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產(chǎn)品名稱：兔子主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類ELISA試劑盒

產(chǎn)品規(guī)格：96T 48T

產(chǎn)品品牌：滬鼎生物 TSZ

樣品類型  血清,、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清等樣品類型

檢測方法  酶聯(lián)免疫法

特 異 性  公司ELISA試劑盒具有較高的靈敏度和出色的特異性

交叉反應(yīng)  由于當(dāng)前的酶聯(lián)免疫科學(xué)技術(shù)和知識(shí)有限,，現(xiàn)有技術(shù)不可能完成藥物檢測的靶抗原之間和所有其他物種的類似物,。因此，交叉反應(yīng)可能仍然存在

樣 本 量  50-100 μL

實(shí)驗(yàn)時(shí)間  1–4.5h

儲(chǔ)存條件  2-8°C

儲(chǔ)存方法  可以存儲(chǔ)在2 - 8°C長達(dá)1個(gè)月（專家建議：4°C恒溫保存,，酶免試劑盒實(shí)驗(yàn)效果更佳）,。對于長期存儲(chǔ),請?jiān)?20°C的存儲(chǔ)。盡量保持試驗(yàn)板在密封鋁箔袋,，避免潮濕

有 效 期  6 months

使用優(yōu)點(diǎn)  ELISA試劑盒可特異性定量測定疾病相關(guān)蛋白,，包括細(xì)胞因子,、趨化因子,、β淀粉樣蛋白與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)靶標(biāo),。

■靈敏，準(zhǔn)確和*的性能

■用血清,、血漿,、組織培養(yǎng)上清或裂解產(chǎn)物進(jìn)行過驗(yàn)證

■在半天內(nèi)可完成的現(xiàn)成，方便的檢測

一．兔子主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類ELISA試劑盒??實(shí)驗(yàn)原理

ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記,。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性,。在測定時(shí),，受檢標(biāo)本（測定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開,。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,，也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例,。加入酶反應(yīng)的底物后,，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),，故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析,。

二．兔子主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類ELISA試劑盒?樣品收集、處理及保存

1）.細(xì)胞培養(yǎng)上清：

適用于檢測體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份,。用無菌管收集細(xì)胞上清液,，以1000×g離心15分鐘，收集上清,。

2）細(xì)胞：

用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次,，調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104-106/ml 左右，通過反復(fù)凍融,，使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,，或者細(xì)胞超聲粉碎，離心取上清液檢測,。

3）血清：

在室溫下,，血液自然凝固，以1000×g離心15分鐘,，取上清待測,。

4）血漿：

應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合后靜置10-20 分鐘后,，以1000×g離心15分鐘,，收集上清,。

5）體液：

包括胸腹水、腦脊液,，分泌物等,。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集，以1000×g離心15分鐘,，收集上清,。

6.）組織標(biāo)本：

切取組織標(biāo)本，稱取重量0.5mg,，加入500ul 的PBS,，用手工或勻漿器，或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,，以2000-3000 rmp離心20 分鐘,，收集上清進(jìn)行檢測。

樣品中不能含有NaN3,，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性,。

7）保存：

如果樣品不能立即檢測，應(yīng)將其分裝,，-70 ℃保存,，避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,，應(yīng)再次離心,。血液標(biāo)本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,，檢測前先離心或過濾,。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。

三．實(shí)驗(yàn)材料與試劑配制

1.儀器與材料：酶標(biāo)儀（使用前預(yù)熱30分鐘）,，微量加液器、吸頭,、蒸餾水或去離子水,，濾紙。

2. 洗液的配制：按1:30的比例配制洗液備用,。

四．操作步驟

1）取出試劑盒,，室溫（20-25℃）放置30分鐘。

2）分組：取出96孔板,，根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),，把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品組（6個(gè)濃度）,、空白孔,、待測樣品組,。

3）標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：準(zhǔn)備小試管6 只，依次編好號(hào)碼,，先在各小試管中加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液100ul,，然后取原濃度標(biāo)準(zhǔn)品100ul加入一只已編好號(hào)的試管中，充分混勻;再在該試管中取100ul 加入第二支試管中,，充分混勻,；再在該試管中取100ul加入第三只試管中，充分混勻,；再在該試管中取100ul 加入第四只試管中，充分混勻,；再在該試管中取100ul加入第五只試管中,。

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