ACTH,牛促腎上腺皮質(zhì)激素elisa試劑盒說(shuō)明書(shū)

l 本試劑盒用于體外定量檢測(cè)血清,、血漿,、組織、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中牛促腎上腺皮質(zhì)激素（ACTH）的含量,。

l 有效期：6個(gè)月

l 保存條件：2-8℃

l 本試劑盒僅供體外研究使用,，不用于臨床診斷

實(shí)驗(yàn)原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被牛促腎上腺皮質(zhì)激素（ACTH）捕獲抗體的包被微孔中,，依次加入標(biāo)本,、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,，經(jīng)過(guò)溫育并*洗滌,。用底物TMB顯色，TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的牛促腎上腺皮質(zhì)激素（ACTH）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD 值）,，計(jì)算樣品濃度。

主要優(yōu)點(diǎn)
1.高效,、靈敏,、特異的抗體；
2. 穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性,；
3. 吸附性能好,，空白值低，孔底透明度高的固相載體,；
4. 適用血清,、血漿、組織勻漿液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清液,、尿液等等多種標(biāo)本類型；
5. zui大限度的節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi),。

ELISA試劑盒樣本要求:
1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn),。若不能
馬上進(jìn)行試驗(yàn),，可將標(biāo)本放于-20℃保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2．不能檢測(cè)含 NaN3 的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性,。

ACTH,牛促腎上腺皮質(zhì)激素elisa試劑盒說(shuō)明書(shū)操作步驟
1.編號(hào)：將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),，每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔、陽(yáng)性對(duì)照 2 孔,、空白對(duì)照 1孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,，其余各步操作相同）
2.加樣：分別在陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照,、陽(yáng)性對(duì)照 50μl,。然后在待測(cè)樣品孔先加樣品稀釋液 40μl，然后再加待測(cè)樣品 10μl,。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻,，
3.溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘,。
4.配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體,，甩干,，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去,，如此重復(fù) 5 次,，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl,，空白孔除外,。
7.溫育：操作同 3。
8.洗滌：操作同 5,。
9.顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl,，再加入顯色劑 B50μl，輕輕震蕩混勻,，37℃避光顯色15 分鐘.
10.終止：每孔加終止液 50μl,，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11.測(cè)定：以空白空調(diào)零,，450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD 值）,。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
注意事項(xiàng)
1．操作嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行,，本試劑不同批號(hào)組分不得混用,。
2．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,，板條應(yīng)裝入密封袋中保存,。
3濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果,。

4．封板膜只限一次性使用,，以避免交叉污染。

5．底物請(qǐng)避光保存,。
6．試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn),，使用雙波長(zhǎng)檢測(cè)時(shí)，參考波長(zhǎng)為 630nm
7．所有樣品,，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理,。終止液為 2M 的硫酸，使用時(shí)必須注意安全,。
性能：
1.靈敏度：zui小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品,。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990,。
2. 特異性：不與其它細(xì)胞因子反應(yīng),。
3. 重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%,。

客戶須知
1,、液體類標(biāo)本（細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿,、血清,、血漿、尿液,、胸水,、腹水、腦脊液等）,；
2、樣本保存：請(qǐng)盡早檢測(cè),，2-8℃保存一天,；需更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍（-20℃或-70℃）保存。如需周期收集樣本,，請(qǐng)將樣本及時(shí)分裝標(biāo)號(hào)后,，置-20℃或-70℃保存；
3,、請(qǐng)?zhí)崆案嬖V我們：您樣本的種屬,、樣本數(shù)量、待測(cè)指標(biāo)及其它特殊要求,。
4,、我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要,，比如在檢測(cè)范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,，而量身定制檢測(cè)試劑盒,，有效控制檢測(cè)試劑成本。并可提供免費(fèi)代測(cè),。