詳細介紹
E,牛雌激素ELISA試劑盒
l 本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿,、組織,、細胞上清及相關液體樣本中牛雌激素(E)的含量。
l 有效期:6個月
l 保存條件:2-8℃
l 本試劑盒僅供體外研究使用,,不用于臨床診斷
牛雌激素ELISA試劑盒實驗原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA),。往預先包被牛雌激素(E)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本,、標準品,、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并*洗滌,。用底物TMB顯色,,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的牛雌激素(E)呈正相關,。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),,計算樣品濃度。
優(yōu)點
1.高效,、靈敏,、特異的抗體;
2. 穩(wěn)定的重復性和可靠性,;
3. 吸附性能好,,空白值低,孔底透明度高的固相載體,;
4. 適用血清,、血漿、組織勻漿液,、細胞培養(yǎng)上清液,、尿液等等多種標本類型;
5. zui大限度的節(jié)省實驗經費,。
樣本要求:
1.標本采集后盡早進行提取,,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗,。若不能
馬上進行試驗,,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性,。
E,操作步驟
1.編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照 2 孔,、陽性對照 2 孔,、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰,、陽性對照孔中加入陰性對照,、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液 40μl,,然后再加待測樣品 10μl,。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動混勻,,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,,棄去液體,,甩干,每孔加滿洗滌液,,靜置 30 秒后棄去,,如此重復 5 次,拍干,。
6.加酶:每孔加入酶標試劑 50μl,,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3,。
8.洗滌:操作同 5,。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,,輕輕震蕩混勻,,37℃避光顯色15 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色),。
11.測定:以空白空調零,,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止液后 15 分鐘以內進行,。
注意事項
1.操作嚴格按照說明書進行,,本試劑不同批號組分不得混用。
2.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,,酶標包被板開封后如未用完,,板條應裝入密封袋中保存。
3濃洗滌液可能會有結晶析出,,稀釋時可在水浴中加溫助溶,,洗滌時不影響結果。
4.封板膜只限一次性使用,,以避免交叉污染,。
5.底物請避光保存,。
6.試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準,,使用雙波長檢測時,參考波長為 630nm
7.所有樣品,,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理,。終止液為 2M 的硫酸,使用時必須注意安全,。
E,牛雌激素elisa試劑盒哪家好性能:
1.靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品,。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990,。
2. 特異性:不與其它細胞因子反應,。
3. 重復性:板內、板間變異系數(shù)均小于10%,。
客戶須知
1,、液體類標本(細胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿、血清,、血漿,、尿液、胸水,、腹水,、腦脊液等);
2,、樣本保存:請盡早檢測,2-8℃保存一天,;需更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存。如需周期收集樣本,,請將樣本及時分裝標號后,置-20℃或-70℃保存,;
3、請?zhí)崆案嬖V我們:您樣本的種屬,、樣本數(shù)量、待測指標及其它特殊要求,。
4,、我們可以根據(jù)您的應用需要,比如在檢測范圍,、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本,。并可提供免費代測,。