詳細介紹
兔氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)ELISA試劑盒概述:
待檢標本:包括血清,、血漿,、尿液、胸腹水,、腦脊液,、細胞培養(yǎng)上清等。
規(guī) 格:96T/48T
性 狀:液體
保 存:2-8℃
需要而未提供的試劑和器材:
1. 標準規(guī)格酶標儀
2. 高速離心機
3. 電熱恒溫培養(yǎng)箱
4. 干凈的試管和Eppendof管
5. 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭,,一次檢測樣品較多時,,用多通道移液器
6. 蒸餾水,容量瓶等
兔氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)ELISA試劑盒操作步驟:
實驗開始前,,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解),;試劑或樣品稀釋時,,均需混勻,混勻時盡量避免起泡,。實驗前應預測樣品含量,,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,,計算時再乘以相應的稀釋倍數(shù)。
1.加樣:分別設空白孔,、標準孔,、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,,加樣將樣品加于酶標板孔底部,,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,,酶標板加上蓋或覆膜,,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,,每次實驗請使用新的標準品溶液,。
2.棄去液體,甩干,,不用洗滌,。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘,。
3.溫育60分鐘后,,棄去孔內(nèi)液體,甩干,,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,,大約400μl/每孔,,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4.每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘,。
5.溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,,甩干,,洗板5次,,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干),。
6.依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,,后3-4孔梯度不明顯,即可終止),。
7.依序每孔加終止溶液50μl,,終止反應,此時藍色立轉黃色,。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同,。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液,。
8.用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值),。 在加終止液后立即進行檢測。
兔氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)ELISA試劑盒實驗注意事項:
1.試劑準備:所有試劑都必須在使用前達到室溫,,使用后請立即按照說明書要求保存試劑,。實驗操作中請使用一次性的吸頭,避免交叉污染,。
2.加樣:加樣或加試劑時,,請注意在吸取標本 / 標準品,酶結合物或底物時,,*個孔與zui后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大,,將會導致不同的 “預孵育"時間,從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性,。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)控制在10分鐘內(nèi),,如標本數(shù)量多,推薦使用多道移液器加樣,。
3.孵育:為防止樣品蒸發(fā),,試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標板加上蓋或覆膜,,以避免液體蒸發(fā),;洗板后應盡快進行下步操作,任何時侯都應避免酶標板處于干燥狀態(tài);同時應嚴格遵守給定的孵育時間和溫度,。
4.洗滌:洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干,,勿將濾紙直接放入反應孔中吸水,同時要消除板底殘留的液體和手指印,避免影響zui后的酶標儀讀數(shù),。
5.試劑配制:Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理,,以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標準品,、檢測溶液A工作液,、檢測溶液B工作液請依據(jù)所需的量配置使用,并使用相應的稀釋液配制,,不能混淆,。請精確配置標準品及工作液,盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時,,一次不要小于10μl),,以避免由于不準確稀釋而造成的濃度誤差;請勿重復使用已稀釋過的標準品,、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液,。
6.反應時間的控制:加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化(比如,每隔10分鐘),,如顏色較深,,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應,避免反應過強從而影響酶標儀光密度讀數(shù),。
7.底物:底物請避光保存,,在儲存和溫育時避免強光直接照射。建議檢測樣品時均設雙孔測定,,以保證檢測結果的準確性,。
如標本中待測物質(zhì)含量過高,請先稀釋后再測定,,計算時請zui后乘以稀釋倍數(shù),。
公司常見產(chǎn)品:
人常見ELISA試劑盒系列
人:IL-1、IL-1α,、IL-1β,、IL-2、IL-2R,、IL-27,、IL-23、IL-17,、IL-18,、IL-9、IL-8,、IL-6、IL-5、IL-4,、IL-2,、IL-13、IL-11,、IL-10,、IL-12P70、IL-12P40,、IFN-ω,、IFN-β、IFN-α,、 IFN-γ,、TNF-β、TNF-α,、sICAM-1,、LEP、MMP-3等
大鼠常見ELISA試劑盒系列
大鼠:TNF-α,、IL-1β,、IL-7、IL-32,、IL-21,、IL-27、IL-23,、IFN-γ,、TGF-α、TGF-β1等
小鼠常見ELISA試劑盒系列
小鼠:IFN-γ,、IL-1α,、IL-1β、IL-13,、IL-10,、IL-11、IL-17,、TNF-α,、TNF-β、VEGF,、TGF-β1等
另有兔,、豬、猴,、雞,、鴨,、羊、植物等多種種屬ELISA試劑盒,,所有試劑盒經(jīng)過充分驗證,,保證有效且重復性佳。