l 本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿,、組織,、細胞上清及相關液體樣本中雞紅細胞素（EPO）的含量。

l 有效期：6個月

l 保存條件：2-8℃

l 本試劑盒僅供體外研究使用,，不用于臨床診斷

實驗原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）,。往預先包被雞紅細胞素（EPO）捕獲抗體的包被微孔中,，依次加入標本,、標準品,、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并*洗滌,。用底物TMB顯色,，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的雞紅細胞素（EPO）呈正相關,。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度,。

二,、EPO,雞紅細胞素elisa試劑盒哪家好的四大特性

1．特異性強：不與其它細胞因子反應。

2．重復性好：板內,、板間變異系數(shù)均小于10%,。

3．穩(wěn)定性高：實驗效果很穩(wěn)定。

4．超靈敏度：zui小的檢測濃度小于1號標準品,，稀釋度和樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990,。

三、EPO,雞紅細胞素elisa試劑盒哪家好具體操作方法

以雙抗體夾心法為例展示：

1,、雙抗體夾心法檢測抗原         

操作步驟如下：

1）將特異性抗體與固相載體結合,，形成固相抗體。洗滌除去尚未結

合的抗體及一些雜質,。

2）加入待測標本,，保溫反應。標本中的抗原與固相抗體結合,，形成固相抗原抗體復合物,。洗滌除去其他未結合物質。

3）加酶標抗體,，保溫反應,。固相免疫復合物上的抗原與酶標抗體結合。*洗滌未結合的酶標抗體,。此時固相載體上帶有的酶量與標本中受檢抗原的量相關,。

4）加底物顯色。固相上的酶催化底物成為有色產物,。通過比色,，測知標本中抗原的量。在臨床檢驗中,，此法適用于檢驗各種蛋白質等大分子抗原,，例如 HBeAg、HBsAg,、hCG ,、AFP等,。只要獲得針對受檢抗原的特異性抗體，就可用于包被固相載體和制備酶結合物而建立此法,。如抗體的來源為抗血清,，包被和酶標所使用的抗體分別取自不同種屬的動物。如應用單克隆抗體,，一般選擇兩個針對抗原上不同決定簇的單抗,，分別用于包被固相載體和制備酶結合物。這種雙位點夾心法具有很高的特異性,，而且可以將受檢標本和酶標抗體一起保溫反應,，作一步檢測。

在一步法測定中,，當標本中受檢抗原的含量很高時,，過量抗原分別和固相抗體及酶標抗體結合，而不再形成"夾心復合物",。類同于沉淀反應中抗原過剩的后帶現(xiàn)象,，此時反應后顯色的吸光值（位于抗原過剩帶上）與標準曲線（位于抗體過剩帶上）某一抗原濃度的吸光值相同，如按常法測讀,，所得結果將低于實際的含量,，這種現(xiàn)象被為鉤狀效應（hook effect），因為標準曲線到達高峰后呈鉤狀彎落,。鉤狀效應嚴重時,，反應甚至可不顯色而出現(xiàn)假陰性結果。因此在使用一步法試劑測定標本中含量可異常增高的物質（例如血清中 HBsAg,、AFP 和尿液 hCG 等）時,，應注意可測范圍的zui高值。用高親和力的單克隆抗體制備此類試劑可削弱鉤狀效應,。

四,、客戶收集樣品要求

  ·客戶需提供待檢測抗體和包被用抗原。

  ·檢測的樣本為細胞培養(yǎng)上清,、人和動物的血清,、血漿。

  ·樣本收集后應立即-20℃保存,，若長期保存應-70℃,。

  ·樣本量的要求：若一個指標做復孔檢測應不少于250ul，做單孔檢測應不少于120ul,。建議若客戶樣本量充足提供500ul以上,。

   ·客戶的樣本收集后，立即按要求保存，切忌反復凍融,。外地客戶郵寄需要用干冰運輸,。郵寄前請與溝通確認。

五,、Elisa試劑盒組成

1 30 倍濃縮洗滌液 20ml×1 瓶 7 終止液 6ml×1 瓶

2 酶標試劑 6ml×1 瓶 8 標準品（480ng/L） 0.5ml×1 瓶

3 酶標包被板 12 孔×8 條 9 標準品稀釋液 1.5ml×1 瓶

4 樣品稀釋液 6ml×1 瓶 10 說明書 1 份

5 顯色劑A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 張

6 顯色劑B 液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 個

六、Elisa試劑盒標本要求

1．標本采集后盡早進行提取,，提取按相關文獻進行,，提取后應盡快進行實驗。若不能

馬上進行試驗,，可將標本放于-20℃保存,，但應避免反復凍融

2．不能檢測含NaN3 的樣品，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性,。

七,、操作步驟

1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋,。

240ng/L 5 號標準品 150μl 的原倍標準品加入150μl 標準品稀釋液

120ng/L 4 號標準品 150μl 的5 號標準品加入150μl 標準品稀釋液

60ng/L 3 號標準品 150μl 的4 號標準品加入150μl 標準品稀釋液

30ng/L 2 號標準品 150μl 的3 號標準品加入150μl 標準品稀釋液

15ng/L 1 號標準品 150μl 的2 號標準品加入150μl 標準品稀釋液

2. 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑,，其余各步操作相同）、標準孔,、待測樣品孔,。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5 倍）,。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動混勻,。

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。

4. 配液：將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 倍稀釋后備用

5. 洗滌：小心揭掉封板膜,，棄去液體,，甩干，每孔加滿洗滌液,，靜置30 秒后棄去,，如此重復5 次，拍干,。

6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl,，空白孔除外。

7. 溫育：操作同3,。

8. 洗滌：操作同5,。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻,，37℃避光顯色15 分鐘.

10. 終止：每孔加終止液50μl,，終止反應（此時藍色立轉黃色）。

11. 測定：以空白空調零,，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）,。 測定應在加終止液后15 分鐘以內進行。

八,、咨詢和訂購的方法

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