實驗原理

ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記,。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,，酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性,。在測定時,，受檢標本（測定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開,。再加入酶標記的抗原或抗體,，也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例,。加入酶反應(yīng)的底物后,，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),，故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析,。

產(chǎn)品名稱：人谷氨酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA試劑盒    

產(chǎn)品規(guī)格：96T/48T

產(chǎn)品品牌：滬鼎生物/TSZ

樣品類型：血清、血漿,、細胞培養(yǎng)上清等樣品類型 

檢測方法：酶聯(lián)免疫法

特 異 性：公司ELISA試劑盒具有較高的靈敏度和出色的特異性 

交叉反應(yīng)：由于當(dāng)前的酶聯(lián)免疫科學(xué)技術(shù)和知識有限，現(xiàn)有技術(shù)不可能完成藥物檢測的靶抗原之間和所有其他物種的類似物。因此,，交叉反應(yīng)可能仍然存在 

樣 本 量：50-100 μL 

實驗時間：1–4.5h 

儲存條件：2-8°C 

儲存方法：可以存儲在2 - 8°C長達1個月（專家建議：4°C恒溫保存,，酶免試劑盒實驗效果更佳）。對于長期存儲,請在-20°C的存儲,。盡量保持試驗板在密封鋁箔袋,，避免潮濕 

有 效 期：6 months 

使用優(yōu)點：ELISA試劑盒可特異性定量測定疾病相關(guān)蛋白，包括細胞因子,、趨化因子,、β淀粉樣蛋白與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)靶標。

■靈敏,，準確和*的性能

■用血清,、血漿、組織培養(yǎng)上清或裂解產(chǎn)物進行過驗證

■在半天內(nèi)可完成的現(xiàn)成,，方便的檢測

一,、“人谷氨酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA試劑盒”標本要求

    在收集樣本前都必須有一個完整的計劃，必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定,。對收集后當(dāng)天就進行檢測的樣本,，及時儲存在4℃?zhèn)溆谩τ诟籼煸贆z測的樣本,，及時分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆?，有條件的，-70℃凍存?zhèn)溆?。標本?yīng)避免反復(fù)凍融,。

1.標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行,，提取后應(yīng)盡快進行實驗,。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融

2.不能檢測含NaN3的樣品,，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

二,、人谷氨酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA試劑盒使用要求

1.濃洗滌液低溫保存會有鹽析出,，稀釋時可在水浴中加溫助溶。

2.剛開啟的酶聯(lián)板孔中可能會含有少許水樣物質(zhì),，此為正?，F(xiàn)象，不會對實驗結(jié)果造成任何影響,。

3.溫浴的時候要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,，防止水分的蒸發(fā),。

4.洗板時，每次洗液加入后,，應(yīng)靜置1分鐘,，使清洗更加*。沒有洗板機時,，倒去液體后,，要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。

三,、人谷氨酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA試劑盒樣品收集,、處理及保存方法

1.血清：操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,。收集血液后,，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

2.血漿：EDTA,、檸檬酸鹽,、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒,。

3.細胞上清液：1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物,。

4.組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,，取上清液

5.保存：如果樣品不立即使用,，應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍,。盡可能的不要使用溶血或高血脂血,。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾,。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍,。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

四,、人谷氨酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA試劑盒操作步驟

(1）使用前,，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,，以免加樣時加入大量的氣泡,，產(chǎn)生加樣上的誤差。

(2）根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),。每個標準品和空白孔建議做復(fù)孔,。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔,。標本用標本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi),。

(3）加入稀釋好后的標準品50ul于反應(yīng)孔,、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體,。蓋上膜板,，輕輕振蕩混勻,，37℃溫育1小時,。

(4）甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液,，振蕩30秒,，甩去洗滌液，用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作3次,。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次,。

(5）每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘,。

(6）甩去孔內(nèi)液體,，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒,，甩去洗滌液,，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次,。如果用洗板機洗滌,，洗滌次數(shù)增加一次。

(7）每孔加入底物A,、B各50ul,，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘,。避免光照,。

(8）取出酶標板，迅速加入50ul終止液,，加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果,。

(9）在450nm波長處測定各孔的OD值。

五,、“人谷氨酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA試劑盒”*優(yōu)勢：

1.嚴格的質(zhì)控體系：所有試劑盒從原料到成品經(jīng)過嚴格的質(zhì)控,，確保試劑盒質(zhì)量及穩(wěn)定性。

2.產(chǎn)品經(jīng)過不斷優(yōu)化,，具有很好的靈敏度,； 

3.綜合指標特性,，研發(fā)便捷操作的試劑盒；

4.檢測驗證樣本多樣,；

5.*分裝：專業(yè)的,，可靠的實驗結(jié)果，優(yōu)秀的產(chǎn)品質(zhì)量,，低廉的市場價格,，實惠、經(jīng)濟,、可靠,。

6.專業(yè)的研發(fā)團隊為客戶提供個性化的定制服務(wù)；

7.提供食品安全藥物殘留ELISA試劑盒,，以及代測服務(wù),；

8.多年實踐經(jīng)驗的技術(shù)老師，保證滬鼎生物ELISA試劑盒完善專業(yè)的售后服務(wù),；

9.高靈敏度,、高精密度，高重現(xiàn)性,，高特異性,。不僅有高可靠性的實驗結(jié)果，更為您節(jié)約實驗成本和時間,。

六,、安全性

1.避免直接接觸終止液和底物A、B,。一旦接觸到這些液體,，請盡快用水沖洗。

2.實驗中不要吃喝,、抽煙或使用化妝品,。

3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

七,、注意事項

1.于2-8℃保存,，有效期6個月。每次使用前應(yīng)先平衡至室溫,。

2.中終止液具有腐蝕性,，要小心使用。

3.未使用完的板條應(yīng)密封保存,。

4.瓶蓋每次使用后要擰緊,，各瓶蓋之間不可混用。不同批號試劑盒的試劑組份不可混用,。

5.試驗樣本應(yīng)為無染菌,、無血脂,、無溶血的血清。任何樣本都應(yīng)視為傳染源妥善處理,。

八,、人谷氨酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA試劑盒訂購說明：

1.絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨，一般情況下都能訂貨當(dāng)日發(fā)貨,。 

2.部分非常用產(chǎn)品,，需提前1－2日預(yù)訂，海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂,。 

3.部分產(chǎn)品價格會因貨期,、批次等因素發(fā)生變化,，若有變動以訂貨當(dāng)日價格為準,。 

4.請辦理完貨款后，將收據(jù),、底單等連同收貨人的地址,、姓名、等以傳真,、,、信息、等形式通知我們,。

ELISA試劑盒的必知項：

1. 水溶性,、低黏度、無腐蝕,、不易燃,、*。

2. 所采用的方法特異性好,，靈敏度,、準確度、精密度,。

3. 所用標準品或標準參考物符合推薦標準和要求,。

4. 貯存期至少為1年。