人腎小球組織糖基化終末產(chǎn)物 ELISA試劑盒資料
【規(guī) 格】:48T/96T
【方 法】:酶聯(lián)免疫法/酶免法(ELISA)
【性 狀】: 液態(tài)
【Elisa試劑盒種屬】馬鈴薯,、鹿,、羊、雞,、鴨,、魚(yú)、人,、大鼠,、小鼠、豚鼠,、倉(cāng)鼠,、裸鼠、兔子,、豬,、犬、猴,、馬,、牛等動(dòng)植物。
【Elisa試劑盒標(biāo)本】血清,、血漿、細(xì)胞上清液,、尿液,、體液、灌洗液,、腦脊髓,、心房水、胸房水,、組織等
【產(chǎn)品用途】:科研 實(shí)驗(yàn)
Elisa試劑盒貯存方式
貯存于2℃-8℃.如有需要,,我們將竭城為顧客提供售前,,售中,售后的*服務(wù)!
保存------如果樣品不立即使用,,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血,。如果血清中大量顆粒,,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍,。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍.
標(biāo)本的稀釋原則
首先通過(guò)文獻(xiàn)檢索的方式了解待測(cè)樣本的大致含量,,確定適當(dāng)?shù)南♂尡稊?shù)。只有稀釋至標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍內(nèi),,檢測(cè)的結(jié)果才是準(zhǔn)確的,。稀釋的過(guò)程中,應(yīng)做好詳細(xì)的記錄,。zui后計(jì)算濃度時(shí),,稀釋了“N”倍,標(biāo)本的濃度應(yīng)再乘以“N”,。
標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋原則:2瓶,,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,,然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,,其濃度為300 pg/ml,做系列倍比稀釋后,,分別稀釋300 pg/ml,,150 pg/ml,75 pg/ml,,37.5 pg/ml,,18.5 pg/ml,9 pg/ml,,4.5 pg/ml,,樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 pg/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制,。
如配制150 pg/ml標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5ml(不要少于0.5ml)300 pg/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,,混勻即可,其余濃度以此類推,。
生物素標(biāo)記抗體的稀釋原則:
臨用前以生物素標(biāo)記抗體稀釋液稀釋,,稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(每孔100μl),實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素標(biāo)記抗體加990μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,,輕輕混勻,,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。
辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素的稀釋原則:
臨用前以辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液稀釋,,稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(每孔100μl),,實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素加990μl辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 的比例配制,,輕輕混勻,,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。
人腎小球組織糖基化終末產(chǎn)物 ELISA試劑盒具體操作方法
測(cè)定抗原的,,主要有四種方法,。
1、競(jìng)爭(zhēng)法(Competition method):方法的基本原理可見(jiàn)圖1:本法首先將特異性抗體吸附于固相載體表面,,我們把抗原和抗體吸附到固相載體表面的這個(gè)過(guò)程,,稱為包被(Coated),也可叫做致敏,。經(jīng)洗滌后分成兩組:一組加酶標(biāo)記抗原和被測(cè)抗原的混合液,,而另一組只加酶標(biāo)記抗原,再經(jīng)孵育洗滌后加底物顯色,,這兩組底物降解量之差,,即為我們所要測(cè)定的未知抗原的量。
這種方法所測(cè)定的抗原只要有一個(gè)結(jié)合部位即可,,因此,,對(duì)小分子抗原如激素和藥物之類的測(cè)定常用此法。該法的優(yōu)點(diǎn)是快,,因?yàn)橹挥幸粋€(gè)保溫洗滌過(guò)程,。但需用較多量的酶標(biāo)記抗原為其缺點(diǎn)。
定量測(cè)定
ELSIA操作步驟復(fù)雜,,影響反應(yīng)因素較多,,特別是固相載體的包被難達(dá)到各個(gè)體之間的*,因此在定量測(cè)定中,,每批測(cè)試均須用一系列不同濃度的參考標(biāo)準(zhǔn)品在相同的條件下制作標(biāo)準(zhǔn)曲線,。測(cè)定大分子量物質(zhì)的夾心法ELISA,標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍一般較寬,,曲線zui高點(diǎn)的吸光度可接近2.0,,繪制時(shí)常用半對(duì)數(shù)紙,以檢測(cè)物的濃度為橫坐標(biāo),,以吸光度為縱坐標(biāo),將各濃度的值逐點(diǎn)連接,所得曲線一般呈S形,,其頭,、尾部曲線趨于平坦,中央較呈直線的部分是的檢測(cè)區(qū)域,。
Elisa定性測(cè)定
定性測(cè)定的結(jié)果判斷是對(duì)受檢標(biāo)本中是否含有待測(cè)抗原或抗體作出"有"或"無(wú)"的簡(jiǎn)單回答,,分別用"陽(yáng)性"、"陰性"表示,。"陽(yáng)性"表示該標(biāo)本在該測(cè)定系統(tǒng)中有反應(yīng),。"陰性"則為無(wú)反應(yīng)。用定性判斷法也可得到半定量結(jié)果,,即用滴度來(lái)表示反應(yīng)的強(qiáng)度,,其實(shí)質(zhì)仍是一個(gè)定性試驗(yàn)。在這種半定量測(cè)定中,,將標(biāo)本作一系列稀釋后進(jìn)行試驗(yàn),,呈陽(yáng)性反應(yīng)的zui高稀釋度即為滴度。根據(jù)滴度的高低,,可以判斷標(biāo)本反應(yīng)性的強(qiáng)弱,,這比觀察不稀釋標(biāo)本呈色的深淺判斷為強(qiáng)陽(yáng)性、弱陽(yáng)性更具定量意義,。
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