一、人膠原酶II(Collagenase II)ELISA試劑盒簡介

【檢測方法】：酶聯(lián)免疫法/酶免法(ELISA)

【產(chǎn)品性狀】：96T/48T,，盒裝液體(兩種統(tǒng)一規(guī)格)

【貯藏條件】：2-8°C

【有 效 期】：二年,，我公司Elisa試劑盒均為批次，可放心購買,。

【主要成分】：酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等,。

【種    屬】馬鈴薯、鹿,、羊,、雞、鴨,、魚、人,、大鼠,、小鼠、豚鼠,、倉鼠,、裸鼠、兔子,、豬,、犬、猴,、馬,、牛等動植物。

【產(chǎn)品單價】（ELISA試劑盒具體折扣），可免費代測,，含稅含運費,。

【標(biāo)    本】血清、血漿,、細(xì)胞上清液,、尿液、體液,、灌洗液,、腦脊髓、心房水,、胸房水,、組織等

注：標(biāo)本必須為液體，不含沉淀,。

ELISA試劑盒原理 

用純化的抗體包被微孔板,，制成固相載體，往包被抗C3抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品,、生物素化的抗C3抗體,、HRP標(biāo)記的親和素，經(jīng)過*洗滌后用底物TMB顯色,。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的C3呈正相關(guān),。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),，計算樣品濃度。

ELISA試劑盒組成 

酶標(biāo)板,、酶標(biāo)記物,、樣品稀釋液、濃縮洗滌液,、底物液A,、底物液B、陽性對照,、陰性對照 

四,、儲存及有效期 

于2～8℃避光保存，有效期為12個月,。 

包被板開封后請于2～8℃避光保存,，避免受潮。使用期限為2個月,。 

二,、人膠原酶II(Collagenase II)ELISA試劑盒操作步驟 

（一）樣品準(zhǔn)備 

1.取動物全血按常規(guī)方法制備血清,，要求血清清亮，無溶血,、無污染,。樣品1周內(nèi)可于2～8℃保存，長期需置-20℃保存,。 

2.用樣品稀釋液將待檢血清按100倍稀釋（如2μl血清加入198μl樣品稀釋液中,，混勻）。陰,、陽性對照不用稀釋,。 

3.濃縮洗滌液使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫使沉淀溶解，然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋,。 

（二）檢驗方法 

1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘,，恢復(fù)至室溫。 

2.取所需用量酶標(biāo)板條,，設(shè)空白對照1孔,、陰性/陽性對照各2孔，未用的板條盡快密封,，2～8℃保存,。 

3.空白對照孔加樣品稀釋液100μl；陰,、陽性對照孔分別加入陰,、陽性對照100μl；樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl,。 

4.混勻,，置37℃反應(yīng)30分鐘。 

5.扣去孔內(nèi)液體,，每孔加滿洗滌液,，靜置30秒后棄去，重復(fù)洗滌5次,，拍干,。 

6.每孔加酶標(biāo)記物100μl（空白孔除外）。置37℃反應(yīng)30分鐘,。 

7.洗滌，同步驟5,。 

8.每孔依次加底物液A,、底物液B各50μl，混勻,，37℃避光反應(yīng)10分鐘,。 

9.每孔加終止液50μl,，混勻，用空白孔調(diào)零,，于450nm(可用630nm作參比波長）測定各孔吸光值（A值）,。 

三、人膠原酶II(Collagenase II)ELISA試劑盒注意事項

1. 當(dāng)混合蛋白溶液時應(yīng)盡量輕緩,，避免起泡,。

2. 洗滌過程非常重要，不充分的洗滌易造成假陽性,。

3. 一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣,。

4. 請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,，做復(fù)孔。

5. 如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高,，請先稀釋后再測定,，計算時請zui后乘以稀釋倍數(shù)。

6. 在配制標(biāo)準(zhǔn)品,、檢測溶液工作液時,，請以相應(yīng)的稀釋液配制，不能混淆,。

7. 底物請避光保存,。

8. 不要用其它生產(chǎn)廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。

四,、ELISA試劑盒優(yōu)點：

我司共有14000余種ELISA試劑盒物種涵蓋Human,Mouse,Rat等,，品種具備以下優(yōu)點：

*品質(zhì)—高品質(zhì)的抗體和試劑是ELISA試劑盒的基礎(chǔ)

精確特異—特異檢測目標(biāo)分子，結(jié)果精確可重復(fù)

高度靈敏—可檢測到pg/mL級別的目標(biāo)

種類齊全—可覆蓋人,、大鼠,、小鼠、棉鼠,、獼猴,、豬、馬,、犬和貓等多個種屬

優(yōu)化設(shè)計—可拆卸式96孔板(12X8),，為血清、血漿,、尿樣和細(xì)胞培養(yǎng)物樣本檢測進行優(yōu)化

五,、人膠原酶II(Collagenase II)ELISA試劑盒結(jié)果計算：

在半對數(shù)坐標(biāo)紙上繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為X軸,，相應(yīng)的OD值為Y軸,，用四參數(shù)或?qū)?shù)-對數(shù)法繪制zui合適的標(biāo)準(zhǔn)曲線,。濃度與OD值成反比關(guān)系，隨著標(biāo)準(zhǔn)品濃度的增加,，黃色強度就減少,，即OD值減少樣本濃度可直接從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀取。如果樣本實驗前進行了稀釋,，則試劑盒zui后結(jié)果應(yīng)乘以相應(yīng)的稀釋因子標(biāo)準(zhǔn)曲線為逆向S型曲線,。

附：采用全自動酶標(biāo)儀檢測，只需檢測前設(shè)置好酶標(biāo)儀的相關(guān)參數(shù),，如坐標(biāo)參數(shù)（線性,，半對數(shù)）和計算方式參數(shù)（三次回歸、四參數(shù)或雙對數(shù)曲線方程）,，即可直接得到結(jié)果,。

產(chǎn)品名稱存放：收到貨后貯存于4℃，強烈建議盡快使用配制的試劑1X緩沖液貯存于4℃,，將不用的微孔板放回至密封袋內(nèi)密封起來,，貯存于4℃，已稀釋的標(biāo)準(zhǔn)品,，生物標(biāo)記物,，抗體和HRP貯存于4℃。

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