法是檢測抗體常用的方法,。其原理為利用酶標記的抗抗體(抗人免疫球蛋白抗體)以檢測與固相抗原結(jié)合的受檢抗體,故稱為間接法(見圖2-3),。操作步驟如下:
1)將特異性抗原與固相載體聯(lián)結(jié),,形成固相抗原。洗滌除去未結(jié)合的抗原及雜質(zhì),。
2)加稀釋的受檢血清,,保溫反應(yīng)。血清中的特異抗體與固相抗原結(jié)合,,形成固相抗原抗體復合物,。經(jīng)洗滌后,固相載體上只留下特異性抗體,,血清中的其他成份在洗滌過程中被洗去,。
3)加酶標抗抗體??捎妹笜丝谷薎g以檢測總抗體,,但一般多用酶標抗人IgG檢測IgG抗體。固相免疫復合物中的抗體與酶標抗體抗體結(jié)合,,從而間接地標記上酶,。洗滌后,固相載體上的酶量與標本中受檢抗體的量正相關(guān),。
4)加底物顯色
本法主要用于對病原體抗體的檢測而進行傳染病的診斷,。間接法的優(yōu)點是只要變換包被抗原就可利用同一酶標抗抗體建立檢測相應(yīng)抗體的方法。
間接法成功的關(guān)鍵在于抗原的純度,。雖然有時用粗提抗原包被也能取得實際有效的結(jié)果,,但應(yīng)盡可能予以純化,以提高試驗的特異性,。特別應(yīng)注意除去能與一般健康人血清發(fā)生反應(yīng)的雜質(zhì),,例如以E.Coli為工程酶的重組抗原,如其中含有E.Coli成份,,很可能與受過E.Coli感染者血甭中的抗E.Coli抗體發(fā)生反應(yīng),??乖幸膊荒芎信c酶標抗人Ig反應(yīng)的物質(zhì),例如來自人血漿或人體組織的抗原,,如不將其中的Ig去除,,試驗中也發(fā)生假陽性反
應(yīng)。另外如抗原中含有無關(guān)蛋白,,也會因竟爭吸附而影響包被效果,。
間接法中另一種干擾因素為正常血清中所含的高濃度的非特異性。病人血清中受檢的特異性IgG只占總IgG中的一小部分,。IgG的吸附性很強,,非特異IgG可直接吸附到固相載體上,有時也可吸附到包被抗原的表面,。因此在間接法中,,抗原包被后一般用無關(guān)蛋白質(zhì)(例如牛血清蛋白)再包被一次,以封閉(blocking)固相上的空余間隙,。另外,在檢測過程中標本須先行稀釋(1:40~1:200),,以避免過高的陰性本底影響結(jié)果的判斷,。
代檢測服務(wù)
購買本公司目錄任何一種檢測試劑盒,都可提供代檢測服務(wù),,您只需將需要檢測的動物(Human,Rat,Mouse,Rabbit,Mon key, Pig……)種類和檢測指標(介素類,、因子類)及標本數(shù)量(48T/96T)通知公司業(yè)務(wù)員即可。在接到客戶標本當日起,,現(xiàn)貨產(chǎn)品一周內(nèi)將檢測報告交到客戶手中,!
寄標本時需注明以下情況:
標本編號;2,、所測項目,;3、是否做復孔,;3,、;4,、實驗后標本是否寄回,。
Elisa試劑盒種類
大象、牛,、大鼠,、小鼠、人,、馬,、兔,、大熊貓、類人猿,、蜥蜴,、蝌蚪、菠菜,、羊,、犬、魷魚,、蝸牛,、扁豆、豌豆,、馬鈴薯,、蟈蟈、豚鼠,、倉鼠,、金黃地鼠、鵝,、鴿子,、禿鷲、河馬,、犀牛,、野豬、東北虎,、斑鳩,、蚯蚓、鯉魚,、眼鏡蛇,、青蛙、丹頂鶴,、鳥類等動植物種屬