詳細(xì)介紹
一、人吡啶交聯(lián)物(PY)ELISA試劑盒簡介
【檢測方法】:酶聯(lián)免疫法/酶免法(ELISA)
【產(chǎn)品性狀】:96T/48T,,盒裝液體(兩種統(tǒng)一規(guī)格)
【貯藏條件】:2-8°C
【有 效 期】:二年,,我公司Elisa試劑盒均為批次,可放心購買,。
【主要成分】:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等,。
【種 屬】馬鈴薯、鹿,、羊,、雞、鴨,、魚,、人、大鼠,、小鼠,、豚鼠、倉鼠,、裸鼠,、兔子、豬,、犬,、猴、馬,、牛等動植物,。
【產(chǎn)品單價】(ELISA試劑盒具體折扣),可免費(fèi)代測,,含稅含運(yùn)費(fèi)。
【標(biāo) 本】血清,、血漿,、細(xì)胞上清液、尿液,、體液,、灌洗液、腦脊髓、心房水,、胸房水,、組織等
注:標(biāo)本必須為液體,不含沉淀,。
公司實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備清單:
酶 標(biāo) 儀:芬蘭(Labsystems Multiskan MS)
儀器型號:352型
洗 板 機(jī):芬蘭(Thermo Labsystems)
儀器型號:AC8
離 心 機(jī):微量高速離心機(jī)(國產(chǎn))
儀器型號:TG16W
培 養(yǎng) 箱:隔水式恒溫培養(yǎng)箱(國產(chǎn))
儀器型號:GNP-9080型
電鏡儀器:美國FEI公司臺式掃描電鏡Phenom
儀器型號:TY-HRC
實(shí)時定量PCR (RT-PCR): 羅氏
儀器型號:Lightcycler 480
免疫熒光:Modulus™
四,、儲存及有效期
于2~8℃避光保存,有效期為12個月,。
包被板開封后請于2~8℃避光保存,,避免受潮。使用期限為2個月,。
二,、人吡啶交聯(lián)物(PY)ELISA試劑盒操作步驟
(一)樣品準(zhǔn)備
1.取動物全血按常規(guī)方法制備血清,要求血清清亮,,無溶血,、無污染。樣品1周內(nèi)可于2~8℃保存,,長期需置-20℃保存,。
2.用樣品稀釋液將待檢血清按100倍稀釋(如2μl血清加入198μl樣品稀釋液中,混勻),。陰,、陽性對照不用稀釋。
3.濃縮洗滌液使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫使沉淀溶解,,然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋,。
(二)檢驗(yàn)方法
1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘,恢復(fù)至室溫,。
2.取所需用量酶標(biāo)板條,,設(shè)空白對照1孔、陰性/陽性對照各2孔,,未用的板條盡快密封,,2~8℃保存。
3.空白對照孔加樣品稀釋液100μl,;陰,、陽性對照孔分別加入陰、陽性對照100μl,;樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl,。
4.混勻,置37℃反應(yīng)30分鐘,。
5.扣去孔內(nèi)液體,,每孔加滿洗滌液,,靜置30秒后棄去,重復(fù)洗滌5次,,拍干,。
6.每孔加酶標(biāo)記物100μl(空白孔除外)。置37℃反應(yīng)30分鐘,。
7.洗滌,,同步驟5。
8.每孔依次加底物液A,、底物液B各50μl,,混勻,37℃避光反應(yīng)10分鐘,。
9.每孔加終止液50μl,,混勻,用空白孔調(diào)零,,于450nm(可用630nm作參比波長)測定各孔吸光值(A值),。
ELISA實(shí)驗(yàn)在做到嚴(yán)格要求的同時有著一些不能忽視的小細(xì)節(jié):
1.用槍吸取液體時速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確,。
2.液體全部加完后,,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體,。也可以用酶標(biāo)儀的晃動功能,。
3.洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,,0.02M的磷酸緩沖液,,加入0.1%的吐溫20作為洗液,。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
4.吸取液體時,,要用量程和需要量接近的槍去吸,,減少誤差,。
三,、人吡啶交聯(lián)物(PY)ELISA試劑盒注意事項(xiàng)
1. 當(dāng)混合蛋白溶液時應(yīng)盡量輕緩,,避免起泡。
2. 洗滌過程非常重要,,不充分的洗滌易造成假陽性,。
3. 一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,,推薦使用排槍加樣,。
4. 請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔,。
5. 如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高,,請先稀釋后再測定,計算時請zui后乘以稀釋倍數(shù),。
6. 在配制標(biāo)準(zhǔn)品,、檢測溶液工作液時,請以相應(yīng)的稀釋液配制,,不能混淆,。
7. 底物請避光保存。
8. 不要用其它生產(chǎn)廠家的試劑替換試劑盒中的試劑,。
四,、ELISA試劑盒優(yōu)點(diǎn):
我司共有14000余種ELISA試劑盒物種涵蓋Human,Mouse,Rat等,品種具備以下優(yōu)點(diǎn):
*品質(zhì)—高品質(zhì)的抗體和試劑是ELISA試劑盒的基礎(chǔ)
精確特異—特異檢測目標(biāo)分子,,結(jié)果精確可重復(fù)
高度靈敏—可檢測到pg/mL級別的目標(biāo)
種類齊全—可覆蓋人,、大鼠、小鼠,、棉鼠,、獼猴、豬,、馬,、犬和貓等多個種屬
優(yōu)化設(shè)計—可拆卸式96孔板(12X8),為血清,、血漿,、尿樣和細(xì)胞培養(yǎng)物樣本檢測進(jìn)行優(yōu)化
五、人吡啶交聯(lián)物(PY)ELISA試劑盒結(jié)果計算:
在半對數(shù)坐標(biāo)紙上繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,。標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為X軸,,相應(yīng)的OD值為Y軸,用四參數(shù)或?qū)?shù)-對數(shù)法繪制zui合適的標(biāo)準(zhǔn)曲線,。濃度與OD值成反比關(guān)系,,隨著標(biāo)準(zhǔn)品濃度的增加,黃色強(qiáng)度就減少,,即OD值減少樣本濃度可直接從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀取,。如果樣本實(shí)驗(yàn)前進(jìn)行了稀釋,則試劑盒zui后結(jié)果應(yīng)乘以相應(yīng)的稀釋因子標(biāo)準(zhǔn)曲線為逆向S型曲線,。
附:采用全自動酶標(biāo)儀檢測,,只需檢測前設(shè)置好酶標(biāo)儀的相關(guān)參數(shù),如坐標(biāo)參數(shù)(線性,,半對數(shù))和計算方式參數(shù)(三次回歸,、四參數(shù)或雙對數(shù)曲線方程),即可直接得到結(jié)果,。
產(chǎn)品名稱存放:收到貨后貯存于4℃,,強(qiáng)烈建議盡快使用配制的試劑1X緩沖液貯存于4℃,,將不用的微孔板放回至密封袋內(nèi)密封起來,貯存于4℃,,已稀釋的標(biāo)準(zhǔn)品,,生物標(biāo)記物,抗體和HRP貯存于4℃,。