詳細(xì)介紹
人干細(xì)胞因子受體(SCFR)ELISA試劑盒試驗(yàn)原理
ELISA檢測(cè)試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知待測(cè)物質(zhì)濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè),。先將待測(cè)物質(zhì)和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育,。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP,。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌,,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,,然后加入底物A,、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用,。產(chǎn)生顏色,。顏色的深淺和樣品中待測(cè)物質(zhì)的濃度呈比例關(guān)系。
產(chǎn)品規(guī)格
規(guī)格 可測(cè)樣數(shù) 標(biāo)準(zhǔn)孔 空白對(duì)照 產(chǎn)地 庫(kù)存
96T 85個(gè)樣 10 1 進(jìn)口 現(xiàn)貨
48T 37個(gè)樣 10 1 進(jìn)口 現(xiàn)貨
1. 可在450nm處進(jìn)行讀數(shù)的酶標(biāo)儀,;
2. 能精確吸取10-200μL的移液器,;
3. 可調(diào)多道(8)移液器(50-200μL);
4. 供可調(diào)多道移液器使用的試劑存放槽,;
5. 洗瓶或洗板機(jī),;
6. 蒸餾水或去離子水;
7. 1升的圓柱形量筒,;
8. 移液器:1和(10或25 mL),;
9. 移液器槍頭;
10. 紙巾,;
11. 計(jì)時(shí)器,,用以監(jiān)控溫育步驟;
安全性
1)避免直接接觸終止液和底物A,、B,。一旦接觸到這些液體,,請(qǐng)盡快用水沖洗。
2)實(shí)驗(yàn)中不要吃喝,、抽煙或使用化妝品,。
3)不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
人干細(xì)胞因子受體(SCFR)ELISA試劑盒操作注意事項(xiàng)
1)試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,,使用前恢復(fù)到室溫,。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存,。
2)實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,,密封保存,以免變質(zhì),。
3)不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好,。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用,。
4)使用一次性的吸頭以免交叉污染,,吸取終止液和底物A、B液時(shí),,避免使用帶金屬部分的加樣器,。
5)使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品,。
6)洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
7)底物A應(yīng)揮發(fā),,避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子,。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下,。避免用手 接觸,,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值,。
8)加入試劑的順序應(yīng)*,,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
9)按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間,、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作,。
樣品收集、處理及保存方法
1)血清-----操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2)血漿-----EDTA,、檸檬酸鹽,、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒,。
3)細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物,。
4)組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,,取上清液
5)保存------如果樣品不立即使用,,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍,。盡可能的不要使用溶血或高血脂血,。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾,。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍,。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
試劑的準(zhǔn)備
1)標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋?xiě)?yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備,,不能儲(chǔ)存,。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。
2)洗滌緩沖液(50×)的稀釋?zhuān)赫麴s水50倍稀釋,。
人干細(xì)胞因子受體(SCFR)ELISA試劑盒操作步驟
1)使用前,,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,,產(chǎn)生加樣上的誤差。
2)根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔,。 每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定,,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔,。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。
3)加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔,、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi),。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,,輕輕振蕩混勻,,37℃溫育1小時(shí)。
4)甩去孔內(nèi)液體,,每孔加滿(mǎn)洗滌液,,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作3 次,。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次,。
5)每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘,。
6)甩去孔內(nèi)液體,,每孔加滿(mǎn)洗滌液,振蕩30秒,,甩去洗滌液,,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次,。如果用洗板機(jī)洗滌,,洗滌次數(shù)增加一次。
7)每孔加入底物A,、B各50ul,,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘,。避免光照,。
8)取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果,。
9)在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線(xiàn)性的,,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)無(wú)法得到精確的結(jié)果,。
ELISA試劑盒優(yōu)點(diǎn)
1. 靈敏度:zui小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線(xiàn)性,。樣品線(xiàn)性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990,。
2. 特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。
3. 重復(fù)性:板內(nèi),、板間變異系數(shù)均小于10%,。
結(jié)果判斷與分析
1、儀器值:于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值
2,、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),,相應(yīng)的待測(cè)物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線(xiàn),,樣品的待測(cè)物質(zhì)含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)換算出相應(yīng)的濃度,。
人干細(xì)胞因子受體(SCFR)ELISA試劑盒訂貨說(shuō)明
1)賣(mài)方確保所訂產(chǎn)品與目錄技術(shù)指標(biāo)保持*,;
2)為了確保買(mǎi)方產(chǎn)品在運(yùn)輸中的質(zhì)量,對(duì)有特殊要求的低溫產(chǎn)品予以濕冰運(yùn)輸,。
3)收到貨物后如出現(xiàn)質(zhì)量問(wèn)題,,買(mǎi)方需在收到貨物一個(gè)月內(nèi)向賣(mài)方提出書(shū)面異議。買(mǎi)方逾期不提出異議,,視為貨物符合其要求,,賣(mài)方不付任何責(zé)任。
4)出現(xiàn)質(zhì)量以外的問(wèn)題,,如破損等,,買(mǎi)方應(yīng)在收貨后一個(gè)周內(nèi)提出。買(mǎi)方未按時(shí)提出異議,,視為該產(chǎn)品合格,。
本公司對(duì)所有售出的產(chǎn)品保證質(zhì)量,并提供良好的售后服務(wù),,有關(guān)產(chǎn)品質(zhì)量的投訴,,請(qǐng)?jiān)谑盏截浳锏?2天內(nèi)以書(shū)面形式提出,并向我公司技術(shù)人員提供相應(yīng)的材料,,我們會(huì)及時(shí)派人解決,。所有形式的賠償或退換僅限于產(chǎn)品本身,不涉及其他間接內(nèi)容,。凡購(gòu)買(mǎi)本公司任意款elisa試劑盒,,均可享受免費(fèi)代測(cè)服務(wù),并提供技術(shù)指導(dǎo),。