豬c-fos（）ELISA試劑盒技術(shù)指導(dǎo)

l 本試劑盒用于體外定量檢測血清,、血漿、組織,、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中豬c-fos（）的含量,。

l 有效期：6個月

l 保存條件：2-8℃

l 本試劑盒僅供體外研究使用，不用于臨床診斷

實驗原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）,。往預(yù)先包被豬c-fos（）捕獲抗體的包被微孔中,，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品,、HRP標(biāo)記的檢測抗體,，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的豬c-fos（）呈正相關(guān),。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值）,，計算樣品濃度,。

豬c-fos（）ELISA試劑盒技術(shù)指導(dǎo)洗板方法

1.  手工洗板方法：吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體；在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,，酶標(biāo)板朝下用力拍幾次,；將推薦的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內(nèi)，浸泡1-2分鐘,，根據(jù)需要,，重復(fù)此過程數(shù)次。

2.  自動洗板：如果有自動洗板機(jī),，應(yīng)在熟練使用后再用到正式實驗過程中,。

Elisa試劑盒計算

  以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為縱坐標(biāo)(對數(shù)坐標(biāo))，OD值為橫坐標(biāo)(對數(shù)坐標(biāo)),，在對數(shù)坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,。推薦使用專業(yè)制作曲線軟件進(jìn)行分析，如curve expert 1.3,，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度,，再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程式,，將樣品的OD值代入方程式,，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù),，即為樣品的實際濃度,。

類型
　　ELISA可用于測定抗原，也可用于測定抗體,。在這種測定方法中有三個必要的試劑：（1）固相的抗菌素原或抗體,，即"免疫吸附劑"（immunosorbent）；（2）酶標(biāo)記的抗原或抗體,，稱為"結(jié)合物"（conjugate）,；（3）酶反應(yīng)的底物。根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的情況以及檢測的具體條件,，可設(shè)計出各種不同類型的檢測方法,。用于臨床檢驗的ELISA主要有以下幾種類型：

雙抗原夾心法測抗體
　　反應(yīng)模式與雙抗體夾心法類似。用特異性抗原進(jìn)行包被和制備酶結(jié)合物,，以檢測相應(yīng)的抗體,。與間接法測抗體的不同之處為以酶標(biāo)抗原代替酶標(biāo)抗抗體。此法中受檢標(biāo)本不需稀釋,，可直接用于測定,，因此其敏感度相對高于間接法。乙肝標(biāo)志物中抗HBs的檢測常采用本法。本法關(guān)鍵在于酶標(biāo)抗原的制備,，應(yīng)根據(jù)抗原結(jié)構(gòu)的不同,，尋找合適的標(biāo)記方法。

間接法測抗體

　　間接法是檢測抗體常用的方法,。其原理為利用酶標(biāo)記的抗抗體（抗人免疫球蛋白抗體）以檢測與固相抗原結(jié)合的受檢抗體,，故稱為間接法（見圖2-3）。操作步驟如下：
1）將特異性抗原與固相載體聯(lián)結(jié),，形成固相抗原,。洗滌除去未結(jié)合的抗原及雜質(zhì)。
2）加稀釋的受檢血清,，保溫反應(yīng),。血清中的特異抗體與固相抗原結(jié)合，形成固相抗原抗體復(fù)合物,。經(jīng)洗滌后,，固相載體上只留下特異性抗體,，血清中的其他成份在洗滌過程中被洗去,。
3）加酶標(biāo)抗抗體?？捎妹笜?biāo)抗人Ig以檢測總抗體,，但一般多用酶標(biāo)抗人IgG檢測IgG抗體。固相免疫復(fù)合物中的抗體與酶標(biāo)抗體抗體結(jié)合,，從而間接地標(biāo)記上酶,。洗滌后，固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢抗體的量正相關(guān),。
4）加底物顯色
　　本法主要用于對病原體抗體的檢測而進(jìn)行傳染病的診斷,。間接法的優(yōu)點是只要變換包被抗原就可利用同一酶標(biāo)抗抗體建立檢測相應(yīng)抗體的方法。
　　間接法成功的關(guān)鍵在于抗原的純度,。雖然有時用粗提抗原包被也能取得實際有效的結(jié)果,，但應(yīng)盡可能予以純化，以提高試驗的特異性,。特別應(yīng)注意除去能與一般健康人血清發(fā)生反應(yīng)的雜質(zhì),，例如以E.Coli為工程酶的重組抗原，如其中含有E.Coli成份,，很可能與受過E.Coli感染者血甭中的抗E.Coli抗體發(fā)生反應(yīng),。抗原中也不能含有與酶標(biāo)抗人Ig反應(yīng)的物質(zhì),，例如來自人血漿或人體組織的抗原,，如不將其中的Ig去除，試驗中也發(fā)生假陽性反
應(yīng)。另外如抗原中含有無關(guān)蛋白,，也會因竟?fàn)幬蕉绊懓恍Ч?/span>
　　間接法中另一種干擾因素為正常血清中所含的高濃度的非特異性,。病人血清中受檢的特異性IgG只占總IgG中的一小部分。IgG的吸附性很強(qiáng),，非特異IgG可直接吸附到固相載體上,，有時也可吸附到包被抗原的表面。因此在間接法中,，抗原包被后一般用無關(guān)蛋白質(zhì)（例如牛血清蛋白）再包被一次,，以封閉（blocking）固相上的空余間隙。另外,，在檢測過程中標(biāo)本須先行稀釋（1:40~1:200）,，以避免過高的陰性本底影響結(jié)果的判斷。

代檢測服務(wù)

購買本公司目錄任何一種檢測試劑盒,，都可提供代檢測服務(wù),，您只需將需要檢測的動物(Human,Rat,Mouse,Rabbit,Mon key, Pig……)種類和檢測指標(biāo)(介素類、因子類)及標(biāo)本數(shù)量(48T/96T)通知公司業(yè)務(wù)員即可,。在接到客戶標(biāo)本當(dāng)日起,，現(xiàn)貨產(chǎn)品一周內(nèi)將檢測報告交到客戶手中！

寄標(biāo)本時需注明以下情況：

標(biāo)本編號,；2,、所測項目；3,、是否做復(fù)孔,；3、,；4,、實驗后標(biāo)本是否寄回。

Elisa試劑盒種類

大象,、牛,、大鼠、小鼠,、人,、馬、兔,、大熊貓,、類人猿、蜥蜴,、蝌蚪,、菠菜、羊、犬,、魷魚,、蝸牛、扁豆,、豌豆,、馬鈴薯、蟈蟈,、豚鼠,、倉鼠、金黃地鼠,、鵝,、鴿子、禿鷲,、河馬,、犀牛、野豬,、東北虎,、斑鳩、蚯蚓,、鯉魚,、眼鏡蛇,、青蛙,、丹頂鶴、鳥類等動植物種屬