詳細(xì)介紹
產(chǎn)品名稱 | 人抗眼肌抗體(EMAb)ELISA試劑盒 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 96T/48T |
檢測(cè)方法 | 酶聯(lián)免疫法/酶免法(ELISA) |
產(chǎn)品范圍 | 人,小大鼠,豬,兔,其它動(dòng)物細(xì)胞因子;細(xì)胞凋亡,活性多肽,自身抗體 ,血栓與止血, 骨代謝,肝纖維化,腫瘤,激素內(nèi)分泌,自身抗體科研ELISA檢測(cè)試劑盒 |
待檢樣本 | 體液,血清,,血漿,,細(xì)胞培養(yǎng)上清液,尿液,,組織勻漿,心房水標(biāo)本等等,。 |
保存條件 | 2-8℃ |
人抗眼肌抗體(EMAb)ELISA試劑盒 | |
操作步驟 1、準(zhǔn)備:從冰箱取出試劑盒,,室溫復(fù)溫平衡30分鐘,。 2,、配液:用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。 3,、加標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)樣本:取足夠數(shù)量的酶標(biāo)包被板,,固定于框架上,分別設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔,、待測(cè)樣本孔和空白對(duì)照孔,,記錄各孔位置,在標(biāo)準(zhǔn)品孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品50μL,;待測(cè)樣本孔中先加入待測(cè)樣本10μL,,再加樣本稀釋液40μL(即樣本稀釋5倍);每孔再加入酶標(biāo)工作液100μL,;空白對(duì)照孔不加,。 4、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。 5,、洗板:棄去液體,吸水紙上拍干,,每孔加滿洗滌液,,靜置1min,甩去洗滌液,,吸水紙上拍干,,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)按說(shuō)明書(shū)操作洗板),。 6,、顯色:每孔先加入顯色劑A 液50μL,再加入顯色劑B液 50μL,,37℃避光顯色15min,。 7、終止:取出酶標(biāo)板,,每孔加終止液50μL,,終止反應(yīng)(顏色由藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。 8,、測(cè)定:以空白孔調(diào)零,,在終止后15分鐘內(nèi),用450nm波長(zhǎng)測(cè)量各孔的吸光值(OD值),。 9,、計(jì)算:根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度及對(duì)應(yīng)的OD值,計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程,,再根據(jù)樣本的OD值,,在回歸方程上計(jì)算出對(duì)應(yīng)的樣品濃度,,也可以使用各種應(yīng)用軟件來(lái)計(jì)算。zui終濃度為實(shí)際測(cè)定濃度乘以稀釋倍數(shù),。 注意事項(xiàng) 1,、實(shí)驗(yàn)嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,實(shí)驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn),。 2,、酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,應(yīng)立即裝入密封袋中加干燥劑保存,。 3,、建議所有的標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和空白對(duì)照都做雙份檢測(cè),,取平均值,,以減小實(shí)驗(yàn)誤差。 4,、若顯色過(guò)淺,,可適當(dāng)延長(zhǎng)底物溫育時(shí)間。 5,、為避免交叉污染,,標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和空白對(duì)照每加一個(gè)就要更換一次吸頭,;酶標(biāo)工作液,、樣本稀釋液和底物等公共組分,要懸臂加樣,,不得碰到微孔,;不得重復(fù)使用封板膜。 6,、試劑盒保質(zhì)期內(nèi)使用,,不同批號(hào)的試劑不得混用。 7,、底物B對(duì)光敏感,,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。 | |
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