詳細(xì)介紹
一、服務(wù)
我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要,,比如在檢測(cè)范圍,、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測(cè)試劑盒,有效控制檢測(cè)試劑成本,。并可提供免費(fèi)代測(cè),。
二、兔子基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)ELISA試劑盒檢測(cè)概述
ELISA(酶聯(lián)接免疫吸附反應(yīng)分析)是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),,將抗原,、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。 由于抗原,、抗體的反應(yīng)在一種固相載體-聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行,,每加入一種試劑孵育后,可通過洗滌除去多余的游離反應(yīng)物,,從而保證試驗(yàn)結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性,。
實(shí)際應(yīng)用中,通過不同的設(shè)計(jì),,具體的方法步驟可有多種,。即:用于檢測(cè)抗體的間接法、用于檢測(cè)抗原的雙抗體夾心法以及用于檢測(cè)小分子抗原或半抗原的抗原競(jìng)爭(zhēng)法等等,。目前我們對(duì)客戶提供比較常用的ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法服務(wù),。
三、兔子基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)ELISA試劑盒技術(shù)流程
雙抗體夾心法(檢測(cè)未知抗原) 間接法(檢測(cè)未知抗體)
1,、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml,。在反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃ guoye,。次日,,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,。
2,、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育1小時(shí),。然后洗滌(同時(shí)做空白孔,,陰性對(duì)照孔及陽性對(duì)照孔)。
3,、加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~1小時(shí),,洗滌,。
4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,,37℃ 10~30分鐘,。
5,、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定:可于白色背景上,,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,,依據(jù)所呈顏色的深淺,,以“+”、“-”號(hào)表示,。也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽性,。 1,、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1-10ug/ml, 每孔加0.1ml,,4℃guoye,。次日洗滌3次。
2,、加樣:加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌,。(同時(shí)做空白、陰性及陽性孔對(duì)照)
3,、加酶標(biāo)抗體:于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.05ml,,37℃孵育30-60分鐘,,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
4,、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,,37℃ 10~30分鐘。
5,、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6,、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,,陽性程度越強(qiáng),,陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,,以“+”,、“-”號(hào)表示,。也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,,則410nm)處,,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,,即為陽性,。
四、ELISA試劑盒的性能:
準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,,大于等于0.9900,。
靈敏度:zui低檢測(cè)濃度小于10 pg/ml。
特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng),。
重復(fù)性:板內(nèi),、板間變異系數(shù)均小于15%。
五,、報(bào)告內(nèi)容及標(biāo)準(zhǔn)
1,、ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線;
2,、詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)步驟,;
3、完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告(試劑耗材,,實(shí)驗(yàn)方法,,實(shí)驗(yàn)結(jié)果及結(jié)果說明);
4,、實(shí)驗(yàn)進(jìn)行階段,,我公司客服人員會(huì)及時(shí)向您匯報(bào)實(shí)驗(yàn)進(jìn)程。
不斷提升服務(wù)質(zhì)量,,精益求精,,“真誠的服務(wù)”是我司永恒的主題。
六,、正確操作是保證ELISA檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠的必要條件
1. 加樣后及時(shí)放人孵箱,,標(biāo)本較多時(shí),要分批操作,。按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間,,防止孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,,難以清洗*,。
2. 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過期顯色劑,,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用,。
3. 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干,。
4. 合理安排檢測(cè)量,以免反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng),。
七,、兔子基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)ELISA試劑盒服務(wù)參考
售前服務(wù)
產(chǎn)品介紹,技術(shù)疑難解答
售中服務(wù)
1.守信合同,,保證及時(shí)供貨,,隨時(shí)保持與客戶
售后服務(wù)
1.對(duì)用戶所有疑問,快速做出反映,,售后服務(wù)人員在2~3個(gè)工作日內(nèi)給您一個(gè)滿意的答復(fù),。
2.產(chǎn)品如有質(zhì)量問題,實(shí)行包退,、包換服務(wù),。