詳細介紹
Elisa試劑盒簡單介紹:
【產(chǎn)品名稱】:人白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA試劑盒
【英文名稱】:Human Interleukin 1 receptor antagonist, IL-1ra ELISA KIT
【檢測種屬】:人,、大鼠,、小鼠等動植物。
【產(chǎn)品用途】:被測樣品定性或定量分析
【產(chǎn)品規(guī)格】:48T,、96T
【檢測方法】:酶免法/酶聯(lián)免疫法(ELISA)
【保存條件】:2-8℃
【供 貨 期】:1-3天(現(xiàn)貨供應(yīng))
【產(chǎn)品性狀】:液體盒裝
【服務(wù)優(yōu)勢】:全程提供ELISA實驗技術(shù)指導(dǎo)和ELISA試劑盒免費代測
【樣本儲存】:收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定,。對收集后當天進行檢測的標本,儲存在4℃?zhèn)溆?,如有特殊原因需要周期收集標本,,將標本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復(fù)凍融。標本2-8℃可保存48小時,,-20℃可保存1個月,。-70℃可保存6個月。部分激素類標本需添加抑肽酶,。
人白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA試劑盒操作步驟
1,、準備:從冰箱取出試劑盒,室溫復(fù)溫平衡30分鐘,。
2,、配液:用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。
3,、加標準品和待測樣本:取足夠數(shù)量的酶標包被板,,固定于框架上,分別設(shè)置標準品孔,、待測樣本孔和空白對照孔,,記錄各孔位置,,在標準品孔中加入標準品50μL,;待測樣本孔中先加入待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL(即樣本稀釋5倍),;每孔再加入酶標工作液100μL,;空白對照孔不加。
4,、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。
5、洗板:棄去液體,,吸水紙上拍干,,每孔加滿洗滌液,靜置1min,,甩去洗滌液,,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機按說明書操作洗板),。
6,、顯色:每孔先加入顯色劑A 液50μL,再加入顯色劑B液 50μL,,37℃避光顯色15min,。
7、終止:取出酶標板,,每孔加終止液50μL,,終止反應(yīng)(顏色由藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
8、測定:以空白孔調(diào)零,,在終止后15分鐘內(nèi),,用450nm波長測量各孔的吸光值(OD值)。
9,、計算:根據(jù)標準品的濃度及對應(yīng)的OD值,,計算出標準曲線的直線回歸方程,再根據(jù)樣本的OD值,,在回歸方程上計算出對應(yīng)的樣品濃度,,也可以使用各種應(yīng)用軟件來計算。zui終濃度為實際測定濃度乘以稀釋倍數(shù),。
人白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA試劑盒的基本原理有這幾條:
1.抗原或抗體能以物理性地吸附于固相載體表面,,可能是蛋白和聚苯乙烯表面間的疏水 性部分相互吸附,并保持其免疫學(xué)活性,;
2.抗原或抗體可通過共價鍵與酶連接形成酶結(jié)合物,,而此種酶結(jié)合物仍能保持其免疫學(xué) 和酶學(xué)活性;
3.酶結(jié)合物與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后,,可根據(jù)加入底物的顏色反應(yīng)來判定是否有免疫反 應(yīng)的存在,,而且顏色反應(yīng)的深淺是與標本中相應(yīng)抗原或抗體的量成正比例的,因此,,可以按底物顯色的程度顯示試驗結(jié)果,。
安全性
① 避免直接接觸終止液和底物A、B,。一旦接觸到這些液體,,請盡快用水沖洗。
② 實驗中不要吃喝,、抽煙或使用化妝品,。
③ 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
人白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA試劑盒實驗中封閉
1.ELISA實驗中,,蔗糖本身沒有封閉作用;
2.封閉液一般是BSA,、酪蛋白等或者是Tween等。
3.加蔗糖的主要目的是保護ELISA板子吸附(包被)的蛋白,,起到“保護劑”的作用,。
4.蔗糖溶液一般在ELISA板子經(jīng)過BSA封閉后加,當然也有將蔗糖加到封閉液中同時進行處理,。
ELISA試劑盒的操作技術(shù)有哪些影響,?
1.合理安排檢測量,以免反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長,。
2.加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干,。
3.嚴格按照試劑說明書進行操作,。操作前將試劑在室溫下平衡30~60min。
4.加樣后及時放人孵箱,。標本較多時,,要分批操作。按說明步驟嚴格控制操作時間,,防止孵育時間人為延長,,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*,。
5.封板溫育時,,各孔一定要封嚴,防止陽性標本的液體蒸發(fā),,產(chǎn)生周邊現(xiàn)象從而導(dǎo)致“花板”的出現(xiàn),。
為何選擇上海滬鼎生物科技有限公司人白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA試劑盒?
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