一,、人反三碘甲狀腺原氨酸(rT3)ELISA試劑盒檢測原理

Elisa試驗是一種敏感性高,，特異性強，重復性好的實驗診斷方法,。由于其試劑穩(wěn)定,、易保存，操作簡便,，結果判斷較客觀等因素,，已廣泛應用在免疫學檢驗的各領域中。依次加入標本,、標準品,、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并*洗滌,。用底物TMB顯色,，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色,。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值）,，計算樣品濃度,。

二、標本要求

1. 血清：溫血液自然凝固10-20分鐘后,，離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,，應再次離心,。

2. 血漿：根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,，混合10-20分鐘后,，離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,，應再次離心。

3. 尿液：無菌管收集,。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,，應再次離心,。胸腹水、腦脊液參照此實行,。

4. 細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時,，用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),。仔細收集上清,。

5. 組織標本：切割標本后，稱取重量,。加入一定量的PBS,，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度,。加入一定量的PBS(PH7.4)，或組織蛋白萃取試劑,，用手工或勻漿器將標本勻漿化,。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用,。

三,、人反三碘甲狀腺原氨酸(rT3)ELISA試劑盒特點概述

1.專一性強,。抗原與抗體的免疫反應是專一反應,，而免疫酶技術以免疫反應為基礎,，所檢測的對象是抗原(或抗體)，使用的抗體除標記了酶以外,，與普通抗體的免疫反應特性并無多大差別,。

2.靈敏度高。由于抗體聯(lián)結上了酶,，因此,，借助于酶與底物的顯色反應，顯示抗原與抗體的結合,，大大提高了檢測的靈敏性,，使檢測水平接近放射免疫測定法。

3.樣品易保存,。經過酶反應顯示的有色產物大多比較穩(wěn)定,，因此有利于樣品的保存。

4.結果易觀察,。對檢測結果即可用肉眼觀察,，又可用顯微鏡觀察，也可以用分光光度計進行比色測定,，還可用顯微鏡觀察,。這是因為某些酶反應產物能使電子密度發(fā)生改變，從而引起被檢測物的顯示,。

5.可以定量測定,。溶液中的抗原物質，應用酶免吸附技術進行比色測定,，依據光密度值的變化,，可以定量。預計用細胞分光光度計可對組織內的抗原進行免疫酶技術的定量測定,。

6.可以大規(guī)模測定樣品,。如有成千上萬份樣品需要進行檢測，免疫酶技術都能在較短時間內完成,。

7.儀器和試劑簡單,。對免疫沒技術來說，不需要熒光顯微鏡,，也不需要測定放射性的特殊儀器,，所用儀器及試劑均屬一般性儀器與試劑，普通實驗室及生產應用單位均易購置

8.*,，質量保證,，zui大限度的節(jié)省實驗經費,。

四、人反三碘甲狀腺原氨酸(rT3)ELISA試劑盒注意事項

1. 由于底物顯色劑對光及其敏感,，因此要避光保存,。

2. 檢測吸光度前應將酶標儀打開，將其預熱30min以上,。

3. 孵育的時間應該嚴格按照試劑盒說明書上的時間為準,。

4. 要盡量做雙孔實驗，這樣才既能保證數(shù)據的準確性,，又能反映出試劑盒的精密度,。

5. 對樣本的結果有疑問時需要使用其他檢測方法進行驗證。

五,、代測服務

客戶以快遞形式送標本,，上海市內客戶代測樣本可享我司上門取樣服務。

本公司公布的試劑盒,，可以提供代測服務,。 

本公司上尚未列出的試劑盒，可以代為研發(fā)和測定,，費用等相關信息咨詢,。

六、人反三碘甲狀腺原氨酸(rT3)ELISA試劑盒結果計算：

在半對數(shù)坐標紙上繪制標準曲線,。標準品的濃度為X軸,，相應的OD值為Y軸，用四參數(shù)或對數(shù)-對數(shù)法繪制zui合適的標準曲線,。濃度與OD值成反比關系,，隨著標準品濃度的增加，黃色強度就減少,，即OD值減少樣本濃度可直接從標準曲線上讀取,。如果樣本實驗前進行了稀釋，則試劑盒zui后結果應乘以相應的稀釋因子標準曲線為逆向S型曲線,。

附：采用全自動酶標儀檢測,，只需檢測前設置好酶標儀的相關參數(shù)，如坐標參數(shù)（線性,，半對數(shù)）和計算方式參數(shù)（三次回歸,、四參數(shù)或雙對數(shù)曲線方程），即可直接得到結果,。

產品名稱存放：收到貨后貯存于4℃,，強烈建議盡快使用配制的試劑1X緩沖液貯存于4℃，將不用的微孔板放回至密封袋內密封起來,，貯存于4℃,，已稀釋的標準品,，生物標記物，抗體和HRP貯存于4℃,。