LH,牛促黃體激素elisa試劑盒技術(shù)指導

l 本試劑盒用于體外定量檢測血清,、血漿,、組織、細胞上清及相關(guān)液體樣本中牛雌激素（E）的含量,。

l 有效期：6個月

l 保存條件：2-8℃

l 本試劑盒僅供體外研究使用,，不用于臨床診斷

實驗原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預(yù)先包被牛雌激素（E）捕獲抗體的包被微孔中,，依次加入標本,、標準品、HRP標記的檢測抗體,，經(jīng)過溫育并*洗滌,。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的牛雌激素（E）呈正相關(guān),。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度,。

主要優(yōu)點
1.高效,、靈敏、特異的抗體,；
2. 穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性,；
3. 吸附性能好，空白值低,，孔底透明度高的固相載體,；
4. 適用血清、血漿,、組織勻漿液,、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型,；
5. zui大限度的節(jié)省實驗經(jīng)費,。

ELISA試劑盒樣本要求:
1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行,，提取后應(yīng)盡快進行實驗,。若不能
馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2．不能檢測含 NaN3 的樣品,，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

LH,牛促黃體激素elisa試劑盒技術(shù)指導操作步驟
1.編號：將樣品對應(yīng)微孔按序編號,，每板應(yīng)設(shè)陰性對照 2 孔,、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑,，其余各步操作相同）
2.加樣：分別在陰,、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl,。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液 40μl,，然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動混勻，
3.溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘,。
4.配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.洗滌：小心揭掉封板膜,，棄去液體，甩干,，每孔加滿洗滌液,，靜置 30 秒后棄去,，如此重復(fù) 5 次，拍干,。
6.加酶：每孔加入酶標試劑 50μl,，空白孔除外。
7.溫育：操作同 3,。
8.洗滌：操作同 5,。
9.顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl，再加入顯色劑 B50μl,，輕輕震蕩混勻,，37℃避光顯色15 分鐘.
10.終止：每孔加終止液 50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）,。
11.測定：以空白空調(diào)零,，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。 測定應(yīng)在加終止液后 15 分鐘以內(nèi)進行,。
注意事項
1．操作嚴格按照說明書進行,，本試劑不同批號組分不得混用。
2．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,，酶標包被板開封后如未用完,，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
3濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,，稀釋時可在水浴中加溫助溶,，洗滌時不影響結(jié)果。

4．封板膜只限一次性使用,，以避免交叉污染,。

5．底物請避光保存。
6．試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準,，使用雙波長檢測時,，參考波長為 630nm
7．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理,。終止液為 2M 的硫酸,，使用時必須注意安全。
性能：
1.靈敏度：zui小的檢測濃度小于1號標準品,。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990,。
2. 特異性：不與其它細胞因子反應(yīng),。
3. 重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%,。

客戶須知
1,、液體類標本（細胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿、血清,、血漿,、尿液、胸水,、腹水,、腦脊液等）；
2,、樣本保存：請盡早檢測,，2-8℃保存一天；需更長時間須冷凍（-20℃或-70℃）保存,。如需周期收集樣本,，請將樣本及時分裝標號后，置-20℃或-70℃保存,；
3,、請?zhí)崆案嬖V我們：您樣本的種屬、樣本數(shù)量,、待測指標及其它特殊要求,。
4、我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要,，比如在檢測范圍,、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求，而量身定制檢測試劑盒,，有效控制檢測試劑成本,。并可提供免費代測。