CD4,豬CD4分子ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)

l 本試劑盒用于體外定量檢測(cè)血清,、血漿、組織,、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中豬CD4分子（CD4）的含量,。

l 有效期：6個(gè)月

l 保存條件：2-8℃

l 本試劑盒僅供體外研究使用，不用于臨床診斷 

實(shí)驗(yàn)原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）,。往預(yù)先包被豬CD4分子（CD4）捕獲抗體的包被微孔中,，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品,、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,，經(jīng)過(guò)溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,，TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的豬CD4分子（CD4）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD 值）,，計(jì)算樣品濃度,。

CD4,豬CD4分子ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)洗板方法

1.  手工洗板方法：吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體；在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙,，酶標(biāo)板朝下用力拍幾次,；將推薦的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內(nèi)，浸泡1-2分鐘,，根據(jù)需要,，重復(fù)此過(guò)程數(shù)次。

2.  自動(dòng)洗板：如果有自動(dòng)洗板機(jī),，應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,。

Elisa試劑盒計(jì)算

  以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為縱坐標(biāo)(對(duì)數(shù)坐標(biāo))，OD值為橫坐標(biāo)(對(duì)數(shù)坐標(biāo)),，在對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),。推薦使用專(zhuān)業(yè)制作曲線(xiàn)軟件進(jìn)行分析，如curve expert 1.3,，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)查出相應(yīng)的濃度,，再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的回歸方程式,，將樣品的OD值代入方程式,，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù),，即為樣品的實(shí)際濃度,。

類(lèi)型
　　ELISA可用于測(cè)定抗原,，也可用于測(cè)定抗體,。在這種測(cè)定方法中有三個(gè)必要的試劑：（1）固相的抗菌素原或抗體，即"免疫吸附劑"（immunosorbent）,；（2）酶標(biāo)記的抗原或抗體,，稱(chēng)為"結(jié)合物"（conjugate）；（3）酶反應(yīng)的底物,。根據(jù)試劑的來(lái)源和標(biāo)本的情況以及檢測(cè)的具體條件,，可設(shè)計(jì)出各種不同類(lèi)型的檢測(cè)方法。用于臨床檢驗(yàn)的ELISA主要有以下幾種類(lèi)型：

雙抗原夾心法測(cè)抗體
　　反應(yīng)模式與雙抗體夾心法類(lèi)似,。用特異性抗原進(jìn)行包被和制備酶結(jié)合物,，以檢測(cè)相應(yīng)的抗體。與間接法測(cè)抗體的不同之處為以酶標(biāo)抗原代替酶標(biāo)抗抗體,。此法中受檢標(biāo)本不需稀釋?zhuān)芍苯佑糜跍y(cè)定,，因此其敏感度相對(duì)高于間接法。乙肝標(biāo)志物中抗HBs的檢測(cè)常采用本法。本法關(guān)鍵在于酶標(biāo)抗原的制備,，應(yīng)根據(jù)抗原結(jié)構(gòu)的不同,，尋找合適的標(biāo)記方法。

間接法測(cè)抗體

　　間接法是檢測(cè)抗體常用的方法,。其原理為利用酶標(biāo)記的抗抗體（抗人免疫球蛋白抗體）以檢測(cè)與固相抗原結(jié)合的受檢抗體,，故稱(chēng)為間接法（見(jiàn)圖2-3）。操作步驟如下：
1）將特異性抗原與固相載體聯(lián)結(jié),，形成固相抗原,。洗滌除去未結(jié)合的抗原及雜質(zhì)。
2）加稀釋的受檢血清,，保溫反應(yīng),。血清中的特異抗體與固相抗原結(jié)合，形成固相抗原抗體復(fù)合物,。經(jīng)洗滌后,，固相載體上只留下特異性抗體，血清中的其他成份在洗滌過(guò)程中被洗去,。
3）加酶標(biāo)抗抗體,。可用酶標(biāo)抗人Ig以檢測(cè)總抗體,，但一般多用酶標(biāo)抗人IgG檢測(cè)IgG抗體,。固相免疫復(fù)合物中的抗體與酶標(biāo)抗體抗體結(jié)合，從而間接地標(biāo)記上酶,。洗滌后,，固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢抗體的量正相關(guān)。
4）加底物顯色
　　本法主要用于對(duì)病原體抗體的檢測(cè)而進(jìn)行傳染病的診斷,。間接法的優(yōu)點(diǎn)是只要變換包被抗原就可利用同一酶標(biāo)抗抗體建立檢測(cè)相應(yīng)抗體的方法,。
　　間接法成功的關(guān)鍵在于抗原的純度。雖然有時(shí)用粗提抗原包被也能取得實(shí)際有效的結(jié)果,，但應(yīng)盡可能予以純化,，以提高試驗(yàn)的特異性。特別應(yīng)注意除去能與一般健康人血清發(fā)生反應(yīng)的雜質(zhì),，例如以E.Coli為工程酶的重組抗原,，如其中含有E.Coli成份，很可能與受過(guò)E.Coli感染者血甭中的抗E.Coli抗體發(fā)生反應(yīng),?？乖幸膊荒芎信c酶標(biāo)抗人Ig反應(yīng)的物質(zhì)，例如來(lái)自人血漿或人體組織的抗原,，如不將其中的Ig去除,，試驗(yàn)中也發(fā)生假陽(yáng)性反
應(yīng),。另外如抗原中含有無(wú)關(guān)蛋白，也會(huì)因竟?fàn)幬蕉绊懓恍Ч?/span>
　　間接法中另一種干擾因素為正常血清中所含的高濃度的非特異性,。病人血清中受檢的特異性IgG只占總IgG中的一小部分,。IgG的吸附性很強(qiáng)，非特異IgG可直接吸附到固相載體上,，有時(shí)也可吸附到包被抗原的表面,。因此在間接法中，抗原包被后一般用無(wú)關(guān)蛋白質(zhì)（例如牛血清蛋白）再包被一次,，以封閉（blocking）固相上的空余間隙,。另外，在檢測(cè)過(guò)程中標(biāo)本須先行稀釋?zhuān)?:40~1:200）,，以避免過(guò)高的陰性本底影響結(jié)果的判斷,。

代檢測(cè)服務(wù)

購(gòu)買(mǎi)本公司目錄任何一種檢測(cè)試劑盒，都可提供代檢測(cè)服務(wù),，您只需將需要檢測(cè)的動(dòng)物(Human,Rat,Mouse,Rabbit,Mon key, Pig……)種類(lèi)和檢測(cè)指標(biāo)(介素類(lèi),、因子類(lèi))及標(biāo)本數(shù)量(48T/96T)通知公司業(yè)務(wù)員即可。在接到客戶(hù)標(biāo)本當(dāng)日起,，現(xiàn)貨產(chǎn)品一周內(nèi)將檢測(cè)報(bào)告交到客戶(hù)手中,！

寄標(biāo)本時(shí)需注明以下情況：

標(biāo)本編號(hào)；2,、所測(cè)項(xiàng)目,；3、是否做復(fù)孔,；3,、；4,、實(shí)驗(yàn)后標(biāo)本是否寄回,。

Elisa試劑盒種類(lèi)

大象、牛,、大鼠,、小鼠,、人,、馬、兔,、大熊貓,、類(lèi)人猿、蜥蜴,、蝌蚪,、菠菜,、羊、犬,、魷魚(yú),、蝸牛、扁豆,、豌豆,、馬鈴薯、蟈蟈,、豚鼠,、倉(cāng)鼠、金黃地鼠,、鵝,、鴿子、禿鷲,、河馬,、犀牛、野豬,、東北虎,、斑鳩、蚯蚓,、鯉魚(yú),、眼鏡蛇、青蛙,、丹頂鶴,、鳥(niǎo)類(lèi)等動(dòng)植物種屬