【產(chǎn)品名稱】：人纖連蛋白(FN)酶聯(lián)免疫試劑盒

【產(chǎn)品用途】：被測(cè)樣品定性定量分析

【產(chǎn)品規(guī)格】：96T/48T(兩種規(guī)格)

【檢測(cè)方法】：酶免法/酶聯(lián)免疫法(ELISA)

【供 貨 期】：1-3天(現(xiàn)貨供應(yīng))

【產(chǎn)品性狀】：液體盒裝

【產(chǎn)品價(jià)格】：（ELISA試劑盒含稅含運(yùn)費(fèi)，我們?nèi)烫峁〦LISA實(shí)驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)和ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè))

【銷售優(yōu)勢(shì)】：價(jià)格行業(yè)優(yōu)勢(shì),、質(zhì)量可靠,、如果出現(xiàn)客觀質(zhì)量問(wèn)題包換退

【待檢樣本】：體液、血清,、血漿,、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液,、組織勻漿,、心房水標(biāo)本等

一．實(shí)驗(yàn)原理

ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,，又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí),，受檢標(biāo)本（測(cè)定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng),。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開(kāi)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,，也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上,。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),，故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。
二．試劑盒說(shuō)明
1. 在儲(chǔ)存及孵育過(guò)程中避免將試劑暴露在強(qiáng)光中,。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染,，試劑避免受到微生物的污染，因?yàn)榈鞍姿饷傅母蓴_將導(dǎo)致出現(xiàn)錯(cuò)誤的結(jié)果,。
2. 小心吸取試劑并嚴(yán)格遵守給定的孵育時(shí)間和溫度,。請(qǐng)注意在吸取標(biāo)本 / 標(biāo)準(zhǔn)品，酶結(jié)合物或底物時(shí),，*個(gè)孔與zui后一個(gè)孔加樣之間的時(shí)間間隔如果太大,，將會(huì)導(dǎo)致不同的 “預(yù)孵育”時(shí)間，從而明顯地影響到測(cè)量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性,。而且,，洗滌不充分將影響試驗(yàn)結(jié)果。
3. 試劑盒保存：部分試劑保存于-20℃,，部分試劑保存于2-8℃,，具體以標(biāo)簽上的標(biāo)示為準(zhǔn)。
4. 濃洗滌液會(huì)有鹽析出,，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,。
5. 剛開(kāi)啟的酶聯(lián)板孔中可能會(huì)含有少許水樣物質(zhì)，此為正?，F(xiàn)象,，不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響。
6. 中,、英文說(shuō)明書可能會(huì)有不*之處,，請(qǐng)以英文說(shuō)明書為準(zhǔn)。
7. 所有的樣品都應(yīng)管理好,，按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測(cè)裝置,。
8. 有效期：6個(gè)月
三．人纖連蛋白(FN)酶聯(lián)免疫試劑盒樣品收集、處理及保存
1）.細(xì)胞培養(yǎng)上清：
適用于檢測(cè)體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份,。用無(wú)菌管收集細(xì)胞上清液,，以1000×g離心15分鐘，收集上清,。
2）細(xì)胞：
用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次,，調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104-106/ml 左右，通過(guò)反復(fù)凍融,，使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,，或者細(xì)胞超聲粉碎，離心取上清液檢測(cè),。
3）血清：
在室溫下,，血液自然凝固,，以1000×g離心15分鐘，取上清待測(cè),。
4）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,，混合后靜置10-20 分鐘后，以1000×g離心15分鐘,，收集上清,。
5）體液：
包括胸腹水、腦脊液,，分泌物等,。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集，以1000×g離心15分鐘,，收集上清,。
6.）組織標(biāo)本：
切取組織標(biāo)本，稱取重量0.5mg,，加入500ul 的PBS,，用手工或勻漿器，或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,，以2000-3000 rmp離心20 分鐘,，收集上清進(jìn)行檢測(cè)。
樣品中不能含有NaN3,，因NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。
7）保存：
如果樣品不能立即檢測(cè),，應(yīng)將其分裝,，-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍,。保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,，應(yīng)再次離心。血液標(biāo)本盡可能的不要使用溶血或高血脂血,。如果血清中含大量顆粒,，檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍,。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
四．操作步驟
1）取出試劑盒，室溫（20-25℃）放置30分鐘,。
2）分組：取出96孔板,，根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)，把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理,。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品組（6個(gè)濃度）,、空白孔,、待測(cè)樣品組。
3）標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：準(zhǔn)備小試管6 只,，依次編好號(hào)碼,，先在各小試管中加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液100ul，然后取原濃度標(biāo)準(zhǔn)品100ul加入一只已編好號(hào)的試管中,，充分混勻;再在該試管中取100ul 加入第二支試管中,，充分混勻；再在該試管中取100ul加入第三只試管中,，充分混勻,；再在該試管中取100ul 加入第四只試管中，充分混勻,；再在該試管中取100ul加入第五只試管中,，充分混勻；然后在該試管中取100ul,，棄掉,。第六只試管作為0 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。
注：為減少實(shí)驗(yàn)誤差,，保證準(zhǔn)確性,，建議設(shè)置復(fù)孔。
4）加樣：依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入50ul的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中,；空白對(duì)照孔加入50ul的蒸餾水,；其余微孔中先加樣品40ul然后再加生物素標(biāo)記的抗體10ul。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動(dòng)混勻。
5）溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘,。
6）洗滌：小心揭掉封板膜,，棄去液體，甩干,，每孔加滿洗滌液,，靜置30 秒棄去，如此重復(fù)5 次,，拍干,。
7）加酶標(biāo)溶液：標(biāo)準(zhǔn)品組、待測(cè)樣本組各孔中加入50ul的酶標(biāo)溶液（空白對(duì)照孔除外）,。
8）溫育：酶標(biāo)板用封板紙密封后,，放入濕盒內(nèi)于37℃恒溫孵育1小時(shí)。
9）洗板：用稀釋后的洗滌液注滿每孔，靜置15-30s,，充分清洗酶標(biāo)板5次,，用吸水紙*拍干。
10）顯色：各孔加入顯色劑A液50ul后,，再加入顯色劑B液50ul,。
11）終止：25-37℃下避光反應(yīng)10-15分鐘，加入50ul終止液,。
12）讀板：在450nm波長(zhǎng)讀取各孔的OD值,。
注：讀板時(shí)必須拭干板底殘留的液體和手指痕跡，讀板時(shí)間控制在終止反應(yīng)后的30分鐘內(nèi),，以免影響準(zhǔn)確性,。
五．優(yōu)點(diǎn)體現(xiàn)
·特異性高：進(jìn)行了廣泛的非特異性排查，避免了由于交叉反應(yīng)和干擾導(dǎo)致的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)誤差,。 
·精 度 高：通過(guò)加標(biāo)回收率和線性稀釋實(shí)驗(yàn),，確保樣本值的準(zhǔn)確性，精確度高于同類產(chǎn)品（較低的CV%）,。 
·重復(fù)性好：lot-to-lot檢測(cè)確保zui小的批間差異,。 
·可靠性強(qiáng)：經(jīng)優(yōu)化的試劑盒組分可有效的zuzhi假陽(yáng)性和假陰性試驗(yàn)結(jié)果。 
·標(biāo)準(zhǔn)曲線：在保證精準(zhǔn)數(shù)據(jù)的前提下提供較寬的檢測(cè)范圍,，以滿足需求,。 
·價(jià)格低廉：*RD試劑，國(guó)內(nèi)分裝配置,，大大減少了客戶因?yàn)閮r(jià)格高而必須購(gòu)買國(guó)產(chǎn)試劑盒的顧慮,。 

六．注意事項(xiàng)
1）實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭，避免交叉污染,。
2）加樣：加樣時(shí),，要控制加樣速度，避免*孔與zui后一孔間的時(shí)間間隔過(guò)大,，否則將會(huì)導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時(shí)間，從而影響實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性,。
3）孵育：嚴(yán)格按照說(shuō)明書上規(guī)定的孵育時(shí)間和溫度進(jìn)行,。
反應(yīng)時(shí)間的控制：加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化，如果顏色較深,，請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng),。
4）建議實(shí)驗(yàn)前預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過(guò)高,，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,，計(jì)算結(jié)果時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
5）建議使用本試劑盒時(shí)先做預(yù)實(shí)驗(yàn)（即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線，試用幾個(gè)標(biāo)本）,，如果對(duì)本試劑盒有任何疑問(wèn),，可和所購(gòu)經(jīng)銷商，如果因運(yùn)輸過(guò)程導(dǎo)致試劑盒失效,，可要求調(diào)換,，但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。
七．人纖連蛋白(FN)酶聯(lián)免疫試劑盒保存條件及有效期
1.試劑盒保存：2-8℃
2.有效期：6個(gè)月
八．訂貨說(shuō)明
1）賣方確保所訂產(chǎn)品與目錄技術(shù)指標(biāo)保持*,；
2）為了確保買方產(chǎn)品在運(yùn)輸中的質(zhì)量,，對(duì)有特殊要求的低溫產(chǎn)品予以濕冰運(yùn)輸。
3）收到貨物后如出現(xiàn)質(zhì)量問(wèn)題,，買方需在收到貨物一個(gè)月內(nèi)向賣方提出書面異議,。買方逾期不提出異議，視為貨物符合其要求,，賣方不付任何責(zé)任,。
4）出現(xiàn)質(zhì)量以外的問(wèn)題，如破損等,，買方應(yīng)在收貨后一個(gè)周內(nèi)提出,。買方未按時(shí)提出異議，視為該產(chǎn)品合格,。
本公司對(duì)所有售出的產(chǎn)品保證質(zhì)量,，并提供良好的售后服務(wù)，有關(guān)產(chǎn)品質(zhì)量的投訴,，請(qǐng)?jiān)谑盏截浳锏?2天內(nèi)以書面形式提出,，并向我公司技術(shù)人員提供相應(yīng)的材料，我們會(huì)及時(shí)派人解決,。所有形式的賠償或退換僅限于產(chǎn)品本身,，不涉及其他間接內(nèi)容。凡購(gòu)買本公司任意款elisa試劑盒,，均可享受免費(fèi)代測(cè)服務(wù),，并提供技術(shù)指導(dǎo)。