Elisa試劑盒簡單介紹：

【產(chǎn)品名稱】：人纖溶酶原激活劑(PLGA)ELISA試劑盒

【英文名稱】：Human plasminogen activator,PLGA ELISA KIT

【檢測種屬】：人、大鼠、小鼠等動(dòng)植物,。

【產(chǎn)品用途】：被測樣品定性或定量分析

【產(chǎn)品規(guī)格】：48T,、96T

【檢測方法】：酶免法/酶聯(lián)免疫法(ELISA)

【保存條件】：2-8℃

【供 貨 期】：1-3天(現(xiàn)貨供應(yīng))

【產(chǎn)品性狀】：液體盒裝

【服務(wù)優(yōu)勢】：全程提供ELISA實(shí)驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)和ELISA試劑盒免費(fèi)代測

【樣本儲(chǔ)存】：收集標(biāo)本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對(duì)收集后當(dāng)天進(jìn)行檢測的標(biāo)本,，儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆?，如有特殊原因需要周期收集?biāo)本，將標(biāo)本及時(shí)分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存,。避免反復(fù)凍融,。標(biāo)本2-8℃可保存48小時(shí)，-20℃可保存1個(gè)月,。-70℃可保存6個(gè)月,。部分激素類標(biāo)本需添加抑肽酶。

人纖溶酶原激活劑(PLGA)ELISA試劑盒操作步驟

1,、準(zhǔn)備：從冰箱取出試劑盒,，室溫復(fù)溫平衡30分鐘。

2,、配液：用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液,。

3、加標(biāo)準(zhǔn)品和待測樣本：取足夠數(shù)量的酶標(biāo)包被板,，固定于框架上,，分別設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測樣本孔和空白對(duì)照孔,，記錄各孔位置,，在標(biāo)準(zhǔn)品孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品50μL；待測樣本孔中先加入待測樣本10μL,，再加樣本稀釋液40μL（即樣本稀釋5倍）,；每孔再加入酶標(biāo)工作液100μL；空白對(duì)照孔不加,。

4,、溫育：37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5,、洗板：棄去液體,，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液,，靜置1min,，甩去洗滌液，吸水紙上拍干,，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)按說明書操作洗板）,。

6、顯色：每孔先加入顯色劑A 液50μL，再加入顯色劑B液 50μL,，37℃避光顯色15min,。

7、終止：取出酶標(biāo)板,，每孔加終止液50μL,，終止反應(yīng)（顏色由藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

8,、測定：以空白孔調(diào)零,，在終止后15分鐘內(nèi)，用450nm波長測量各孔的吸光值（OD值）,。

9,、計(jì)算：根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度及對(duì)應(yīng)的OD值，計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程,，再根據(jù)樣本的OD值,，在回歸方程上計(jì)算出對(duì)應(yīng)的樣品濃度，也可以使用各種應(yīng)用軟件來計(jì)算,。zui終濃度為實(shí)際測定濃度乘以稀釋倍數(shù),。

人纖溶酶原激活劑(PLGA)ELISA試劑盒的基本原理有這幾條： 

  1.抗原或抗體能以物理性地吸附于固相載體表面，可能是蛋白和聚苯乙烯表面間的疏水 性部分相互吸附,，并保持其免疫學(xué)活性,；  

  2.抗原或抗體可通過共價(jià)鍵與酶連接形成酶結(jié)合物，而此種酶結(jié)合物仍能保持其免疫學(xué) 和酶學(xué)活性,； 

  3.酶結(jié)合物與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后,，可根據(jù)加入底物的顏色反應(yīng)來判定是否有免疫反 應(yīng)的存在，而且顏色反應(yīng)的深淺是與標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的量成正比例的,，因此,，可以按底物顯色的程度顯示試驗(yàn)結(jié)果。 

人纖溶酶原激活劑(PLGA)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中封閉

  1.ELISA實(shí)驗(yàn)中,，蔗糖本身沒有封閉作用;

  2.封閉液一般是BSA,、酪蛋白等或者是Tween等。

  3.加蔗糖的主要目的是保護(hù)ELISA板子吸附(包被)的蛋白,，起到“保護(hù)劑”的作用,。

  4.蔗糖溶液一般在ELISA板子經(jīng)過BSA封閉后加，當(dāng)然也有將蔗糖加到封閉液中同時(shí)進(jìn)行處理,。

人纖溶酶原激活劑(PLGA)ELISA試劑盒的操作技術(shù)有哪些影響,？

  1.合理安排檢測量，以免反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長,。

  2.加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干,。

  3.嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,。操作前將試劑在室溫下平衡30～60min,。

  4.加樣后及時(shí)放人孵箱,。標(biāo)本較多時(shí)，要分批操作,。按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間,，防止孵育時(shí)間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,，難以清洗*,。

  5.封板溫育時(shí)，各孔一定要封嚴(yán),，防止陽性標(biāo)本的液體蒸發(fā),，產(chǎn)生周邊現(xiàn)象從而導(dǎo)致“花板”的出現(xiàn)。