詳細介紹
一,、Elisa試劑盒概述
ELISA試劑盒在國內(nèi)有許多種叫法:例如:ELISA檢測試劑盒、ELISA Kit,、酶聯(lián)免疫試劑盒,、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒,、酶免試劑盒等,,比較常見的叫法是ELISA檢測試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒等,。 ELISA試劑盒自從60-70年代問世以來,,得到*科研工作者的認可及推崇,在歐美及中國獲得很大的推廣,,尤其是國內(nèi)生化領(lǐng)域的長足發(fā)展,。 Elisa生物試驗是一種敏感性高,特異性強,,重復(fù)性好的實驗診斷方法,。由于其試劑穩(wěn)定,、易保存,操作簡便,,結(jié)果判斷較客觀等因素,,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗的各領(lǐng)域中。
二,、“小鼠第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)ELISA試劑盒”樣品收集,、處理及保存
1)細胞培養(yǎng)上清:
適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液,,以1000×g離心15分鐘,,收集上清。
2)細胞:
用PBS反復(fù)洗滌細胞3次,,調(diào)整細胞濃度達到104-106/ml 左右,,通過反復(fù)凍融,使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份,,或者細胞超聲粉碎,,離心取上清液檢測。
3)血清:
在室溫下,,血液自然凝固,,以1000×g離心15分鐘,取上清待測,。
4)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,,收集上清,。
5)體液:
包括胸腹水、腦脊液,,分泌物等,。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,,收集上清,。
6.)組織標(biāo)本:
切取組織標(biāo)本,稱取重量0.5mg,,加入500ul 的PBS,,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,,收集上清進行檢測。
樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性,。
7)保存:
如果樣品不能立即檢測,,應(yīng)將其分裝,-70 ℃保存,,避免反復(fù)冷凍,。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心,。血液標(biāo)本盡可能的不要使用溶血或高血脂血,。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾,。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
三,、操作步驟
1)取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置30分鐘,。
2)分組:取出96孔板,,根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理,。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品組(6個濃度),、空白孔、待測樣品組,。
3)標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:準(zhǔn)備小試管6 只,,依次編好號碼,先在各小試管中加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液100ul,,然后取原濃度標(biāo)準(zhǔn)品100ul加入一只已編好號的試管中,,充分混勻;再在該試管中取100ul 加入第二支試管中,充分混勻,;再在該試管中取100ul加入第三只試管中,,充分混勻;再在該試管中取100ul 加入第四只試管中,,充分混勻,;再在該試管中取100ul加入第五只試管中,充分混勻,;然后在該試管中取100ul,,棄掉。第六只試管作為0 號標(biāo)準(zhǔn)品,。
注:為減少實驗誤差,,保證準(zhǔn)確性,建議設(shè)置復(fù)孔,。
4)加樣:依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入50ul的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中,;空白對照孔加入50ul的蒸餾水,;其余微孔中先加樣品40ul然后再加生物素標(biāo)記的抗體10ul。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動混勻。
5)溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘,。
6)洗滌:小心揭掉封板膜,,棄去液體,甩干,,每孔加滿洗滌液,,靜置30 秒棄去,如此重復(fù)5 次,,拍干,。
7)加酶標(biāo)溶液:標(biāo)準(zhǔn)品組、待測樣本組各孔中加入50ul的酶標(biāo)溶液(空白對照孔除外),。
8)溫育:酶標(biāo)板用封板紙密封后,,放入濕盒內(nèi)于37℃恒溫孵育1小時。
9)洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,,靜置15-30s,,充分清洗酶標(biāo)板5次,用吸水紙*拍干,。
10)顯色:各孔加入顯色劑A液50ul后,,再加入顯色劑B液50ul。
11)終止:25-37℃下避光反應(yīng)10-15分鐘,,加入50ul終止液,。
12)讀板:在450nm波長讀取各孔的OD值。
注:讀板時必須拭干板底殘留的液體和手指痕跡,,讀板時間控制在終止反應(yīng)后的30分鐘內(nèi),,以免影響準(zhǔn)確性。
四,、Elisa試劑盒特點
1,、高效、靈敏,、特異的抗體,; 二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性,;
2,、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體,;
3,、適用血清、血漿,、組織勻漿液,、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型,;
4,、節(jié)省實驗經(jīng)費。
五,、“小鼠第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)ELISA試劑盒”優(yōu)勢
1.嚴格的質(zhì)控體系:所有試劑盒從原料到成品經(jīng)過嚴格的質(zhì)控,,確保試劑盒質(zhì)量及穩(wěn)定性。
2.產(chǎn)品經(jīng)過不斷優(yōu)化,,具有很好的靈敏度,;
3.綜合指標(biāo)特性,研發(fā)便捷操作的試劑盒,;
4.檢測驗證樣本多樣,;
5.專業(yè)的研發(fā)團隊為客戶提供個性化的定制服務(wù),;
6.提供食品安全藥物殘留ELISA試劑盒,,以及代測服務(wù);
7.多年實踐經(jīng)驗的技術(shù)老師,,保證滬鼎生物ELISA試劑盒完善專業(yè)的售后服務(wù),;
8.高靈敏度、高精密度,,高重現(xiàn)性,,高特異性。不僅有高可靠性的實驗結(jié)果,,更為您節(jié)約實驗成本和時間,。
六、運輸保障
■ 包裝內(nèi)置生物冰袋2-8℃低溫運輸,、保存,!
■ 試劑盒存放與EPS泡沫盒中,三層包裝更加防止擠壓碰傷,!
■ ELISA試劑盒fapiao,、說明書放于自封袋中更防水!
■ 25mm泡沫箱防水耐摔,,快遞暴力分揀也不怕,!
七、“小鼠第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)ELISA試劑盒”客戶評論
1、賣家很耐心的解答,,服務(wù)很好,,產(chǎn)品也不錯,好評,!
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八,、同期優(yōu)勢新品展示
小鼠單核細胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA試劑盒
小鼠網(wǎng)膜素(omentin)ELISA試劑盒
小鼠淋巴細胞因子ELISA試劑盒
小鼠抗利尿激素/血管加壓素/精氨酸加壓素(ADH/VP/AVP)ELISA試劑盒
小鼠N-乙?;?絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯氨酸(AcSDKP)ELISA試劑盒
小鼠信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子7(Smad7)ELISA試劑盒
小鼠補體因子H(CFH)ELISA試劑盒
小鼠血小板衍生生長因子BB(PDGF-BB)ELISA試劑盒
小鼠CXC趨化因子配體16(CXCL16)ELISA試劑盒
小鼠CXC趨化因子受體3(CXCR3)ELISA試劑盒
小鼠白介素27(IL-27)ELISA試劑盒
小鼠白介素23(IL-23)ELISA試劑盒
小鼠第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)ELISA試劑盒
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小鼠干擾素誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA試劑盒
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小鼠膽囊收縮素/腸促胰酶肽(CCK)ELISA試劑盒
小鼠腦腸肽(BGP/Gehrelin)ELISA試劑盒
小鼠6酮前列腺素(6-K-PG)ELISA試劑盒