人胰蛋白酶原激活肽(TAP)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理

ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),，將抗原,、牽9體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的高效催化作用相結(jié)合起來(lái)的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。由于抗原,、抗體的反應(yīng)在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行,，每加入一種試劑孵育后，可通過(guò)洗滌除去多余的游離反應(yīng)物,，從而保證試驗(yàn)結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性,。在實(shí)際應(yīng)用中，通過(guò)不同的設(shè)計(jì),，具體的方法步驟可有多種,。即:用于檢測(cè)抗體的間接法(圖a)、用于檢測(cè)抗原的雙抗體夾心法(圖b)以及用于檢測(cè)小分子抗原或半抗原的抗原競(jìng)爭(zhēng)法等等,。比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法,。 

訂購(gòu)Elisa試劑盒客戶須知

1、液體類標(biāo)本（細(xì)胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿,、血清、血漿,、尿液,、胸水、腹水,、腦脊液等）,；

2、樣本保存：請(qǐng)盡早檢測(cè),，2-8℃保存一天,；需更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍（-20℃或-70℃）保存。如需周期收集樣本，請(qǐng)將樣本及時(shí)分裝標(biāo)號(hào)后,，置-20℃或-70℃保存；

3,、請(qǐng)?zhí)崆案嬖V我們：您樣本的種屬,、樣本數(shù)量、待測(cè)指標(biāo)及其他特殊要求,。

人胰蛋白酶原激活肽(TAP)ELISA試劑盒所需要樣本處理及要求:

1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘,，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,，保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,，應(yīng)再次離心。操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,。

2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后,，離心20分鐘左右  (2000-3000轉(zhuǎn)/分)去除顆粒,。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成,，應(yīng)該再次離心,。

3. 尿液：用無(wú)菌管收集，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清,，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心,。胸腹水,、腦脊液參照實(shí)行。

4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測(cè)分泌性的成份時(shí),，用無(wú)菌管收集,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),，用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右,。通過(guò)反復(fù)凍融,，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清   ,。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

5. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后,，稱取重量,。加入一定量的PBS，PH7.4,。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),，用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,。分裝后一份待檢測(cè),，其余冷凍備用。

6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),，可將標(biāo)本放于-20℃保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性,。

試劑盒說(shuō)明

1. 在儲(chǔ)存及孵育過(guò)程中避免將試劑暴露在強(qiáng)光中,。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染，試劑避免受到微生物的污染,，因?yàn)榈鞍姿饷傅母蓴_將導(dǎo)致出現(xiàn)錯(cuò)誤的結(jié)果,。

2. 小心吸取試劑并嚴(yán)格遵守給定的孵育時(shí)間和溫度。請(qǐng)注意在吸取標(biāo)本 / 標(biāo)準(zhǔn)品,，酶結(jié)合物或底物時(shí),，*個(gè)孔與zui后一個(gè)孔加樣之間的時(shí)間間隔如果太大，將會(huì)導(dǎo)致不同的 “預(yù)孵育”時(shí)間,，從而明顯地影響到測(cè)量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性,。而且，洗滌不充分將影響試驗(yàn)結(jié)果,。

3. 試劑盒保存：部分試劑保存于-20℃,，部分試劑保存于2-8℃，具體以標(biāo)簽上的標(biāo)示為準(zhǔn),。

4. 濃洗滌液會(huì)有鹽析出,，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。

5. 剛開啟的酶聯(lián)板孔中可能會(huì)含有少許水樣物質(zhì),，此為正?，F(xiàn)象,，不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響。

6. 中,、英文說(shuō)明書可能會(huì)有不*之處,，請(qǐng)以英文說(shuō)明書為準(zhǔn)。

7. 所有的樣品都應(yīng)管理好,，按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測(cè)裝置,。

8. 有效期：6個(gè)月Elisa試劑盒

人胰蛋白酶原激活肽(TAP)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)過(guò)程：

1. 試劑準(zhǔn)備：所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫，使用后請(qǐng)立即按照說(shuō)明書要求保存試劑,。 實(shí)驗(yàn)操作中請(qǐng)使用一次性的吸頭，避免交叉污染,。

2. 加樣：加樣或加試劑時(shí),，請(qǐng)注意在吸取標(biāo)本 / 標(biāo)準(zhǔn)品，酶結(jié)合物或底物時(shí),，*個(gè)孔與zui后一個(gè)孔加樣之間的時(shí)間間隔如果太大,，將會(huì)導(dǎo)致不同的 “預(yù)孵育"時(shí)間，從而明顯地影響到測(cè)量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性,。一次加樣時(shí)間(包括標(biāo)準(zhǔn)品及所有樣品)控制在10分鐘內(nèi),，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用多道移液器加樣,。

3. 孵育：為防止樣品蒸發(fā),，試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,，以避免液體蒸發(fā),；洗板后應(yīng)盡快進(jìn)行下步操作，任何時(shí)侯都應(yīng)避免酶標(biāo)板處于干燥狀態(tài);同時(shí)應(yīng)嚴(yán)格遵守給定的孵育時(shí)間和溫度,。

4. 洗滌：洗滌過(guò)程中反應(yīng)孔中殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上充分拍干,，勿將濾紙直接放入反應(yīng)孔中吸水，同時(shí)要消除板底殘留的液體和手指印,，避免影響zui后的酶標(biāo)儀讀數(shù),。

人胰蛋白酶原激活肽(TAP)ELISA試劑盒優(yōu)勢(shì)

針對(duì)國(guó)內(nèi)酶聯(lián)免疫行業(yè)不同的需求，我們公司特推出科研型ELISA試劑盒,、商用型ELISA試劑盒,，我們均采用環(huán)保型包裝材料，響應(yīng)了國(guó)家節(jié)能減排的要求,，同時(shí),，為了更好的適應(yīng)客戶需求，我們推出經(jīng)濟(jì)型ELISA試劑盒,，讓大家的實(shí)驗(yàn)更節(jié)省,，公司在不斷努力降低ELISA試劑原料成本,，以便更好的節(jié)省ELISA試劑盒整體價(jià)格，相信不遠(yuǎn)的將來(lái),，ELISA試劑盒價(jià)格會(huì)更便宜,，實(shí)驗(yàn)效果會(huì)更穩(wěn)定！

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