小鼠尿酸（UA）酶聯(lián)免疫試劑盒實驗原理：

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中小鼠尿酸（UA）水平。用純化的小鼠尿酸（UA）抗體包被微孔板,，制成固相抗體,，往包被單抗的微孔中依次加入尿酸（UA），再與 HRP 標(biāo)記的尿酸（UA）抗體結(jié)合,，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,，經(jīng)過*洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的尿酸（UA）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在 450nm 波長下測定吸光度（OD 值）,，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中小鼠尿酸（UA）濃度,。

小鼠尿酸（UA）酶聯(lián)免疫試劑盒?操作步驟：

• 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋,。

• 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔,。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣 50µl,，待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl，然后再加待測樣品 10µl（樣品zui終稀釋度為 5 倍）,。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻,。
• 溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘,。
• 配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
• 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體,，甩干,，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去,，如此重復(fù) 5 次,，拍干。
• 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl,，空白孔除外,。
• 溫育：操作同 3。
• 洗滌：操作同 5,。
• 顯色：每孔先加入顯色劑 A50µl,，再加入顯色劑 B50µl，輕輕震蕩混勻,，37℃避光顯色10 分鐘.
• 終止：每孔加終止液 50µl,，終止反應(yīng)（此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
• 測定：以空白空調(diào)零,，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）,。 測定應(yīng)在加終止液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
• ?注意事項：

• 1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,，酶標(biāo)包被板開封后如未用完,，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

• ?2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,，稀釋時可在水浴中加溫助溶,，洗滌時不影響結(jié)果。

• 3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器,，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在 5 分鐘內(nèi),，如標(biāo)本數(shù)量多,，推薦使用排槍加樣,。

• 4． 請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔,。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本 OD 值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的 OD 值）,，請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n 倍）后再測定，計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）,。

• 5． 封板膜只限一次性使用,，以避免交叉污染。

• 6．底物請避光保存,。

• 7．嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,，試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

• 8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理,。

• 9．本試劑不同批號組分不得混用,。

  保存條件及有效期

  1．試劑盒保存：,；2-8℃,。

  2．有效期：6 個月