詳細介紹
【產(chǎn)品名稱】:EPI,小鼠腎上腺素ELISA試劑盒
【產(chǎn)品用途】:被測樣品定性定量分析
【產(chǎn)品規(guī)格】:96T/48T(兩種規(guī)格)
【檢測方法】:酶免法/酶聯(lián)免疫法(ELISA)
【供 貨 期】:1-3天(現(xiàn)貨供應(yīng))
【產(chǎn)品性狀】:液體盒裝
【產(chǎn)品價格】:(ELISA試劑盒含稅含運費,,我們?nèi)烫峁〦LISA實驗技術(shù)指導(dǎo)和ELISA試劑盒免費代測)
【銷售優(yōu)勢】:價格行業(yè)優(yōu)勢、質(zhì)量可靠,、如果出現(xiàn)客觀質(zhì)量問題包換退
【待檢樣本】:體液,、血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液,、尿液,、組織勻漿、心房水標(biāo)本等
一.實驗原理
ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記,。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性,。在測定時,,受檢標(biāo)本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開,。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例,。加入酶反應(yīng)的底物后,,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),,故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析,。
二.試劑盒說明
1. 在儲存及孵育過程中避免將試劑暴露在強光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染,,試劑避免受到微生物的污染,,因為蛋白水解酶的干擾將導(dǎo)致出現(xiàn)錯誤的結(jié)果。
2. 小心吸取試劑并嚴(yán)格遵守給定的孵育時間和溫度,。請注意在吸取標(biāo)本 / 標(biāo)準(zhǔn)品,,酶結(jié)合物或底物時,*個孔與zui后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大,,將會導(dǎo)致不同的 “預(yù)孵育”時間,,從而明顯地影響到測量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。而且,,洗滌不充分將影響試驗結(jié)果。
3. 試劑盒保存:部分試劑保存于-20℃,,部分試劑保存于2-8℃,,具體以標(biāo)簽上的標(biāo)示為準(zhǔn)。
4. 濃洗滌液會有鹽析出,,稀釋時可在水浴中加溫助溶,。
5. 剛開啟的酶聯(lián)板孔中可能會含有少許水樣物質(zhì),此為正?,F(xiàn)象,,不會對實驗結(jié)果造成任何影響。
6. 中、英文說明書可能會有不*之處,,請以英文說明書為準(zhǔn),。
7. 所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置,。
8. 有效期:6個月
三.“EPI,小鼠腎上腺素ELISA試劑盒”樣品收集,、處理及保存
1).細胞培養(yǎng)上清:
適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液,,以1000×g離心15分鐘,,收集上清。
2)細胞:
用PBS反復(fù)洗滌細胞3次,,調(diào)整細胞濃度達到104-106/ml 左右,,通過反復(fù)凍融,使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份,,或者細胞超聲粉碎,,離心取上清液檢測。
3)血清:
在室溫下,,血液自然凝固,,以1000×g離心15分鐘,取上清待測,。
4)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,,收集上清,。
5)體液:
包括胸腹水、腦脊液,,分泌物等,。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,,收集上清,。
6.)組織標(biāo)本:
切取組織標(biāo)本,稱取重量0.5mg,,加入500ul 的PBS,,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,,收集上清進行檢測。
樣品中不能含有NaN3,,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性,。
7)保存:
如果樣品不能立即檢測,,應(yīng)將其分裝,-70 ℃保存,,避免反復(fù)冷凍,。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心,。血液標(biāo)本盡可能的不要使用溶血或高血脂血,。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾,。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍,。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
四.操作步驟
1)取出試劑盒,,室溫(20-25℃)放置30分鐘,。
2)分組:取出96孔板,根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),,把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理,。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品組(6個濃度)、空白孔,、待測樣品組,。
3)標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:準(zhǔn)備小試管6 只,依次編好號碼,,先在各小試管中加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液100ul,,然后取原濃度標(biāo)準(zhǔn)品100ul加入一只已編好號的試管中,充分混勻;再在該試管中取100ul 加入第二支試管中,,充分混勻,;再在該試管中取100ul加入第三只試管中,充分混勻,;再在該試管中取100ul 加入第四只試管中,,充分混勻;再在該試管中取100ul加入第五只試管中,,充分混勻,;然后在該試管中取100ul,棄掉,。第六只試管作為0 號標(biāo)準(zhǔn)品,。
注:為減少實驗誤差,保證準(zhǔn)確性,,建議設(shè)置復(fù)孔。
4)加樣:依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入50ul的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中,;空白對照孔加入50ul的蒸餾水,;其余微孔中先加樣品40ul然后再加生物素標(biāo)記的抗體10ul。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動混勻,。
5)溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。
6)洗滌:小心揭掉封板膜,,棄去液體,,甩干,每孔加滿洗滌液,,靜置30 秒棄去,,如此重復(fù)5 次,拍干,。
7)加酶標(biāo)溶液:標(biāo)準(zhǔn)品組,、待測樣本組各孔中加入50ul的酶標(biāo)溶液(空白對照孔除外)。
8)溫育:酶標(biāo)板用封板紙密封后,,放入濕盒內(nèi)于37℃恒溫孵育1小時,。
9)洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置15-30s,,充分清洗酶標(biāo)板5次,,用吸水紙*拍干。
10)顯色:各孔加入顯色劑A液50ul后,,再加入顯色劑B液50ul,。
11)終止:25-37℃下避光反應(yīng)10-15分鐘,加入50ul終止液,。
12)讀板:在450nm波長讀取各孔的OD值,。
注:讀板時必須拭干板底殘留的液體和手指痕跡,讀板時間控制在終止反應(yīng)后的30分鐘內(nèi),,以免影響準(zhǔn)確性,。
五.ELISA試劑盒的優(yōu)點體現(xiàn)
·特異性高:進行了廣泛的非特異性排查,避免了由于交叉反應(yīng)和干擾導(dǎo)致的實驗數(shù)據(jù)誤差,。
·精 度 高:通過加標(biāo)回收率和線性稀釋實驗,,確保樣本值的準(zhǔn)確性,精確度高于同類產(chǎn)品(較低的CV%),。
·重復(fù)性好:lot-to-lot檢測確保zui小的批間差異,。
·可靠性強:經(jīng)優(yōu)化的試劑盒組分可有效的zuzhi假陽性和假陰性試驗結(jié)果。
·標(biāo)準(zhǔn)曲線:在保證精準(zhǔn)數(shù)據(jù)的前提下提供較寬的檢測范圍,,以滿足需求,。
·價格低廉:*RD試劑,國內(nèi)分裝配置,,大大減少了客戶因為價格高而必須購買國產(chǎn)試劑盒的顧慮,。
六.注意事項
1)實驗操作中必須使用一次性吸頭,,避免交叉污染。
2)加樣:加樣時,,要控制加樣速度,,避免*孔與zui后一孔間的時間間隔過大,否則將會導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時間,,從而影響實驗的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性,。
3)孵育:嚴(yán)格按照說明書上規(guī)定的孵育時間和溫度進行。
反應(yīng)時間的控制:加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化,,如果顏色較深,,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
4)建議實驗前預(yù)測樣品含量,,如樣品濃度過高,,應(yīng)對樣品進行稀釋,計算結(jié)果時乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù),。
5)建議使用本試劑盒時先做預(yù)實驗(即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線,,試用幾個標(biāo)本),如果對本試劑盒有任何疑問,,可和所購經(jīng)銷商,,如果因運輸過程導(dǎo)致試劑盒失效,可要求調(diào)換,,但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失,。
七.“”保存條件及有效期
1.試劑盒保存:2-8℃
2.有效期:6個月
八.我司勵志打造優(yōu)秀ELISA試劑盒品牌
近年來,一些意識超前的ELISA試劑盒公司紛紛運用品牌戰(zhàn)略利器,,取得了競爭優(yōu)勢并逐漸發(fā)展壯大,,從而確保公司的長遠發(fā)展。在科技高度發(fā)達,、信息快速傳播的今天,,ELISA試劑盒產(chǎn)品、技術(shù)及管理訣竅等容易被對手模仿,,難以成為核心專長,,而品牌一旦樹立,則不但有價值并不可模仿,。
1.品牌是什么 品牌概念介紹 品牌簡單地講是指消費者對產(chǎn)品及產(chǎn)品系列的認(rèn)知程度,,是人們對一個企業(yè)及其產(chǎn)品、售后服務(wù),、文化價值的一種評價和認(rèn)知,,是一種信任。
2.是企業(yè)/商品對接觸人群的綜合標(biāo)示,,是企業(yè)的無形資產(chǎn),。
3.ELISA試劑盒品牌既包含實體,,如企業(yè)名稱、商標(biāo)標(biāo)志等,;也含非實體,如口碑等,。
4.品牌是企業(yè)對消費者的質(zhì)量承諾,,又是消費者對企業(yè)的忠誠度。
5.ELISA試劑盒品牌培育需要投入大量時間精力,。