詳細介紹
一,、服務
我們可以根據(jù)您的應用需要,比如在檢測范圍,、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本,。并可提供免費代測,。
二、兔子肝細胞生長因子(HGF)ELISA試劑盒檢測概述
ELISA(酶聯(lián)接免疫吸附反應分析)是以免疫學反應為基礎,,將抗原,、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結合起來的一種敏感性很高的實驗技術。 由于抗原,、抗體的反應在一種固相載體-聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行,,每加入一種試劑孵育后,可通過洗滌除去多余的游離反應物,,從而保證試驗結果的特異性與穩(wěn)定性,。
實際應用中,通過不同的設計,,具體的方法步驟可有多種,。即:用于檢測抗體的間接法、用于檢測抗原的雙抗體夾心法以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等,。目前我們對客戶提供比較常用的ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法服務,。
三、兔子肝細胞生長因子(HGF)ELISA試劑盒技術流程
雙抗體夾心法(檢測未知抗原) 間接法(檢測未知抗體)
1,、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml,。在反應孔中加0.1ml,4℃ guoye,。次日,,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,。
2,、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37℃ 孵育1小時,。然后洗滌(同時做空白孔,,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3,、加酶標抗體:于各反應孔中,,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~1小時,,洗滌,。
4,、加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘,。
5,、終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結果判定:可于白色背景上,,直接用肉眼觀察結果:反應孔內(nèi)顏色越深,,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,,依據(jù)所呈顏色的深淺,,以“+”、“-”號表示,。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性,。 1,、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1-10ug/ml, 每孔加0.1ml,,4℃guoye,。次日洗滌3次。
2,、加樣:加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌,。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)
3,、加酶標抗體:于反應孔中,,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.05ml,,37℃孵育30-60分鐘,,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
4,、加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,,37℃ 10~30分鐘。
5,、終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
6,、結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內(nèi)顏色越深,,陽性程度越強,,陰性反應為無色或極淺,,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”,、“-”號表示,。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,,則410nm)處,,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,,即為陽性,。
四、ELISA試劑盒的性能:
準確性:標準品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值,,大于等于0.9900,。
靈敏度:zui低檢測濃度小于10 pg/ml。
特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應,。
重復性:板內(nèi),、板間變異系數(shù)均小于15%。
五,、報告內(nèi)容及標準
1,、ELISA標準曲線;
2,、詳細的實驗步驟,;
3、完整的實驗報告(試劑耗材,,實驗方法,,實驗結果及結果說明);
4,、實驗進行階段,,我公司客服人員會及時向您匯報實驗進程。
不斷提升服務質(zhì)量,,精益求精,,“真誠的服務”是我司永恒的主題。
六,、ELISA試劑盒實驗操作的常見問題:
1. 問--客戶用48T試劑盒,,大概只有十個樣所以他一次用不完那么多板條,但是他想做兩次,,可封板膜只有一張,,那如果用完了怎么辦?可以用什么別的東西取代嗎,?
答--可以把封板膜剪掉,,用多少剪多少也可以用封口膜替代,。
2. 問--實驗過程中溫育是放在哪溫育呢?
答--可以在水浴箱,、細胞培養(yǎng)箱和烘干箱里面都行,,只要恒定溫度為37度。
七,、ELISA試劑盒的必知項:
1. 水溶性,、低黏度、無腐蝕,、不易燃,、*。
2. 所采用的方法特異性好,,靈敏度,、準確度、精密度,。
3. 所用標準品或標準參考物符合推薦標準和要求,。
4. 貯存期至少為1年。
八,、兔子肝細胞生長因子(HGF)ELISA試劑盒服務參考
售前服務
產(chǎn)品介紹,,技術疑難解答
售中服務
1.守信合同,保證及時供貨,,隨時保持與客戶
售后服務
1.對用戶所有疑問,,快速做出反映,售后服務人員在2~3個工作日內(nèi)給您一個滿意的答復,。
2.產(chǎn)品如有質(zhì)量問題,,實行包退、包換服務,。