詳細介紹
l 本試劑盒用于體外定量檢測血清,、血漿、組織,、細胞上清及相關(guān)液體樣本中雞雌激素(E)的含量,。
l 有效期:6個月
l 保存條件:2-8℃
l 本試劑盒僅供體外研究使用,不用于臨床診斷
實驗原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA),。往預(yù)先包被雞雌激素(E)捕獲抗體的包被微孔中,,依次加入標本、標準品,、HRP標記的檢測抗體,,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的雞雌激素(E)呈正相關(guān),。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),,計算樣品濃度。
E,原裝雞雌激素elisa試劑盒技術(shù)指導(dǎo)操作步驟:
大部分ELISA 檢測均以血清為標本,。血清標本可按常規(guī)方法采集,,應(yīng)注意避免溶血,紅細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì),,以HRP 為標記的ELISA 測定中,,溶血標本可能會增加非特異性顯色。血清標本宜在新鮮時檢測如有細菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,,也會產(chǎn)生假陽性反應(yīng),。一般說來,在5 天內(nèi)測定的血清標本可放置于4℃,,標本在冰箱中保存時間過長導(dǎo)致血清IgG 聚合,使間接法的試劑本底加深,。超過一周測定的需-20℃保存,。凍結(jié)血清融解后,蛋白質(zhì)局部濃縮,,分布不均,,應(yīng)充分混勻并避免產(chǎn)生氣泡?;鞚峄蛴谐恋淼难鍢吮緫?yīng)先離心或過濾,,澄清后再檢測。反復(fù)凍融會使抗體效價跌落,,所以測抗體的血清標本如需保存作多次檢測,,宜少量分裝冰存。保存血清自采集時就應(yīng)注意無菌操作,,也可加入適當防腐劑,。
抗凝不*的標本因纖維蛋白原的干擾而造成假陽性,建議盡量不用抗凝血尤其是肝素抗凝劑,。
1.血清標本如是以無菌操作分離,,則可以在2~8℃下保存一周,如為有菌操作,,則建議冰凍保存,。樣本的長時間保存,應(yīng)在-70℃以下,。
2.在使用微量加樣器時,,吸取不同瓶子中液體后要更換槍頭,即使吸取標準品溶液,。
3.吸取液體時速度不易太快,,以免產(chǎn)生氣泡,吸取的量不夠準確,。
4.樣本的采集及血清分離中要注意盡量避免細菌污染,,一則細菌的生長,其所分泌的一些酶可能會對抗原抗體等蛋白產(chǎn)生分解作用,;二則一些細菌的內(nèi)源性酶,,如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會對用相應(yīng)酶作標記的測定方法產(chǎn)生非特異性干擾。1.5 吸取液體時要選用量程和需要量接近的微量加樣器吸,減少誤差,。
5.液體全部加入酶標孔后,,將酶標板放在桌子上平行輕輕搖晃30s,使液體充分混合均勻,,也使其得到充分的反應(yīng),。
6.孵育時要使蓋板膜封好酶標板,防止水分蒸發(fā),,以防曲線不成線性,。
7.實驗前30min將試劑盒中的所有試劑從冰箱取出,使試劑盒中的所有試劑與提取好的樣品溶液的溫度相同,,酶標板只要取出所需量,。
8.由于底物顯色劑對光及其敏感,因此要避光保存,。
要注意避免出現(xiàn)嚴重溶血,。血紅蛋白中含有血紅素基團,其有類似過氧化物的活性,,因此,,在以HRP為標記酶的ELISA測定中,如血清標本中血紅蛋白濃度較高,,則其就很容易在溫育過程中吸附于固相,,從而與后面加入的HRP底物反應(yīng)顯色
9.手工洗板時每次加入洗滌液后。應(yīng)靜置15~30s,,不要將一個酶標孑L中的洗滌液濺入另一酶標孔中,,防止交叉污染。甩去洗滌液后將酶標板放在毛巾或吸水紙上拍干,。
10.檢測吸光度前應(yīng)將酶標儀打開,,將其預(yù)熱30min以上。
11.底物為TMB,,避免與皮膚相接觸,。終止液為2tool的濃硫酸具有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸皮膚,。
12.孵育的時間應(yīng)該嚴格按照試劑盒說明書上的時間為準,。
13.要盡量做雙孔實驗,這樣才既能保證數(shù)據(jù)的準確性,,又能反映出試劑盒的精密度,。
14.冰凍保存的血清標本須注意避免因停電等造成的反復(fù)凍融。標本的反復(fù)凍融所產(chǎn)生的機械剪切力將對標本中的蛋白等分子產(chǎn)生破壞作用,,從而引起假陰性結(jié)果,。此外,,凍融標本的混勻亦應(yīng)注意,不要進行劇烈振蕩,,反復(fù)顛倒混勻即可,。
15.對樣本的結(jié)果有疑問時需要使用其他檢測方法進行驗證。
16.沒有去離子水或雙蒸水時,,可以使用娃哈哈純凈水配制溶液,,切勿使用自來水。
17.標本在保存中如出現(xiàn)細菌污染所致的混濁或絮狀物時,,應(yīng)離心沉淀后取上清檢測,。
E,原裝雞雌激素elisa試劑盒技術(shù)指導(dǎo)代測相關(guān)信息
一、代測范圍
1,、本公司公布的試劑盒,可以提供代測服務(wù),。
2,、本公司上尚未列出的試劑盒,可以代為研發(fā)和測定,,費用等相關(guān)信息咨詢,。
二、公司責任
1,、對于客戶提供的樣品和要測定的指標,,及時提供規(guī)范的檢測報告,確保數(shù)據(jù)真實可靠,。未經(jīng)客戶允許,,不得相關(guān)信息透露給第三方。
2,、對于公司上列出的試劑盒測定指標,,我們將在收到樣品之日起13個工作日內(nèi)提供規(guī)范的檢測報告;反之,,提供檢測報告的時間由雙方協(xié)商決定,。
3、本公司的檢測報告僅對收到的樣品負責,。為了確保測定結(jié)果有效,,請客戶在送檢前與本公司客服人員溝通,并且按照要求做好樣品的數(shù)量,、標簽和寄送等相關(guān)事宜,。
4、客戶如果對測定結(jié)果不滿意,,務(wù)必在收到檢測報告之日起起5個工作日內(nèi)與本公司客服人員,,商定解決辦法。
5、在收到客戶檢測費起5個工作日內(nèi)快遞寄送加蓋公章的紙質(zhì)檢測報告和發(fā)票,。
三,、客戶責任
1、提供樣品的性質(zhì)(物種和組織等)和處理狀況(有無特殊的化學處理等),,確保樣品數(shù)量和標簽無誤,,以符合要求的方式進行包裝和寄送(注意加足夠的冰袋冷藏,特別嬌貴的樣品請用干冰),。
2,、及時付款。一般在寄送樣品時付費用的70%,,收到電子版檢測報告,,確認無誤后付剩下的30%。如有特殊情況需雙方協(xié)商決定,。
3,、以上單個樣品測定價格包括預(yù)測費用、試劑費用,、人工費用和數(shù)據(jù)處理費用以及蛋白質(zhì)含量測定費用,。由于統(tǒng)計處理需要,一般處理每個樣品應(yīng)該至少測定三次(強烈建議),。如果樣品中已經(jīng)包括三次或三次以上重復(fù),,或者用戶不需要重復(fù)測定,請用戶聲明,。如果測定樣品數(shù)量很多,,可以在測定的總費用上進行適當?shù)臏p免。 四,、代測的優(yōu)勢
1,、將要測定的樣品都是有研發(fā)該試劑盒的專家全權(quán)負責的,因此可以確保測定結(jié)果的準確性,。
2,、節(jié)省客戶的寶貴時間和精力。
3,、交給我們代測,,您可以不必為操作經(jīng)驗的不成熟和儀器的缺乏而苦惱。
五,、附加免費服務(wù)
1,、根據(jù)客戶研究目的,免費提供專業(yè)的檢測意見和建議,。
2,、免費提供樣品蛋白質(zhì)含量測定,。
3、免費提供測定結(jié)果分析,,包括顯著性差異,、指標變化的生理生化意義和相關(guān)指標變化之間的關(guān)系等。
為何選擇本公司,?
我司是一家專業(yè)從事“產(chǎn)品研發(fā)生產(chǎn),、市場銷售、技術(shù)服務(wù)”為一體的生物技術(shù)公司,,公司生產(chǎn)的產(chǎn)品質(zhì)量有保證,,含量高,能夠給實驗帶來準確的結(jié)果,。同時試劑隨貨附帶質(zhì)檢報告和圖譜,,能為用戶更好的解決各種疑難問題。如有需要可我司銷售人員,,我們將竭誠為您服務(wù),。