一,、人組織蛋白酶K(cath-K)ELISA試劑盒簡介

【檢測方法】：酶聯(lián)免疫法/酶免法(ELISA)

【產(chǎn)品性狀】：96T/48T,，盒裝液體(兩種統(tǒng)一規(guī)格)

【貯藏條件】：2-8°C

【有 效 期】：二年，我公司Elisa試劑盒均為批次,，可放心購買,。

【主要成分】：酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。

【種    屬】馬鈴薯,、鹿,、羊、雞,、鴨,、魚、人,、大鼠、小鼠,、豚鼠、倉鼠,、裸鼠、兔子,、豬、犬,、猴,、馬,、牛等動(dòng)植物,。

【產(chǎn)品單價(jià)】（ELISA試劑盒具體折扣）,，可免費(fèi)代測,，含稅含運(yùn)費(fèi)。

【標(biāo)    本】血清,、血漿、細(xì)胞上清液,、尿液,、體液,、灌洗液,、腦脊髓,、心房水,、胸房水,、組織等

注：標(biāo)本必須為液體，不含沉淀,。

公司實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備清單：

酶 標(biāo) 儀：芬蘭（Labsystems Multiskan MS）

儀器型號(hào)：352型

洗 板 機(jī)：芬蘭（Thermo Labsystems）

儀器型號(hào)：AC8

離 心 機(jī)：微量高速離心機(jī)（國產(chǎn)）

儀器型號(hào)：TG16W

培 養(yǎng) 箱：隔水式恒溫培養(yǎng)箱（國產(chǎn)）

儀器型號(hào)：GNP-9080型

電鏡儀器：美國FEI公司臺(tái)式掃描電鏡Phenom

儀器型號(hào)：TY-HRC

實(shí)時(shí)定量PCR (RT-PCR): 羅氏

儀器型號(hào)：Lightcycler 480

免疫熒光：Modulus™

四,、儲(chǔ)存及有效期 

于2～8℃避光保存,，有效期為12個(gè)月,。 

包被板開封后請(qǐng)于2～8℃避光保存，避免受潮,。使用期限為2個(gè)月,。 

二,、人組織蛋白酶K(cath-K)ELISA試劑盒操作步驟 

（一）樣品準(zhǔn)備 

1.取動(dòng)物全血按常規(guī)方法制備血清,，要求血清清亮，無溶血,、無污染。樣品1周內(nèi)可于2～8℃保存,，長期需置-20℃保存。 

2.用樣品稀釋液將待檢血清按100倍稀釋（如2μl血清加入198μl樣品稀釋液中,，混勻）,。陰,、陽性對(duì)照不用稀釋。 

3.濃縮洗滌液使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫使沉淀溶解,，然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋,。 

（二）檢驗(yàn)方法 

1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘，恢復(fù)至室溫,。 

2.取所需用量酶標(biāo)板條,，設(shè)空白對(duì)照1孔,、陰性/陽性對(duì)照各2孔,，未用的板條盡快密封,，2～8℃保存,。 

3.空白對(duì)照孔加樣品稀釋液100μl,；陰、陽性對(duì)照孔分別加入陰,、陽性對(duì)照100μl,；樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl,。 

4.混勻,，置37℃反應(yīng)30分鐘。 

5.扣去孔內(nèi)液體,，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去,，重復(fù)洗滌5次，拍干,。 

6.每孔加酶標(biāo)記物100μl（空白孔除外）,。置37℃反應(yīng)30分鐘。 

7.洗滌,，同步驟5,。 

8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl,，混勻,，37℃避光反應(yīng)10分鐘。 

9.每孔加終止液50μl,，混勻，用空白孔調(diào)零,，于450nm(可用630nm作參比波長）測定各孔吸光值（A值）。 

三,、人組織蛋白酶K(cath-K)ELISA試劑盒注意事項(xiàng)

1. 當(dāng)混合蛋白溶液時(shí)應(yīng)盡量輕緩,，避免起泡。

2. 洗滌過程非常重要,，不充分的洗滌易造成假陽性,。

3. 一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多,，推薦使用排槍加樣,。

4. 請(qǐng)每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔,。

5. 如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高,，請(qǐng)先稀釋后再測定,，計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以稀釋倍數(shù)。

6. 在配制標(biāo)準(zhǔn)品,、檢測溶液工作液時(shí)，請(qǐng)以相應(yīng)的稀釋液配制,，不能混淆,。

7. 底物請(qǐng)避光保存,。

8. 不要用其它生產(chǎn)廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。

四,、ELISA試劑盒優(yōu)點(diǎn)：

我司共有14000余種ELISA試劑盒物種涵蓋Human,Mouse,Rat等,，品種具備以下優(yōu)點(diǎn)：

*品質(zhì)—高品質(zhì)的抗體和試劑是ELISA試劑盒的基礎(chǔ)

精確特異—特異檢測目標(biāo)分子,，結(jié)果精確可重復(fù)

高度靈敏—可檢測到pg/mL級(jí)別的目標(biāo)

種類齊全—可覆蓋人、大鼠,、小鼠、棉鼠,、獼猴,、豬、馬,、犬和貓等多個(gè)種屬

優(yōu)化設(shè)計(jì)—可拆卸式96孔板(12X8)，為血清,、血漿,、尿樣和細(xì)胞培養(yǎng)物樣本檢測進(jìn)行優(yōu)化

五、人組織蛋白酶K(cath-K)ELISA試劑盒結(jié)果計(jì)算：

在半對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙上繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,。標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為X軸,，相應(yīng)的OD值為Y軸,，用四參數(shù)或?qū)?shù)-對(duì)數(shù)法繪制zui合適的標(biāo)準(zhǔn)曲線,。濃度與OD值成反比關(guān)系,，隨著標(biāo)準(zhǔn)品濃度的增加，黃色強(qiáng)度就減少,，即OD值減少樣本濃度可直接從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀取,。如果樣本實(shí)驗(yàn)前進(jìn)行了稀釋，則試劑盒zui后結(jié)果應(yīng)乘以相應(yīng)的稀釋因子標(biāo)準(zhǔn)曲線為逆向S型曲線,。

附：采用全自動(dòng)酶標(biāo)儀檢測,，只需檢測前設(shè)置好酶標(biāo)儀的相關(guān)參數(shù)，如坐標(biāo)參數(shù)（線性,，半對(duì)數(shù)）和計(jì)算方式參數(shù)（三次回歸,、四參數(shù)或雙對(duì)數(shù)曲線方程），即可直接得到結(jié)果,。

產(chǎn)品名稱存放：收到貨后貯存于4℃,，強(qiáng)烈建議盡快使用配制的試劑1X緩沖液貯存于4℃，將不用的微孔板放回至密封袋內(nèi)密封起來,，貯存于4℃,，已稀釋的標(biāo)準(zhǔn)品，生物標(biāo)記物,，抗體和HRP貯存于4℃,。