詳細介紹
l 本試劑盒用于體外定量檢測血清,、血漿,、組織、細胞上清及相關(guān)液體樣本中雞白細胞介素1β(IL-1β)的含量,。
l 有效期:6個月
l 保存條件:2-8℃
l 本試劑盒僅供體外研究使用,,不用于臨床診斷
實驗原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被雞白細胞介素1β(IL-1β)捕獲抗體的包被微孔中,,依次加入標本、標準品,、HRP標記的檢測抗體,,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的雞白細胞介素1β(IL-1β)呈正相關(guān),。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),,計算樣品濃度。
IL-1β,BIM雞白細胞介素1βelisa試劑盒原理主要優(yōu)點
1.高效,、靈敏,、特異的抗體;
2. 穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;
3. 吸附性能好,,空白值低,,孔底透明度高的固相載體;
4. 適用血清,、血漿,、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液,、尿液等等多種標本類型,;
5. zui大限度的節(jié)省實驗經(jīng)費。
IL-1β,BIM雞白細胞介素1βelisa試劑盒原理樣本要求:
1.標本采集后盡早進行提取,,提取按相關(guān)文獻進行,,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能
馬上進行試驗,,可將標本放于-20℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性,。
IL-1β,BIM雞白細胞介素1βelisa試劑盒原理操作步驟
1.編號:將樣品對應(yīng)微孔按序編號,,每板應(yīng)設(shè)陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔,、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照,、陽性對照 50µl,。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液 40µl,然后再加待測樣品 10µl,。加樣將樣品加于酶標板孔底部,,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘,。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,,甩干,,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,,如此重復(fù) 5 次,,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑 50µl,,空白孔除外,。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,,再加入顯色劑 B50µl,,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50µl,,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色),。
11.測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值),。 測定應(yīng)在加終止液后 15 分鐘以內(nèi)進行,。
注意事項
1.操作嚴格按照說明書進行,本試劑不同批號組分不得混用,。
2.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存,。
3.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果,。
4. 封板膜只限一次性使用,,以避免交叉污染。
5.底物請避光保存,。
6.試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準,,使用雙波長檢測時,參考波長為 630nm
7.所有樣品,,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理,。終止液為 2M 的硫酸,使用時必須注意安全,。