l 本試劑盒用于體外定量檢測血清,、血漿、組織,、細胞上清及相關液體樣本中雞熱休克蛋白60（HSP-60）的含量,。

l 有效期：6個月

l 保存條件：2-8℃

l 本試劑盒僅供體外研究使用，不用于臨床診斷

實驗原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）,。往預先包被雞熱休克蛋白60（HSP-60）捕獲抗體的包被微孔中,，依次加入標本、標準品,、HRP標記的檢測抗體,，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的雞熱休克蛋白60（HSP-60）呈正相關,。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值）,，計算樣品濃度。

HSP-60,BIM雞熱休克蛋白60elisa試劑盒廠家保存條件及有效期

1．試劑盒保存：2-8℃,。

2．有效期：6個月

運輸條件：低溫運輸,，用干冰或者冰袋低溫運輸。

HSP-60,BIM雞熱休克蛋白60elisa試劑盒廠家樣品采集：

收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定,。對收集后當天進行檢測的標本,，儲存在4℃?zhèn)溆茫缬刑厥庠蛐枰芷谑占瘶吮?，將標本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存,。避免反復凍融。標本2-8℃可保存48小時,，-20℃可保存1個月,。-70度可保存6個月,。部分激素類標本需添加抑肽酶。

操作步驟

ELISA試驗時,，注意事項如下：

　　1.正式試驗時,，應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件，待檢樣品應作一式二份,，以保證實驗結果的準確性,。有時本底較高，說明有非特異性反應,，可采用羊血清,、兔血清或BSA等封閉。

　　2.在ELISA中,，進行各項實驗條件的選擇是很重要的,，其中包括:

　　(1)固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯,、聚苯乙烯,、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板,、試管,、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板,。不管何種載體,，在使用前均可進行篩選：用等量抗原包被，在同一實驗條件下進行反應,，觀察其顯色反應是否均一性,，據(jù)此判明其吸附性能是否良好。

　　(2)包被抗體(或抗原)的選擇：將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,，要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0～9.6之間,。吸附溫度，時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18～24小時,。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進行滴定：即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1,、1.0和10μg／ml等)進行包被后，在其它試驗條件相同時,，觀察陽性標本的OD值。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度,。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1～10μg／ml,。

　　(3)酶標記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物,、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準確地滴定其工作濃度,。

　　(4)酶的底物及供氫體的選擇：對供氫體的選擇要求是價廉,、安全、有明顯地顯色反應,，而本身無色,。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用，應注意防護,。有條件者應使用不致癌,、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體,。底物作用一段時間后,，應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時間,，以10-30分鐘為宜,。底物使用液必須新鮮配制，尤其是H2O2在臨用前加入,。